环介导等温扩增(LAMP)试剂盒检测石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)

目的建立一种检测石蜡包埋的肝组织中乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的新方法,并探讨其应用价值和临床意义。方法提取30例慢性HBV感染患者的石蜡包埋肝组织中的DNA,采用质粒安全ATP依赖性DNA酶(plasmid-safe ATP-dependent DNase,PSAD)消化,去除非cccDNA后,加入引物及Bst DNA酶进行环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),将检测结果与临床实验室资料结合并进行分析,以判断其临床应用价值。结果 30例HBV感染患者中,有17例HBV cccDNA阳性,阳性检测率56.67%。其中肝癌5例、肝硬化4例、重型乙型肝炎5例、慢性乙型肝炎(轻-中度)3例。提示肝组织HBV cccDNA阳性可能与疾病进展密切相关,与血清HBV cccDNA阳性有一定的相关性,与乙型肝炎病毒血清免疫标志物以及肝功能状况无明显相关。结论 LAMP法能检测到石蜡包埋肝组织中的HBV cccDNA,结合临床实验室资料,对判断抗病毒药物疗效及研究乙型肝炎致病机制具有一定的意义。

HBV共价闭合环状DNA的表观遗传调控:对慢性乙型肝炎进行表观遗传治疗的启示

乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个严重的世界公共卫生问题。慢性乙型肝炎(简称慢乙肝)难以治愈的主要原因之一是难以清除作为病毒基因组保存形式和病毒转录模板的HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)。HBVcccDNA是被宿主组蛋白和非组蛋白修饰而稳定存在的游离病毒基因组。越来越多的证据表明,cccDNA的表观遗传修饰有助于病毒复制和慢性HBV感染的结局。

HBV感染与宿主基因及病毒DNA甲基化

乙型肝炎病毒(HBV)感染是慢性肝炎、肝硬化及肝癌的重要病因,HBV感染诱导的宿主基因组甲基化及病毒自身DNA甲基化改变可能是病毒感染慢性化及慢性肝病形成的重要发病机制之一,HBV基因组及HBV共价闭合环状DNA的甲基化在调控病毒复制和蛋白表达中起着重要作用。探讨HBV DNA甲基化对于研究病毒的致病机制、指导HBV感染的治疗有重要意义。

重组HBV共价闭合环状DNA在小鼠模型中长期持留并诱导慢性肝炎

【据《Hepatology》2018年1月报道】题：重组HBV共价闭合环状DNA在小鼠模型中长期持留并诱导慢性肝炎（作者Li G等） HBV共价闭合环状DNA（cccDNA）是病毒持续感染的分子基础。研究者早先发展了一种基于位点特异性重组,诱导HBV重组cccDNA（rcccDNA）产生的策略。通过尾静脉高压注射,rcccDNA能够诱导免疫机能正常小鼠模型中短暂延长的病毒抗原血症,类似于HBV急性感染的疾病过程。

利用乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA构建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型

目的通过水动力法注射乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)构建C57BL/6小鼠慢性乙型肝炎病毒感染的模型。方法取29只C57BL/6小鼠,分为实验组、对照组和空白组,应用水动力法分别注射HBV cccDNA、pAAV-HBV1.2及等渗盐水,于注射后收集不同时间点的血清和肝组织。利用放射免疫法检测血清样本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);荧光定量PCR检测血清和肝组织中HBV DNA拷贝数;免疫组织化学法检测肝组织中HBsAg和乙型肝炎病毒核心抗原(HBc Ag)的表达;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;使用SPSS 17.0对数据进行统计学分析。结果实验组HBsAg和HBeAg表达均呈现4个上升-下降曲线:HBsAg峰值分别出现在第3天、第3周、第7周和第9周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第1周、第4周和第10周。对照组HBsAg和HBeAg表达分别呈现2个或3个明显的峰:HBsAg峰值分别出现在第3天和第8周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第3周和第10周。空白组未检测出HBsAg和HBeAg。实验组HBV DNA拷贝数高于对照组的拷贝数(P<0.01);肝组织中HBV DNA拷贝数高于同期血清中的拷贝数(P<0.01);实验组和对照组的肝组织中均有HBsAg和HBc Ag的表达;实验组与对照组出现肝脏细胞炎症、肝细胞纤维化、肝细胞坏死等病理变化,而空白组正常。结论利用水动力法向C57BL/6小鼠体内转入HBV cccDNA,成功建立了慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型,与对照组比较,新建立的小鼠乙肝模型具有更高的HBV表达,动物模型为研究乙型肝炎病毒HBV cccDNA的感染及其引起肝损伤的机制奠定了基础。

