血清HBV DNA及HBV前基因组RNA(pgRNA)在慢性乙肝患者抗病毒不同阶段的变化分析

目的分析慢性乙肝患者抗病毒治疗的不同阶段血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)及HBV前基因组RNA(HBV pgRNA)的变化。方法选取2018年2月—2021年2月就诊的60例慢性乙肝患者,对其进行抗病毒治疗,根据不同的治疗方法分为恩替卡韦治疗组(n=30)和阿德福韦酯治疗组(n=30),并根据治疗不同阶段分为0周、12周、24周、36周、48周,对不同病况接受抗病毒治疗的慢性乙型肝炎患者进行HBV DNA、HBV pgRNA检测,比较抗病毒不同阶段HBV DNA、HBV pgRNA浓度的变化。结果两组患者在0周、12周、24周、36周、48周血清HBV DNA、HBV pgRNA均呈下降趋势(P<0.05),且恩替卡韦治疗组下降幅度大于阿德福韦酯治疗组(P<0.05);治疗0周、48周时,恩替卡韦治疗组、阿德福韦酯治疗组的HBV DNA、HBV pgRNA比较无统计学意义(P>0.05),而治疗12周、24周、36周时,恩替卡韦治疗组HBV DNA、HBV pgRNA低于阿德福韦酯治疗组(P<0.05)。结论HBV DNA、HBV pgRNA的浓度在治疗的不同阶段变化不一致,但均可用来反映慢性乙肝患者抗病毒治疗后的临床效果。

血清HBV前基因组RNA的研究进展

1 HBV感染复制过程再认知HBV的基因组长约3200 bp,为部分双链环状DNA。HBV侵入人体肝脏后,病毒与肝细胞受体钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)结合,然后将含有松弛环状DNA(rcDNA)的核衣壳释放到肝细胞中,并转运至细胞核,rcDNA在细胞核中转化形成超螺旋结构的cccDNA。cccDNA作为转录模板转录成不同大小的mRNA,包括3.5 kb前核心mRNA(pcRNA)和前基因组RNA(pgRNA),2.4 kb和2.1 kb表面抗原mRNA,以及0.7 kb HBx mRNA。

HBV前基因组RNA状态可以反映慢性乙型肝炎患者接受核(苷)酸类似物抗病毒治疗的长期预后

【据《J Viral Hepat》2020年3月报道】题:HBV前基因组RNA状态可以反映慢性乙型肝炎患者接受核(苷)酸类似物抗病毒治疗的长期预后(作者Luo H等)慢性乙型肝炎患者接受核苷(酸)类药物(NAs)长期抗病毒过程中,可有效抑制HBV DNA的合成,但并不抑制HBV前基因组RNA(pgRNA)的合成。本研究分析了慢性乙型肝炎患者接受NAs抗病毒治疗后HBV pgRNA的状态能否预测这些患者的长期预后。研究共纳入了98例接受了7年抗病毒治疗的初治慢性乙型肝炎患者。使用实时定量PCR及特异性引物分析了患者血清中HBV pgRNA的水平。

