基因佐剂注射时相对HBV preS_2S疫苗免疫作用的影响

目的:HBV preS2S基因疫苗接种不同时相应用佐剂pcDNA3·1IL-2/Fc,观察其对诱导免疫反应效果的影响。方法:采用HBV preS2S DNA基因疫苗作为基础免疫,重组质粒pcDNA3·1IL-2/Fc作为佐剂加强免疫,设计实验组与HBVpreS2S基因疫苗同时及在注射BALB/c小鼠后第3天加用佐剂,采用0、2、4周的方案接种,检测各次接种后抗体水平、免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性和细胞因子分泌水平。结果:HBV preS2S注射3天后应用佐剂的免疫小鼠,其抗体滴度、免疫脾细胞杀伤活性、增殖活性和Th1型细胞因子分泌水平均比同时免疫组、单独应用HBV preS2S组及空载体对照组明显增强。结论:预先接种疫苗后加用IL-2/Fc佐剂,能明显增强疫苗免疫效应。

HBV相关肝细胞癌患者PPP2R3A基因的表达与预后相关性分析

目的探讨蛋白磷酸酶2A调节亚基B″α(PPP2R3A)基因在HBV相关肝细胞癌患者中的表达水平以及与预后的关系。方法利用免疫组织化学方法检测PPP2R3A蛋白在82例乙肝相关性肝癌和21例良性肝病组织中的表达,采用RT-PCR方法检测mRNA水平。结果PPP2R3A在肝癌组织中的表达水平(95.12%)明显高于癌旁组织(43.9%)(P<0.05)。PPP2R3A蛋白的表达强度与肝癌患者的AFP值相关,具有统计学差异(P<0.05)。RT-PCR检测结果显示,肝癌组织中PPP2R3A mRNA中位表达水平为0.183(0.008~0.667),明显高于癌旁组织的0.098(0.004~0.583)(Z=6.839,P<0.05)。通过分析随访肝癌患者的生存期资料,结果发现PPP2R3A高表达组患者的总生存期(OS)的中位生存期为46.6个月,与低表达组的82.9个月比较差异有统计学意义(P<0.05)。PPP2R3A高表达组患者的RFS的中位生存期为18.3个月,低于低表达组的42.6个月(P<0.05)。PPP2R3A高表达组患者的PFS的中位生存期为15.9个月,低于低表达组的34.4个月(P<0.05)。PPP2R3A高表达组患者的DSS的中位生存期为70.5个月,低于低表达组的84.7个月(P<0.05)。结论PPP2R3A蛋白在HBV相关肝细胞癌组织及血清中呈高表达,且与肝癌的临床病理特征有相关性,PPP2R3A的高表达可能与肝癌的不良预后有关。

HBVpreS_1-Ag、HBVpreS_2-Ag、HBV-DNA、HBVM的相关性分析及其意义

探讨HBV感染者血清中HBVM、HBV -DNA、HBVpreS1-Ag及HBVpreS2 -Ag的相关性及其意义。采用ELISA法检测HBVM、HBVpreS1抗原和HBVpreS2 抗原 ,FQ -PCR定量检测HBV -DNA。HBeAg与HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原、HBV -DNA在HBV感染者血清中具有良好的平行关系 ,其阴 /阳性符合率均高于 73 1%。HBV -DNA、HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原之间均无显著性差异 (P >0 0 5 )。HBeAg、HBV -DNA、HBVpreS1抗原、HBVpreS2抗原之间高度相关。HBVpreS1抗原和HBVpreS2 抗原较HBeAg敏感。应用HBVpreS1抗原、HBVpreS2 抗原、HBV -DNA及HBVM同时进行联合检测 ,对HBV感染的早期诊断 ,了解HBV复制、转归 ,更确切地掌握病情的发生。