无锡地区HBsAg-/HBV DNA+献血人群HBcrAg检出特点分析

目的分析新型血清标志物乙型肝炎核心相关抗原(HBcrAg)在无锡地区HBsAg-/HBV DNA+献血人群中的检出特点。方法通过电话追踪随访了37名既往HBsAg-/HBV DNA+献血者并获得其血清,采用电化学发光法和实时荧光定量PCR核酸筛检出22例HBsAg-/HBV DNA+献血者血清作为OBI组进行HBcrAg酶联免疫吸附法检测。挑选出20名经2遍酶免和1遍核酸筛检的健康献血者的血清作为健康对照组,20例经无锡第五人民医院临床诊断为慢性乙型肝炎患者血清作为实验的CHB组,分别进行HBcrAg酶联免疫吸附法检测;并对OBI组进行HBcrAg与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA的相关性分析。结果37份献血者标本经化学发光法检测HBsAg和核酸筛查,检出22份HBsAg-/HBV DNA+标本即OBI组,检出率59.46%。OBI组与健康对照组、CHB组血清的HBcrAg表达含量分别是(0.92±0.13)ng/mL、(0.47±0.09)ng/mL、(1.14±0.23)ng/mL(P<0.05),OBI组与CHB组的HBcrAg表达均高于健康对照组(P<0.05)。OBI组的HBcrAg与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA指标均无相关性(P>0.05)。结论OBI组与CHB组的HBcrAg表达均高于健康对照组,其血清HBcrAg在一定程度上与HBeAb、HBcAb、ALT、HBV DNA无相关性,HBcrAg在筛查HBsAg-/HBV DNA+献血者中具有较好的应用前景。

乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA

HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸（cccDNA）是嗜肝 DNA病毒基因组的复制中间体，是嗜肝 DNA 病毒部分基因的mRNA和前基因组 RNA的合成模板，在 HBV感染初期即能检测到，且长期存在于细胞核中。其在 HBV 复制过程中起着关键的作用，它的长期存在也是乙型病毒性肝炎慢性化的主要原因之一。HBV cccDNA肝细胞中持续感染及抗病毒治疗复发之间的关系受到广泛的关注与肯定，现就 HBV cccDNA 常用检测方法及其临床意义作一综述。

乙型肝炎自然进程中血清HBV RNA的动态变化及其与肝组织HBV cccDNA的关系

目的定量检测慢性乙型肝炎患者血清乙肝病毒RNA和肝组织乙肝病毒共价闭合环状DNA(HBV cccDNA),分析两种定量指标动态变化及其相关性。方法应用PSAD酶消化+滚环扩增+跨缺口实时荧光PCR方法,定量检测患者甲醛固定石蜡包埋肝组织HBV cccDNA(cccDNA copies/cell),用qPCR定量检测血清样本中HBV RNA的表达水平。结果在慢性乙型肝炎免疫耐受期、免疫清除期、低复制期、HBeAg阴性期患者的血清HBV RNA水平中位数分别是1.01×10^8 copies/mL、3.18×10^6 copies/mL、5.56×10^3 copies/mL和3.8×10^5 copies/mL。在慢性乙型肝炎中,患者血清RNA水平只在免疫清除期与肝组织cccDNA具有相关性(r=0.328,P=0.016),两者在免疫耐受期、低复制期、HBeAg阴性期均没有相关性(r=-0.003,P=0.995;r=-0.581,P=0.171;r=0.041,P=0.870)。HBV RNA复制效率,定义为血清中乙肝病毒RNA载量与肝组织中HBV cccDNA的比值(所有的统计量都经过了对数值转换),其在急性期肝炎患者中明显地低于慢性期患者(0.37 vs.0.99,P<0.05)。在慢性乙型肝炎的免疫耐受期、e抗原阴性期HBV RNA复制效率显著高于低复制期(1.005 vs.0.66,P=0.025;0.90 vs.0.66,P=0.048),在其他几期中差异没有统计学意义。结论在未经治疗的乙型肝炎患者中,血清HBV RNA水平可反映处于慢性乙肝免疫清除期患者肝组织内HBV cccDNA水平,但不能反映慢性乙肝免疫耐受期、低复制期和HBeAg阴性期患者肝组织内HBV cccDNA水平;急性乙肝免疫清除期患者的HBV RNA复制效率明显低于慢性期患者。

慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗过程中肝组织HBVcccDNA变化及与血清学指标的相关性

目的观察慢性乙型肝炎(乙肝)患者在阿德福韦酯(ADV)抗病毒治疗过程中肝组织总的乙肝病毒核酸(HBV tDNA)、cccDNA含量变化及与血清HBV DNA、HBsAg的相关性,探讨肝组织HBV tDNA和cccDNA含量改变在抗病毒治疗中的意义。方法 47例慢性乙肝患者口服ADV10 mg/d,每隔12周检测病毒学、血清学和生化学等指标。47例基线患者和24例治疗48周患者行肝组织活检及肝组织HBV tDNA和cccDNA检测。结果 47例慢性乙肝患者ADV治疗48周后,HBV DNA低于检查下限占36.2%(17/47);ALT和AST复常率分别为76.6%(36/47)和85.1%(40/47)。比较基线和48周均取肝活检的24例患者,48周时血清和肝组织中HBV DNA载量均较基线显著下降(P<0.01),血清HBV DNA下降值大于肝组织HBV tDNA和肝组织HBV cccDNA(分别为3.21 lg拷贝/ml、1.02 lg拷贝/细胞和0.76 lg拷贝/细胞)。基线时,24例患者肝组织HBV tDNA、cccDNA与血清HBV DNA和HBsAg呈正相关(P<0.01);但治疗48周时,各指标间无相关性。结论 ADV治疗慢性乙肝患者可使其肝组织HBV tDNA、cccDNA和血清HBV DNA水平显著下降,但血清HBV DNA下降较肝组织HBV tDNA、cccDNA更为显著。

慢性乙肝患者ALT、HBV DNA、ccc DNA及肝组织免疫组化的相关性

目的探讨慢性乙肝(CHB)患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBV DNA、ccc DNA及肝组织免疫组化的相关性。方法随机选取该院治疗的CHB患者60例,根据有无接受正规抗病毒治疗分为未治疗组(n=42)和治疗组(n=18)。研究未治疗组患者肝细胞HBV DNA、ccc DNA及肝组织免疫组化的相关性及治疗组患者肝细胞HBV ccc DNA变化。结果未治疗组患者肝细胞中HBV DNA和ccc DNA水平均与肝组织纤维化程度呈负相关,其中ccc DNA呈强相关性(r=-0.523,P=0.004)。肝细胞HBV DNA和ccc DNA之间未显示相关性(r=0.064,P=0.642)。从未治疗组中选取一般资料与治疗组差异不显著的20例患者为对照组,治疗组患者肝细胞HBV ccc DNA较对照组显著下降(P<0.05)。结论肝组织纤维程度与肝细胞HBV ccc DNA呈负相关,HBV DNA水平与肝内病毒复制情况不存在相关性。