HBV前基因组RNA、甲胎蛋白异质体3和乙型肝炎X抗体水平与HBV所致肝癌的关系及对患者预后的预测

目的研究血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV-pgRNA)、甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)和HBV X抗体(HBxAb)水平与HBV所致肝癌的关系及对患者预后的预测。方法选取该院2015年1月至2017年6月诊断的HBV所致肝癌患者60例作为肝癌组,另选择HBV所致肝硬化患者及单纯性乙型肝炎患者各60例作为肝硬化组和乙型肝炎组,比较3组患者HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平之间的差异,分析不同病理分期、组织分化及生存状况患者的HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平差异。结果不同疾病、分化程度、生存情况组患者的HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。HBV-pgRNA、HBxAb水平从高到低依次为乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组,AFP-L3水平从高到低依次为肝癌组、肝硬化组、乙型肝炎组;HBV-pgRNA、HBxAb水平从高到低依次为低分化组、中分化组、高分化组,AFP-L3水平从高到低依次为高分化组、中分化组、低分化组;Ⅰ~Ⅱ期患者的HBV-pgRNA、HBxAb水平明显高于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05),Ⅰ~Ⅱ期患者的AFP-L3水平明显低于Ⅲ~Ⅳ期(P<0.05)。HBV-pgRNA和HBxAb水平与肝癌患者的病理分期、组织分化及生存状态均呈负相关(r=-0.771~-0.441,P<0.05),AFP-L3与肝癌患者的病理分期、组织分化及生存状态均呈正相关(r=0.339、0.521、0.664,P<0.05)。结论血清HBV-pgRNA、AFP-L3和HBxAb水平与HBV所致肝癌进展明显相关,同时,以上指标可作为患者生存预测的重要指标。

妊娠合并慢性乙型肝炎血清HBV pgRNA、PreS1抗原表达与肝内胆汁淤积症的相关性分析

目的 探究妊娠合并慢性乙型肝炎病人血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(HBV pgRNA)、前S1抗原(PreS1Ag)水平变化及与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发生的相关性。方法 选取2017年6月至2020年6月在雅安市人民医院进行孕期检查的慢性乙型肝炎孕妇279例作为研究对象,根据入组病人是否患有ICP分为合并ICP组43例、未合并ICP组236例。比较两组病人血清中HBV pgRNA、PreS1 Ag水平,并分析两组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag表达与HBV DNA表达水平相关性;比较两组病人妊娠结局,并分析合并ICP组病人血清HBV pgRNA表达水平及PreS1 Ag阳性表达率与妊娠结局的关系。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清HBV pgRNA、PreS1 Ag光密度[D(λ)]值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的效能。结果 合并ICP组慢性乙型肝炎病人血清HBV表面抗原(HbsAg)水平[(3.71±0.92)log IU/mL]、HBV e抗原(HbeAg)阳性率[65.12%(28/43)]、HBV DNA含量[(8.03±1.69)log copies/mL]、天冬氨酸转氨酶(AST)[(79.68±15.73)U/L]、丙氨酸转氨酶(ALT)[(72.08±16.95)U/L]、PreS1 Ag阳性表达率[88.37%(38/43)]、PreS1 Ag D(λ)值水平(1.24±0.25)及HBV pgRNA表达水平[(5.17±1.25)log copies/mL]明显高于未合并ICP组[(2.26±0.74)log IU/mL、24.15%(57/236)、(5.19±1.07)logcopies/mL、(23.01±12.47)U/L、(21.76±10.51)U/L、67.80%(160/236)、(0.92±0.23)、(3.02±0.98)logcopies/mL](P<0.05)。血清HBV pgRNA诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的曲线下面积(AUC)为0.89,灵敏度为81.40%,特异度为80.50%。PreS1 Ag D(λ)值诊断慢性乙型肝炎孕妇合并ICP的AUC为0.83,灵敏度为76.70%,特异度为79.20%。二者联合诊断的AUC为0.91,灵敏度为93.00%,特异度为78.40%。合并ICP组、未合并ICP组血清PreS1 Ag阳性的慢性乙型肝炎病人血清HBV DNA、HBV pgRNA表达水平均明显高于PreS1 Ag阴性表达病人(P<0.05)。合并ICP组、未合并ICP组血清HBV pgRNA、PreS1 Ag D(λ)值均与HBV DNA表达水平呈正相关(P<0.05)。合并ICP组产后出血、早产的发生率明显高于未合并ICP组(P<0.05)。发生不良妊娠结局的慢性乙型肝炎合并ICP病人血清PreS1 Ag阳性表达率、PreS1 Ag D(λ)值、HBV pgRNA表达水平均明显高于未发生不良妊娠结局病人(P<0.05)。结论 合并ICP的慢性乙型肝炎病人血清HBV pgRNA表达水平、PreS1 Ag阳性表达率及D(λ)值水平均明显升高,对ICP有一定诊断价值,且两者水平变化均与HBV DNA含量有关,并可能预示病人不良妊娠结局的发生。