巨噬细胞及其细胞因子在HBV相关慢加急性肝衰竭患者短期预后中的临床价值分析

目的分析巨噬细胞(macrophage,Mφ)及其相关细胞因子在HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV associated acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)疾病预后中的有关变化,探讨Mφ极化状况对评估HBV-ACLF患者预后的临床价值。方法纳入107例于新疆医科大学第一附属医院确诊的HBV-ACLF患者开展前瞻性研究,收集患者的基线临床资料,并检测患者1型巨噬细胞(M1)和2型巨噬细胞(M2)水平,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)和白介素10(IL-10)等相关细胞因子表达水平,根据患者的90 d生存情况,将研究对象分为存活组(n=42)和死亡组(n=65)。分析研究对象Mφ及其相关细胞因子与肝脏功能指标的相关性,采用Logistic回归分析独立相关因素,并绘制受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC curve)来分析以上指标对HBV-ACLF患者预后的评判能力。结果死亡组患者的总胆红素(T-BIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分水平显著高于生存组患者(P<0.05)。MELD评分与M1、M1/M2、TNF-α、IL-6、TGF-β和IL-10呈正相关关系,与M2呈负相关关系。Logistic回归发现M2是HBV-ACLF患者预后的独立保护因素而MELD评分和TGF-β是独立危险因素。ROC curve显示,MELD评分联合M2或TGF-β可提高对HBV-ACLF患者预后的预测能力。结论本研究发现MELD评分、M2和TGF-β均是HBV-ACLF患者90 d预后的独立相关因素,且使用MELD评分联合M2或TGF-β可提高HBV-ACLF患者的临床早期预测效率,为患者开展及时有效的治疗提供理论资料。

HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血中Th1、Th2细胞及其细胞因子的变化和临床价值研究

目的 探讨辅助性T细胞亚群1(Th1)、辅助性T细胞亚群2(Th2)细胞及其细胞因子水平在HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV associated acute-on-chronic liver failure, HBV-ACLF)疾病进展中的相关变化。方法 选取2020年12月-2021年7月新疆医科大学第一附属医院感染中心确诊的45例HBV-ACLF患者为ACLF组,45例慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者为CHB组,同期30例无任何肝病史的健康体检者为健康对照组(HC组)。采用流式细胞术检测Th1、Th2、Th1/Th2水平,采用酶联免疫吸附测定实验检测γ-干扰素(γ-interferon, IFN-γ)和白介素-4(Interleukin, IL-4)表达水平,分析HBV-ACLF患者肝功指标、终末期肝病模型(Model for end-stage liver disease, MELD)评分与Th1、Th2细胞及其细胞因子的相关性。采用受试者工作特征曲线(Receiver operator characteristic curve,ROC)分析上述指标对HBV-ACLF患者疾病严重程度的评判能力。结果 3组血浆丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、总胆红素(Total-bilirubin, T-BIL)等肝功指标,Th1、Th2、Th1/Th2、IFN-γ和IL-4等表达水平均存在显著差异(P均<0.05)。相关性分析发现,Th2、Th1/Th2、IFN-γ与肝功指标和MELD评分显著相关(r>0.4或r<-0.4,P<0.05),且Th1/Th2水平与MELD评分呈强正相关(r>0.7)。ROC曲线发现,Th1、Th2、Th1/Th2及IFN-γ等指标对HBV-ACLF患者的疾病严重程度具有良好的预测能力。结论 在HBV-ACLF疾病进展中Th1、Th2、Th1/Th2、IFN-γ及IL-4表达水平存在显著改变,这对HBV-ACLF的疾病严重程度的预测具有较高的应用价值。