恩替卡韦治疗慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平变化

目的探讨血清HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)和HBV前基因组RNA(HBV pgRNA)水平预测血清HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者接受恩替卡韦治疗后疗效的临床价值。方法2018年1月~2020年1月我院收治的HBeAg阳性CHB患者89例,均口服恩替卡韦分散片治疗48 w。使用COOBAS TAQMAN和COBAS Amliprep系统和采用荧光定量PCR法检测血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平,采用化学发光法定量检测血清HBsAg和HBeAg水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清各指标预测恩替卡韦治疗的CHB患者疗效的价值。结果89例HBeAg阳性CHB患者经恩替卡韦治疗48 w后,获得病毒学应答85例(95.5%),生化学应答80例(89.9%),血清学应答9例(10.1%);获得完全应答75例(84.3%);完全应答组血清ALT、HBsAg、HBeAg、HBV DNA,HBV cccDNA和HBV pgRNA水平分别为(228.3±34.9)U/L、(2.5±0.4)lg IU/mL、(18.6±1.9)S/CO、(6.1±0.6)lg IU/mL、(2.2±0.2)cps/mL和(4.5±0.6)cps/mL,与非完全应答组【分别为(69.5±17.1)U/L、(3.7±0.7)lg IU/mL、(163.2±16.3)S/CO、(6.8±0.7)lg IU/mL、(3.9±0.4)cps/mL和(7.0±0.7)cps/mL】比,差异显著(P<0.05);应用血清HBV cccDNA与HBV pgRNA水平联合预测CHB患者接受恩替卡韦治疗疗效的ROC曲线下面积为0.892,其敏感性为81.6%,特异性为89.5%。结论在抗病毒治疗前,检测HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV cccDNA和HBV pgRNA水平预测疗效有一定的应用价值,值得进一步研究。

乙型肝炎病毒感染相关性肝癌中HBV cccDNA水平与突变关系的研究

目的:研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染相关性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,ccc DNA)水平与突变关系。方法:运用特异性荧光定量PCR定量分析了12例肝癌组织和癌旁组织中乙肝病毒复制水平的表征因子HBV ccc DNA,HBV total DNA及前基因组RNA(pregenome RNA,pg RNA)的表达水平,再用滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)特异性扩增癌组织中HBV ccc DNA,测序分析了病毒基因组4个编码调控区域pre C/C、RT、X、pre S中ccc DNA序列的突变。最后检测了肿瘤组织ccc DNA的AP位点。结果:HBV ccc DNA在癌组织的表达水平明显低于癌旁组织(3.32 copies/cell vs.9.64 copies/cell,P=0.029),但是HBV总DNA和pg RNA的表达没有明显差异(16.94 copies/cell vs.12.18 copies/cell,P=0.325,75.54 copies/cell vs.22.46 copies/cell,P=0.128);在肝癌组织中,HBV ccc DNA pre C/C和X区间,G-A突变是主要的突变类型;其次,pre C/C和X区域发生G-A突变的位置上,均更倾向于GA二联核苷酸组合方式,在肝癌中所占比例为37.1%和40%。最后,肿瘤组织中APE1酶处理后,HBV ccc DNA水平明显下降(1 011 copies/μl vs.501.8 copies/μl,P=0.058)。结论:HBV ccc DNA水平在癌组织中明显低于癌旁组织,可能与癌组织中HBV ccc DNA发生大量GA突变及形成的AP位点有关。

抗病毒治疗后慢性乙肝患者HBVcccDNA检测临床价值分析

目的:探讨抗病毒治疗的慢性乙型肝病患者外周血白细胞中HBVcccDNA(covalently closed circular DNA)检测的临床价值。方法:采用MEIA法、PCR—微流芯片法检测25例抗病毒治疗的慢性肝病患者和与之匹配的65例未抗病毒治疗慢性肝病患者、3例非乙型肝炎患者血清HBVM、HBVDNA、外周血白细胞中HBVcccDNA。结果:3例非乙型肝炎患者HBVM、HBVDNA、HBVcccDNA均阴性;43.3%(39/90)的慢性肝病患者HBVcccDNA阳性;抗病毒治疗的慢性肝病患者HBVcccDNA阳性率(20.0%)显著低于未抗病毒治疗者(52.3%)(P<0.01),尤其在HBVDNA<10~3copy/ml的慢性肝病患者中(P<0.05)。无论HBeAg+/HBeAb-还是HBeAg-/HBeAb+,抗病毒治疗者HBVcccDNA阳性率均显著低于未抗病毒治疗者(P<0.01、P<0.05)。结论:慢性乙型肝病患者外周血白细胞中有较大比例HBVcccDNA阳性检出率,与血清HBVDNA、HBVM联合检测能提高抗病毒治疗效果判断的准确性。