乙型肝炎病毒前基因组RNA评估恩替卡韦治疗乙型肝炎E抗原阳性慢性乙型肝炎疗效的价值

目的探讨恩替卡韦(ETV)对乙型肝炎E抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效,并观察血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)水平、评估其疗效价值。方法选取2019年1月至2021年6月东莞广济医院收治的确诊为HBeAg阳性的78例CHB患者为研究对象进行回顾性分析。根据患者ETV治疗12个月后HBeAg是否获得完全应答分为获得组(35例)和未获得组(43例)。两组患者均采用ETV治疗12个月,观察患者治疗过程中血清HBV pgRNA水平及谷丙转氨酶(ALT)各时间点动态变化,并探讨ETV治疗后患者获得应答情况与HBV pgRNA水平及ALT水平的相关性。结果两组患者治疗3、6、12个月的血清HBV pgRNA水平显著低于入组时,且获得组低于未获得组(P<0.05);血清HBV pgRNA水平与获得完全应答呈负相关(P<0.05)。两组患者治疗3、6、12个月的ALT水平显著低于入组时,且获得组低于未获得组(P<0.05);ALT水平与获得完全应答呈负相关(P<0.05)。结论血清HBV pgRNA、ALT水平与HBeAg阳性CHB患者ETV的疗效具有相关性,可用于评估疗效。

HBV前基因组RNA 5′端Epsilon结构的功能研究进展

慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)感染是乙型肝炎、肝纤维化和肝细胞癌等疾病的重要病因。HBV的生命周期中存在着独特的逆转录过程,在这一过程中HBV前基因组RNA(pre-genomic RNA,pgRNA)发挥着极其重要的作用。pgRNA不仅是病毒逆转录的模板,还可作为mRNA翻译产生核心蛋白和聚合酶(P)蛋白。HBV pgRNA 5′端存在一特殊的茎环结构,被命名为Epsilon(ε)。研究发现,ε结构不仅能启动pgRNA衣壳化、激活P蛋白并启动HBV逆转录,其自身还能形成特异性核酶在肝细胞内发挥作用。ε结构有望成为有潜力的抗病毒药物靶点。本文旨在对ε结构特点及功能的研究进展进行综述。

血清乙型肝炎病毒前基因组RNA水平对核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎患者疗效预测价值

目的探讨应用血清乙型肝炎病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)水平预测核苷(酸)类似物初治的慢性乙型肝炎(CHB)患者疗效的价值。方法2015年8月~2019年12月我院诊治的初始治疗的CHB患者107例,接受恩替卡韦、替诺福韦或替比夫定治疗观察48 w。采用实时荧光定量PCR法检测血清HBV pgRNA,采用ELISA法检测血清HBsAg和HBeAg。应用Logistic回归分析影响疗效的因素,应用MedCalc15.1统计学软件绘制ROC,计算曲线下面积(AUC)评价血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗的疗效。结果在治疗48周末,27例(25.2%)患者不应答,另80例(74.8%)患者获得完全应答或部分应答;(完全或部分)应答组血清HBV DNA载量为(6.1±1.0)lg copies/mL,显著低于不应答组【(7.2±1.2)lg copies/mL,P<0.05】,外周血CD4+/CD8+比值为(0.7±0.2),显著高于不应答组【(0.6±0.1),P<0.05】,血清HBeAg阳性率为41.3%,显著低于不应答组(70.4%,P<0.05),血清HBV pgRNA水平为(5.3±0.8)lg copies/mL,显著低于不应答组【(6.5±1.1)lg copies/mL,P<0.05】;Logistic回归分析显示,基线HBV DNA载量、HBeAg状态和血清HBV pgRNA水平均为影响核苷(酸)类似物治疗的CHB患者疗效的因素(OR=2.793、OR=3.827、OR=4.035,P均<0.05);经ROC分析显示,血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物治疗CHB患者不应答的最佳截断点为5.89 lgcopies/mL,AUC值为0.865(95%CI:0.816~0.905),其预测的灵敏度为74.1%(20/27),特异度为88.8%(71/80)。结论监测血清HBV pgRNA水平预测核苷(酸)类似物初治的CHB患者的疗效有一定的临床应用价值,如果检测结果稳定,不失为一种临床决策的参考依据。