血清GP73、HMGB1、FLP1、sST2与慢性乙型病毒性肝炎患者 HBV-DNA载量、肝功能及肝纤维化标志物的相关性分析

目的 研究血清高尔基体蛋白73(GP73)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、纤维蛋白原样蛋白1(FLP1)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)与慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量、肝功能指标及肝纤维化标志物的相关性。方法 选择滨州市中医医院2021年2月至2022年2月收治的166例CHB患者作为研究对象。测定所有患者的HBV-DNA载量,并根据HBV-DNA载量的差异分为低载量组、中载量组、高载量组。另选取同期健康体检人员60例作为健康对照组。检测并比较各组肝功能指标水平、肝纤维化标志物水平,以及血清GP73、HMGB1、FLP1、sST2水平。以Spearman/Pearson相关分析血清GP73、HMGB1、FLP1、sST2与HBV-DNA载量、肝功能指标及肝纤维化标志物的相关性。结果 低载量组76例,中载量组50例,高载量组40例。低载量组、中载量组、高载量组血清GP73、HMGB1及sST2水平均高于健康对照组(P<0.05);且随着HBV-DNA载量的增加,GP73、HMGB1及sST2水平升高(P<0.05)。低载量组、中载量组、高载量组血清FLP1水平均低于健康对照组(P<0.05);且随着HBV-DNA载量的增加,FLP1水平下降(P<0.05)。中载量组、高载量组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及γ-谷氨酰转移酶(GGT)水平均高于低载量组(P<0.05),且高载量组ALT、AST及GGT水平高于中载量组(P<0.05)。中载量组、高载量组透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及Ⅳ型胶原(CⅣ)水平均高于低载量组(P<0.05),且高载量组HA、LN及CⅣ水平均高于中载量组(P<0.05)。血清GP73、HMGB1、sST2与CHB患者HBV-DNA载量、ALT、AST、GGT、HA、LN、CⅣ水平均呈正相关(r>0,P<0.05),而血清FLP1与CHB患者HBV-DNA载量、ALT、AST、GGT、HA、LN、CⅣ水平呈负相关(r<0,P<0.05)。结论 血清GP73、HMGB1、FLP1、sST2水平可有效反映CHB患者的HBV-DNA载量、肝功能和肝纤维化情况。

2种消毒剂对HBsAg、HBV DNA灭活效果的试验观察

[目的]对复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛破坏HBsAg及HBVDNA的效果进行对比观察。[方法]采用悬液定量法进行试验。[结果]在19℃～21℃,以含有效季铵盐成分5000mg/L该消毒剂水溶液对HBsAg悬液作用30min,6000mg/L时作用20min,10000mg/L时作用10min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性;以含有效季铵盐成分5000mg/L该消毒剂水溶液对含HBVDNA的血清作用30min,含有效季铵盐成分6000mg/L、10000mg/L分别作用10min,对HBVDNA的杀灭率达99.9%。2%强化戊二醛与HBsAg悬液作用10min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性,与含HBVDNA的血清作用10min,对HBVDNA的杀灭率达99.9%。[结论]复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛均可将HBsAg及HBVDNA破坏,在消毒实践中可选择使用。

插入CpG序列和IL-2基因的HBV重组真核表达载体的构建

目的 :构建插入CpG序列和IL - 2基因的HBV重组真核表达载体。方法 :采用PCR产物直接克隆方法 ,构建了编码HBsAg基因的真核细胞表达载体pcDNA3.1+ -HBsAg ;并以此为基础通过重组DNA技术分别构建了在不同位置含不同数目的CpG序列的重组质粒 pcDNA3.1+ -S/CpG1、pcDNA3.1+ -S/CpG2、pcDNA3.1+ -S/CpG1+CpG2及IL - 2和HBsAg融合基因的表达载体pcDNA3.1+ -S/IL - 2。通过脂质体基因转移技术导入Cos- 7细胞中检测其瞬间表达。结果 :通过酶切、PCR及测序证实已分别正确完整地插入IL - 2基因和CpG序列 ,体外转染Cos- 7细胞后可见基因的表达和分泌。结论 :本实验成功构建了我们所设计的 5种重组质粒 。

慢性HBV感染患者中Th细胞的检测及其临床意义

目的:了解慢性HBV感染患者中Th1、Th2细胞的百分率及其与肝炎活动指标、免疫球蛋白水平和病毒复制的关系。方法:通过免疫荧光染色技术标记乙肝患者和正常对照者外周血单个核细胞表面CD4分子和细胞内IFN-γ或IL-4分子,用流式细胞术分析标记结果。结果:慢性HBV感染患者Th1细胞数量和Th1/Th2细胞的比值明显低于正常人(13.1±4.3vs18.7±10.0,P<0.05,6.3±3.7vs12.9±5.9,P<0.01),以HBV慢性携带组(8.1±0.6)和慢性肝炎轻度组(12.2±3.4)降低最为明显;而Th2细胞的数量(%)在慢性肝炎组则明显增加(2.9±2.2vs1.6±0.8,P<0.05)。T辅助细胞亚群的变化与肝功能和病毒复制指标的相关性不显著。结论:慢性HBV感染患者存在着Th1、Th2细胞数量和Th1/Th2细胞比例的异常,炎性损伤不明显时以Th2细胞比率的增加为主,此种异常可能导致患者的肝脏损伤程度的差异及疾病持续时间的不同。