慢性乙肝患者肝组织HBVcccDNA与血清HBV DNA及其标志物相关性的研究

目的探讨慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者肝组织HBVcccDNA与血清HBV DNA及其标志物等之间的相关性。方法采用实时定量荧光PCR检测法检测10例CHB患者肝组织HBVcccDNA,用PCR-荧光探针法检测血清HBV DNA含量,用电化学发光免疫分析法定量检测乙肝标志物,常规病理学染色分析病理学改变,对肝组织进行炎症活动度分级(G)及纤维化程度分期(S)。结果①10例CHB患者肝组织病理结果:G2S1:3例;G2S2:2例;G2S3:1例;G3S2:2例;G3S3:2例。②10例CHB患者肝组织均检测到HBVcccDNA,定量值为1.80×104～8.50×109拷贝/mL。10例CHB患者血清HBVDNA阳性8例,定量值为2.23×105～3.08×108拷贝/mL;阴性2例(低于检测下限103拷贝/mL)。③肝组织HBVcccDNA定量值与肝组织炎症活动度(G)及纤维化程度(S)无相关性(P>0.05)。④肝组织HBVcccDNA定量值与血清HBV DNA定量值成高度正相关(r=0.898,P<0.01)。⑤肝组织HBVcccDNA定量值与血清HBeAg滴度呈高度正相关性(r=0.821,P<0.01),与血清HBsAg滴度无相关性(r=-0.483,P>0.05)。⑥肝组织HBVcccDNA定量值与ALT、AST定量水平均无相关性。结论肝组织HBVcccDNA定量值与血清HBV DNA定量值和HBeAg滴度呈高度正相关,均能够直接反映CHB患者体内HBV的存在和复制状态;但其定量值的高低与肝组织病理结果、HBsAg滴度、ALT、AST水平均无相关。肝组织HBVcccDNA定量检测联合血清HBV DNA和HBeAg是判断抗病毒治疗疗效的可靠指标。

过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)调控HBV微染色体重塑与病毒复制

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)是否参与调控乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)微染色体重塑与病毒复制。方法:HepG2细胞单独转染、共转染线性HBV单体与PPARα表达或PPARα沉默载体;Southern blot检测转染细胞质内HBV核心颗粒DNA;实时定量PCR定量检测细胞质HBV核心颗粒DNA及细胞核内HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)水平;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测转染细胞上清中乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)和e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg);染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation,ChIP)检测与cccDNA结合的PPARα、组蛋白和染色质修饰酶。结果:与单独转染线性HBV单体相比,共转染PPARα增加了PPARα与HBV cccDNA的结合,增加了HBV开环DNA(open circular DNA,OC DNA)及HBsAg和HBeAg水平,同时也增加了cccDNA微染色质中组蛋白H3和H4的乙酰化水平及乙酰转移酶p300的水平;共转染PPARα沉默载体则有相反的结果。结论:PPARα能直接与cccDNA结合并有助于乙酰转移酶p300募集到cccDNA上,从而调控HBV微染色质的表观遗传学和HBV复制。这一发现对HBV与宿主转录因子间相互作用的相关分子机制提供了新的机制。