HBV pgRNA联合cccDNA对慢性乙型肝炎患者抗病毒疗效的预测价值

目的探究乙型肝炎(HBV)前基因组RNA(pgRNA)联合共价闭合环状DNA(cccDNA)对慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒疗效的预测价值。方法收集2019年8月至2022年8月期间于本院进行抗病毒治疗的96例CHB患者的临床资料,根据患者治疗48周后是否获得完全应答分为完全应答组(78例)及非完全应答组(15例)。检测患者不同时间HBV cccDNA和HBV pgRNA水平,Logistic回归分析影响CHB患者获得完全应答的因素,并应用受试者工作特征(ROC)曲线分析pgRNA与cccDNA联合检测在抗病毒疗效的预测价值。结果96例患者中78例抗病毒治疗后获得非完全应答;完全应答组治疗24、48周HBV pgRNA、HBV cccDNA水平均低于非完全应答组(P<0.05);Logistic回归分析显示,治疗24周HBV pgRNA、HBV cccDNA高水平及治疗前ALT低水平是影响CHB患者抗病毒治疗无效的独立危险因素(P<0.05);经ROC分析显示,HBV pgRNA预测CHB患者抗病毒疗效的AUC值为0.618,95%CI为0.513~0.716,HBV cccDNA预测的AUC值为0.667,95%CI为0.561~0.760,二者联合预测的AUC值为0.881,95%CI为0.799~0.938。结论HBV pgRNA与cccDNA在CHB患者抗病毒治疗中下调,且治疗24周HBV pgRNA联合cccDNA检测对CHB抗病毒疗效具有更高的预测价值。

慢性乙型肝炎患者停用核苷(酸)类似物后循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg表达水平与复发的相关性分析

目的检测慢性乙型肝炎(CHB)患者停用核苷(酸)类似物(NUC)后循环血清中HBV前基因组RNA(pgRNA)以及乙型肝炎核心相关抗原(HBcrAg)的表达水平,分析停药后CHB患者循环血中不同时段HBV pgRNA、HBcrAg水平与复发之间的相关性。方法选取2019年12月—2022年7月川北医学院附属医院门诊就诊者中抗HBV治疗至少5年到达完全应答并满足2017年版欧洲肝病学会指南停药标准的CHB患者108例,根据停药时间分为停药后4、12、24周组;根据复发情况分为复发组与未复发组。运用实时荧光定量PCR法检测CHB患者循环血清中HBV pgRNA水平,运用ELISA检测研究对象静脉血中HBcrAg的表达水平,采用实时荧光定量PCR法高精度检测HBV DNA载量。计量资料两组间比较采用t检验;多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。采用Pearson相关检验分析循环血中各指标间的相关性。结果CHB患者停药后在随访4~12周时复发率17.1%,24周后累积复发率达到29.3%,其中单独HBV DNA复阳者各占64.3%、60.0%,HBeAg单独复阳者各占28.6%、20.0%,HBV DNA、HBeAg同时复阳者各占7.1%、20.0%。停药24周时,CHB患者循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg、HBV DNA表达水平较停药时及停药后4周时明显高表达,不同时段比较差异具有统计学意义(P值均<0.05)。复发组循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg、HBV DNA水平较未复发组显著高表达(t值分别2.549、8.654、27.429,P值均<0.05);对复发组进一步分析发现,在12~24周时复发组患者循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg与HBV DNA水平较4~12周时高表达(P值均<0.05)。复发组停药时循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg的表达水平较未复发组停药时显著高表达(t值分别为18.561、6.152,P值均<0.001)。相关性分析显示,CHB患者停药后复发组循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg与HBV DNA呈正相关(r值分别为0.82、0.66,P值均<0.001);未复发组循环血清中HBV pgRNA、HBcrAg与HBV DNA均无相关性(r值分别为0.14、0.04,P值均>0.05)。结论停药时复发组HBV pgRNA、HBcrAg水平较未复发组高表达,提示未复发组在停药时的HBV pgRNA、HBcrAg水平可能作为CHB患者可安全停药的参考临界值指标,HBV pgRNA、HBcrAg水平检测可能是未来抗HBV治疗终点选择的潜在参考指标之一。