IL-33、TIMP-1、MMP-2联合乙肝五项指标诊断慢性HBV肝纤维化的应用价值

目的研究白细胞介素-33(IL-33)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)联合乙肝五项指标诊断慢性HBV肝纤维化的应用价值。方法回顾性选取2020年1月至2021年12月于广州市第一人民医院南沙医院接受诊断的慢性HBV肝纤维化患者116例纳入研究组,肝纤维化分期:S1期16例,S2期39例,S3期47例,S4期14例。另同期体检健康志愿者116名纳入对照组。比较两组、研究组不同肝纤维化分期患者血清IL-33、TIMP-1、MMP-2水平。分析研究组乙肝五项患者在不同肝纤维化分期中的分布。分析乙肝五项、IL-33、TIMP-1、MMP-2与肝纤维化分期的相关性。结果研究组血清IL-33、TIMP-1、MMP-2水平为(562.86±59.30)pg/mL、(185.16±21.03)μg/L、(443.87±47.06)μg/L,均分别高于对照组[(142.96±17.35)pg/mL、(127.53±14.86)μg/L、(249.86±27.76)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组不同肝纤维化分期血清IL-33、TIMP-1、MMP-2水平差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组乙肝五项患者在不同肝纤维化分期患者中的分布差异均有统计学意义(P<0.05)。大三阳、小三阳及IL-33、TIMP-1、MMP-2与肝纤维化分期均呈正相关(r=0.430、0.368、0.462、0.538、0.528,P<0.05)。HBsAg阴性、1.4阳性、1.5阳性与肝纤维化分期均无相关性(P>0.05)。结论慢性HBV肝纤维化患者大三阳、小三阳及IL-33、TIMP-1、MMP-2与肝纤维化分期呈正相关,IL-33、TIMP-1、MMP-2联合乙肝五项指标对慢性HBV肝纤维化具有较高的诊断价值。

HBV preS2S-rhGM-CSF融合基因表达质粒的构建和表达

目的 :研究GM CSF和preS2对乙肝DNA疫苗的免疫增强作用。方法 :采用PCR方法 ,扩增HBVpreS2 +S基因约 84 6bp的片段和rhGM CSF(包括甘氨酸接头 )基因 4 5 0bp的片段。通过T A克隆技术和基因定向克隆 ,构建融合基因的真核表达质粒pcDNA3.1 S2S rhGM CSF ,并在HepG2细胞中表达。结果 :经酶切、PCR及DNA测序鉴定 ,融合基因表达质粒HB VpreS2S rhGM CSF成功地构建。将其转染HepG2细胞后 ,目的基因的转录通过RT PCR得到证实 ,而且表达的融合蛋白能与抗 HBs、抗 preS2和抗 GM CSF单克隆抗体 (mAb)均产生特异性反应。结论 :融合基因表达载体pcDNA3.1 S2S rhGM CSF的成功构建并表达 。

HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化

目的优化HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件。方法通过改变重组质粒的宿主菌、培养基、诱导温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间等条件,利用SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件,分析以上条件改变对表达产物表达量的影响。将重组质粒连续传100代,检测融合蛋白的表达稳定性。结果重组质粒在大肠杆菌BL21菌株、GS培养基、28℃、0.5mmol/L IPTG或1.5mmol/L乳糖诱导4h时,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的43.5%。重组质粒传代100代,融合蛋白的表达稳定。结论已确定出了融合蛋白在大肠杆菌中表达的最佳条件。

IL-2/IFN-γ融合蛋白质粒增强HBV DNA疫苗免疫原性的实验研究(英文)