血清HBV RNA在慢性乙型肝炎抗病毒治疗过程中的动态变化及其临床意义

目的:探讨血清HBV RNA在慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒治疗过程中的动态变化及其临床意义。方法:慢性乙型肝炎患者62例采用恩替卡韦抗病毒治疗,分别在第0、7、14、30天以及第2、3、6、9、12个月来本院进行随访,TaqMan探针法定量检测HBV RNA水平,采用实时荧光定量PCR法进行HBV DNA水平检测,采用化学发光法进行HBsAg和HBeAg检测,采用酶法进行ALT及AST检测。结果:血清HBV RNA水平随着治疗时间的延长呈下降趋势,治疗3个月后下降速度趋缓,从9个月后变化不大。血清HBV RNA水平从0 d到6个月间,各个相邻监测点间变化均有统计学意义(均P<0.05),在治疗6~12个月两个时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。HBeAg(+)患者基线血清HBV RNA与HBV DNA(r_(s)=0.68,P<0.05)、HbsAg(r_(s)=0.64,P<0.05)、HBeAg(r_(s)=0.77,P<0.05)均强相关。在治疗前6个月各时间点,HBV RNA与HBV DNA呈强相关(r_(s)>0.5,P<0.05)。HBV RNA与HBsAg在治疗前3个月呈强相关(r_(s)>0.5,P<0.05),治疗6~9个月时为弱相关(r_(s)=0.23,P=0.31;r_(s)=0.28,P=0.23)。HBV RNA与HBeAg水平在各治疗时间点均为强相关(r_(s)>0.5,P<0.05)。HBeAg(-)患者在治疗30 d时血清HBV RNA与HBV DNA呈正相关(r_(s)=0.62,P<0.05),在治疗14 d时HBV RNA与HBsAg水平呈正相关(r_(s)=0.60,P<0.05)。结论:抗病毒治疗时,慢性乙型肝炎患者血清HBV RNA水平随着治疗时间的延长呈下降趋势。患者血清HBV RNA水平与血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg在治疗前和治疗初期有明显相关性,随着治疗时间延长,其相关性逐渐减弱。

慢性乙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞HBVcccDNA检测的临床意义

目的了解慢性乙型肝炎患者血清及外周血单个核细胞内是否存在HBV共价闭合环状DNA。方法以20例HBV携带者、75例慢性乙型肝炎和8例肝移植术后患者分离PBMC,应用增效PCR法检测HBVcccDNA。结果本次未在PBMC中检测到HBVcccDNA;20例HBV携带者血清HBVcccDNA阳性率为10%,75例慢性肝炎轻、中、重度患者分别为32%、52%和76%,肝移植患者为12.5%(P<0.01);按血清HBVDNA载量不同分为<1×105copies/ml、1×105～108copies/ml和>1×108copies/ml三组,其血清HBVcccDNA阳性率分别为15.4%(2/13)、50.0%(16/32)和76.7%(23/30,P<0.01)。结论慢性乙型肝炎患者肝外HBVcccDNA的检测还需要进一步研究。

HBV感染孕妇停药后HBV再激活的影响因素

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染孕妇停药后HBV再激活的影响因素。方法:回顾性分析2015年1月至2019年1月新乡市传染病医院收治的129例HBV感染孕妇的临床资料。统计孕妇停药后HBV再激活的占比,采用单因素和多因素Logistic回归分析HBV感染孕妇停药后HBV再激活的影响因素。结果:129例HBV感染孕妇停药后发生HBV再激活56例,占43.41%(56/129);再激活者停药时共价闭合环状DNA(cccDNA)阳性率和乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平均高于未再激活者,差异有统计学意义(P<0.05);再激活者的年龄、体质量指数、饮酒史、HBV感染家族史、治疗药物、病毒学应答时间和丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素水平与未再激活者比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析结果显示,cccDNA阳性、停药时HBsAg>200 mIU/mL均为影响HBV感染孕妇停药后HBV再激活的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:cccDNA阳性、停药时HBsAg>200 mIU/mL为影响HBV感染孕妇停药后HBV再激活的危险因素。

对乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的再认识

乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA，cccDNA）是乙肝病毒前基因组RNA（pgRNA）的转录模板，对HBV的循环复制以及感染状态的建立均有十分重要的意义。从cccDNA的角度重新认识HBV感染和清除过程，有助于澄清现有的一些模糊概念，更深刻地理解HBV的致病机制，更理性地确定抗病毒治疗的策略和目标，