核苷(酸)类似物治疗慢性乙型肝炎患者血清HBV pgRNA变化及其临床意义探讨

目的探讨接受核苷(酸)类似物(NAs)治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清乙型肝炎病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)变化及其临床意义。方法2019年9月~2021年9月我院收治的78例CHB初治患者,均接受NAs治疗。采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA和HBV pgRNA水平,采用ELISA法检测血清HBsAg水平。采用Cox回归分析影响抗病毒治疗CHB患者疗效的因素,应用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清HBV pgRNA水平预测NAs治疗疗效的效能。结果经NAs抗病毒治疗48周,在78例CHB患者中66例(84.6%)获得完全应答;入组时,完全应答患者血清HBV DNA载量、HBsAg和HBV pgRNA水平分别为(6.0±0.7)lg IU/mL、(2.4±0.5)lg IU/mL和(3.0±0.9)lg copies/mL,显著低于未完全应答患者(分别为(7.1±1.3)lg IU/mL、(3.8±0.9)lg IU/mL和(6.8±0.4)lg copies/mL,P<0.05);经Cox回归分析显示,入组时血清HBsAg(HR=1.432,95%CI:1.022~2.006)和HBV pgRNA(HR=1.237,95%CI:1.060~1.445)是影响抗病毒治疗疗效的因素(P<0.05);经ROC分析显示,血清HBV pgRNA预测NAs治疗CHB患者完全应答的最佳截断点为4.8 lg copies/mL,其AUC值为0.825(95%CI:0.722~0.902),预测的灵敏度为89.4%,特异度为83.3%。结论对于初治的CHB患者,检测血清HBV pgRNA水平可能帮助预测NAs抗病毒治疗后的疗效,对制定治疗方案有很大的指导意义。

慢性乙型肝炎病人经核苷(酸)药物治疗后血清HBV pgRNA的检测及其临床意义

目的:观察慢性乙型肝炎(CHB)病人使用恩替卡韦(ETV)或富马酸替诺福韦酯(TDF)抗病毒治疗后血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)水平的变化,及其与HBsAg、HBV DNA的关系,以探讨HBV pgRNA在抗病毒治疗中的临床意义。方法:选取89例初治CHB病人,其中44例接受ETV治疗(ETV组),45例接受TDF治疗(TDF组)。在治疗前、治疗24周、48周时随访,检测病人的血清HBsAg、HBV DNA、HBV pgRNA水平,分析2组病人血清HBV pgRNA水平的变化趋势和差异,以及HBV pgRNA与HBsAg、HBV DNA间的相关性。结果:随着治疗时间的延长,2组病人HBV pgRNA水平均明显降低(P<0.01)。2组病人治疗24周时HBV pgRNA水平低于治疗前(P<0.05),治疗48周时HBV pgRNA水平低于治疗24周时(P<0.05)。在抗病毒治疗前及治疗24周、48周时,ETV组病人的HBV pgRNA水平与HBsAg水平均呈明显正相关关系(P<0.01),HBV pgRNA水平与HBV DNA亦呈明显正相关关系(P<0.01)。在抗病毒治疗前、治疗24周、48周时,TDF组病人的HBV pgRNA与HBsAg均呈明显正相关关系(P<0.01);抗病毒治疗前、治疗24周时,TDF组病人的HBV pgRNA与HBV DNA呈明显正相关关系(P<0.01),但抗病毒治疗48周时,病人的HBV pgRNA与HBV DNA无明显相关关系(P>0.05)。TDF组病人HBV DNA的阴转率高于同一时间点ETV组病人,在治疗48周时,2组间差异有统计学意义(χ2=6.23,P<0.05)。结论:CHB病人血清HBV pgRNA水平在抗病毒治疗的进程中呈明显下降趋势,血清HBV pgRNA在核苷(酸)药物抗病毒疗效评估与监测方面有一定的临床意义。