目的评价IL-2/IFN-γ融合蛋白基因质粒(pFP)增强HBV DNA疫苗(pS2.S)免疫原性的佐剂作用。方法构建IL-2/IFN-γ融合蛋白和HBV包膜中蛋白(PreS2+S)编码基因的重组真核表达质粒,根据pFP编码的目的基因序列分子模拟IL-2/IFN-γ融合蛋白的空间结构,检测质粒体外转染细胞表达目的基因产物及其生物活性;体内实验采用提高质粒转染效率的在体电脉冲(EP)技术免疫健康BALB/c小鼠,分别以ELISA及免疫酶联斑点(ELISPOT)方法检测小鼠血清抗HBs及脾脏HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答水平。结果pFP能够以融合蛋白的形式正确表达IL-2和IFN-γ,其活性域保持相对独立,其分子模拟的结果得到了质粒体外细胞转染检定实验的证实。EP介导的HBV DNA免疫反应中,pS2.S+pFP组血清抗-HBs[(51.2±50.5)mIU/mL,89%]及HBsAg特异性分泌IFN-γ的淋巴细胞应答[(207±103)IFN-rT细胞SFCs/3×105脾细胞,78%]水平和阳性率均显著高于pS2.S+pcDNA3.1组[抗-HBs:(14.8±7.6)mIU/mL,64%;IFN-γT细胞:(84±70)SFCs/3×105脾细胞,28%](P<0.05)。结论实验结果提示Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的融合蛋白基因表达质粒可提高HBV DNA疫苗的免疫效果,并促进初始T细胞向Th1方向分化。

甘草甜素对HBsAg低表达HepG2.2.15细胞株HBV感染及TLR2、4的影响

目的:探讨甘草甜素(GL)对HepG2.2.15细胞上清HBV DNA、e抗原分泌,Toll样受体2、4(TLR2、4)信号分子的表达及对细胞增殖的影响。方法:实时荧光定量PCR检测HBV DNA表达,ELISA检测HBV所分泌抗原,MTT检测细胞增殖活性,直接免疫荧光流式细胞术(FCM)检测TLR2、4在细胞株上表达的阳性细胞率,并与空白对照组对比。结果:HBsAg在该细胞株低表达,但HBeAg则明显阳性,因此研究了GL对e抗原的影响,给药后第3d e抗原总体均数间差异显著(P<0.01),但只有400μg/ml组与对照组间比较显著降低(P<0.05),800μg/ml组则较其余GL组明显升高(P<0.01)。HBV DNA给药后第3 d总体均数间比较差异有显著性,只有50μg/ml组较对照组降低,但无统计学意义(P>0.05),其余各组均较对照组升高;各组TLR2、4数值总体均数间有显著差异(P<0.01)。除200μg/ml组外,各剂量组与对照组比较显示两者均显著上调(P<0.05),但均无剂量依赖关系;MTT实验显示200μg/ml以下三个剂量组均可促进细胞增殖,但只有200μg/ml组与对照组间差异显著(P<0.05);400、800μg/ml两组均显著抑制细胞增殖(P<0.01);而MTT分别与HBeAg、HBV DNA呈显著负相关(P<0.05)。结论:研究表明,GL对HepG2.2.15变异株的病毒复制及e抗原分泌可能具有双向作用;细胞的存活数与病毒复制及e抗原呈负相关;TLR2在变异株低表达,GL呈非剂量依赖关系上调TLR2、4表达,至少在该细胞株GL影响HBV的机理与TLR2、4信号的改变无关,但有可能在体内通过免疫途径影响HBV。

阿德福韦酯对慢性乙肝患者Th1/Th2类细胞因子、肝功能及HBV DNA复制的影响

目的探讨阿德福韦酯对慢性乙肝患者Th1/Th2类细胞因子、肝功能及HBV DNA复制的影响。方法选取2008年2月至2012年2月于该院接受诊断和治疗的慢性乙肝患者160例,随机分为观察组与对照组,每组80例。对照组给予常规保肝和对症治疗,观察组在此基础上给予阿德福韦酯药物治疗。比较两组治疗前后干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量的变化以及HBV DNA复制水平。结果观察组治疗后6个月血清IFN-γ含量为(71.3±5.5)ng/L,明显高于对照组(P<0.05)。观察组治疗后6个月血清IL-4含量为(31.7±4.4)ng/L,明显低于对照组(P<0.05)。观察组治疗后6个月ALT和AST含量分别为(33.1±4.9)、(35.2±5.1)U/L,均明显低于对照组(P<0.05)。观察组治疗后HBV DNA<1×103拷贝/ml的例数明显多于对照组(P<0.05)。结论阿德福韦酯能显著影响慢性乙肝患者Th1/Th2类细胞因子含量,恢复患者肝功能,抑制HBV DNA复制。

PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物常见模式和Pre-S2相互关系研究

目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)DNA与六种常见HBV血清免疫学标志物模式、前S2 蛋白抗原 (Pre -S2 )之间的相互关系及其临床检测意义。方法 采用PCR法对HBVDNA、ELISA法对HBV血清免疫学标志物、Pre -S2 同时进行检测。结果 1484例六种常见模式HBVDNA阳性率依次为 89 8% >5 5 6 % >2 1 8% >7 5 % >7 1% >6 8% ,即模式 (1) >(3) >(2 ) >(5 ) >(6 )>(4) ;而HBV血清免疫学标志阳性例数依次为 (2 ) >(1) >(3) >(5 ) >(4) >(6 )。 (2 )、(3)种模式HBVDNA与Pre S2阳性率比较P <0 0 1,其余 (1)、(4)～ (6 )种模式HBVDNA与Pre-S2 阳性检出率无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 HBV血清免疫学标志物、Pre -S2、HBVDNA的检测 ,三者缺一不可 ,ELISA法检测HBV血清免疫学标志物、Pre -S2 ,只是HBV的表型指标 ,提供HBV感染的间接证据。而PCR -HBVDNA的检测是HBV感染与否的直接证据。因此它们各自有其独特的临床检测意义。

细胞周期蛋白D2对HBV复制的影响

目的研究细胞周期蛋白D2(cyclin D2)对HBV复制的影响并探讨其作用的分子机制。方法运用qRT-PCR分析细胞周期蛋白家族成员在HBV复制细胞系中的表达水平;qRT-PCR、Western blot检测HBV复制对cyclin D2表达的影响;Western blot验证cyclin D2沉默效果,Real-time PCR,Southern blot验证沉默cyclin D2对HBV复制中间体表达的影响及ELISA验证cyclin D2对HBs Ag、HBe Ag分泌的影响;并检测cyclin D2过表达对HBV复制的影响。结果在细胞周期蛋白中,HBV复制对cyclin D2表达的影响最为显著,HBV感染明显促进cyclin D2 mRNA和蛋白水平的升高,下调cyclin D2显著抑制HBV的复制中间体的表达,HBs Ag和HBe Ag的分泌,过表达cyclin D2明显促进HBV的复制。结论 HBV复制可以促进细胞内cyclin D2的表达,cyclin D2有利于HBV的复制。这一发现为降低HBV的感染率,探索治疗乙型肝炎新的靶点提供了新的策略。

乙型肝炎患者白细胞介素2与病毒e系统及HBVDNA关系的观察

根据不同的乙肝病毒标志,将患者分成四组:HBeAg(+)组,抗HBe(+)组;HBVDNA(+)组(包括DNAP同时阳性);及“四阴组” (e系统、HBVDNA、DNAP及抗HBc-IgM均阴性,其它乙肝病毒标志可阳性)。比较他们的血清IL-2值,结果如下:1.四组患者的IL-2水平都极显著低于健康对照组(p<0.01)。2.与“四阴组”比较,HBeAg(+)组偏低明显(p<0.01),HBVDNA(+)组偏低比较明显(p<0.05),抗HBe(+)组不显示差异(p>0.05)。3.HBeAg(+)组、抗HBe(+)组及HBVDNA(+)组之间IL-2无明显差异(p>0.05)。

HBV PreS2-MBP融合蛋白质粒构建及在大肠杆菌中的表达

目的在大肠杆菌pMALP2x系统中表达HBVPreS2MBP融合蛋白,并对其进行鉴定和纯化。方法利用DNA重组技术,将全长的HBVPreS2蛋白基因克隆至原核表达载体pMALP2x中,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。表达产物经SDSPAGE和Westernblot检测,并经阴离子交换层析、AmyloseResin亲和层析纯化。结果成功构建了重组载体pMALP2x/S2,诱导蛋白为MBP标记的可溶性的PreS2MBP融合蛋白,具有良好的抗原性,可经AmyloseResin亲和层析纯化。结论pMALP2x系统可成功表达PreS2MBP融合蛋白。

新加达原饮体外抗HBV的实验研究

目的:观察新加达原饮(IXJDY)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测IXJDY对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在TC0基础上应用不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,荧光定量PCR法测定细胞外HBV DNA的含量。结果:TC50=14.22mg/mL,TC0=8.13mg/mL,新加达原饮对HepG2.2.15细胞毒性较低。无毒浓度的新加达原饮在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBV DNA的分泌(P<0.05,P<0.01);且呈现量效和时效关系。结论:IXJDY在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。