一种新的同时定量检测乙型肝炎病毒前基因组RNA和DNA的检测方法

目的设计并建立一种新的能够同时测定核酸提取物中乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)和DNA的检测方法。方法建立检测HBV pgRNA和DNA的探针法双重荧光定量PCR体系,通过DNA凝胶电泳、定量PCR等实验考察该检测体系的特异性和灵敏度,验证以该方法测定HepG2.2.15细胞及其培养上清中HBV pgRNA和DNA的可行性及准确度。结果建立的探针法双重荧光定量PCR体系具有较好的特异性和灵敏度,测定不同稀释倍数的细胞培养上清时,在稀释倍数和测定结果间具有较好的相关性。但该方法更适用于测定细胞培养上清中的HBV pgRNA和DNA,而不适用于测定细胞样本。结论本实验建立的方法能够避免核酸提取物中由于HBV DNA污染造成HBV RNA定量不准的问题,并且在一管PCR反应中同时实现了HBV pgRNA和DNA的双重检测,极大提高了检测效率,具有潜在的临床应用价值。

乙型肝炎病毒基因组前-前-S基因区的分子流行病学研究

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因组是否存在前-前-S编码基因,并探讨前-前-S基因与HBV基因型分布之间的关系. 方法:自慢性乙型肝炎患者血清中提取病毒基因组DNA, 首先应用多引物-多聚酶链反应(PCR)进行HBV基因型分型,之后将前-前-S区扩增,TA克隆到pGEM Teasy载体后进行单克隆测序,利用Vector 8.0软件进行序列分析. 结果:选择15例患者,经过HBV基因型分型实验确定基因型为B型者1例,B/C混合型者5例,C型9例.自15例患者血清中提取的HBV基因组中扩增出前-前-S基因片段,TA克隆后选择31个克隆进行测序,测序结果证明这31个克隆均编码前-前-S基因. 结论:前-前-S区编码在B、C基因型中均为普遍存在的现象.

血清HBV RNA及HBV DNA在慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗不同阶段的检测价值

目的探讨血清乙型肝炎病毒前基因组RNA(HBV pgRNA)及乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)检测在慢性乙型肝炎(CHB)不同抗病毒治疗阶段的应用效果。方法选择2021年1月至2021年12月本院收治的88例CHB患者,包含免疫耐受期(Ⅰ期)及免疫清除期(Ⅱ期)患者52例,免疫控制期(Ⅲ期)及再活动期(Ⅳ期)36例,对不同分期患者治疗前、治疗后3个月、6个月和12个月的血清HBV pgRNA以及HBV DNA水平进行检测,对比其检测结果差异,分析其应用价值。结果Ⅲ~Ⅳ期患者治疗前、治疗后3个月、6个月和12个月的血清HBV pgRNA水平依次为(6.89±1.25)log10 IU/mL、(4.25±0.63)log10 IU/mL、(3.56±0.57)log10 IU/mL和(3.02±0.44)log10 IU/mL,与Ⅰ~Ⅱ期患者的(6.89±1.25)log10 IU/mL、(5.54±0.74)log10 IU/mL、(4.92±0.50)log10 IU/mL和(3.75±0.48)log10 IU/mL相比明显更低,差异有统计学意义(t 1=8.326,t 2=9.572,t 3=12.934,t 4=8.084,P<0.001);Ⅲ~Ⅳ期患者治疗前、治疗后3个月、6个月和12个月的血清HBV DNA水平依次为(5.27±0.89)log10 IU/mL、(3.03±0.58)log10 IU/mL、(2.85±0.47)log10 IU/mL和(2.12±0.42)log10 IU/mL,与Ⅰ~Ⅱ期患者的(7.66±1.54)log10 IU/mL、(4.62±0.66)log10 IU/mL、(3.10±0.48)log10 IU/mL和(2.34±0.36)log10 IU/mL相比明显更低,差异有统计学意义(t 1=9.690,t 2=13.049,t 3=2.684,t 4=2.868,P<0.001);各CHB分期患者治疗后不同阶段的血清HBV pgRNA水平、HBV DNA水平均较治疗前低,差异有统计学意义(P<0.05);血清HBV pgRNA对血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)血清转换的预测灵敏度、特异度及准确度依次为89.20%、80.95%和85.86%,均较血清HBV DNA的67.96%、67.92%和75.03%高,血清HBV pgRNA联合HBV DNA检测对HBsAg血清转换的预测灵敏度、特异度及准确度依次为92.46%、83.74%和90.20%,均高于与单一HBV pgRNA、单一HBV DNA检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论CHB患者血清HBV pgRNA以及HBV DNA水平均可随着抗病毒治疗时间延长逐步下降,两者均能够在CHB患者抗病毒治疗中发挥一定的指导作用,但血清HBV pgRNA的预测价值更高,通过血清HBV pgRNA联合HBV DNA检测的方式可进一步提高预测价值。

乙型肝炎病毒前基因组启动子的调节机制

乙型肝炎病毒(HBV)是一种DNA病毒,但其基因组的复制是通过DNA-RNA-DNA的途径来实现的。作为从RNA逆转录为前基因组DNA的模板,3.5千的RNA的转录非常重要。目前的研究证实,前基因组启动子和核心启动子(CP)是2段位置相近,但结构与调节机制又不相同的启动子,虽然均指导3.5千核苷酸的RNA转录,但作为前基因组和翻译模板的RNA,其5′末端序列不同。前基因组启动子序列活性受到一系列不同的蛋白质因子的调节,增强子对于HBV前基因组启动子的活性也有重要的调节作用。

血清HBVRNA的临床研究进展

慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染可导致诸多肝脏问题,共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)的存在是造成HBV持续感染、难以清除的主要原因.cccDNA检测依赖于肝活检,限制了其临床广泛应用,而HBV感染者血清中的HBVRNA主要为前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA),由cccDNA转录产生,可以反映cccDNA的转录活性,在评估抗病毒治疗效果以及预测停药后复发风险等方面具有较好的指示性,故本文就血清HBVRNA的相关临床研究进展作一综述.

HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA联合检测对恩替卡韦治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎效果的预测价值

目的研究血清HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)、HBsAg、HBV前基因组RNA(HBV pgRNA)联合检测对恩替卡韦(ETV)治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的效果预测价值。方法将2015年5月-2017年5月经苏州大学附属第二医院确诊为HBeAg阳性的87例CHB患者纳入研究。根据患者ETV治疗48周后是否获得完全应答,分为获得组(n=38)和未获得组(n=49)。均采取ETV治疗,疗程48周,观测患者基线及治疗12、24、48周时血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA的水平。正态分布的计量资料组间比较采用t检验,非正态分布的采用Mann-Whitney U检验。计数资料组间比较采用χ2检验;等级资料组间比较采用Mann-Whitney U检验。采用Pearson相关分析探讨肝组织HBV cccDNA与血清HBsAg、HBV pgRNA的相关性。采用多因素logistic回归分析完全应答的预测因素,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA单独或联合检测对完全应答的预测价值。结果相较于未获得组,完全应答获得组患者基线,治疗24、48周时的HBV cccDNA水平明显下降(Z值分别为-2.452、-2.518、-2.266,P值均<0.001);基线,治疗12、24及48周时的HBsAg水平明显下降(Z值分别为-2.431、-2.750、2.386、2.536,P值均<0.001);治疗12、24、48周时的HBV pgRNA水平明显下降(Z值分别为-2.674、-2.503、-2.528,P值均<0.001)。完全应答获得组患者HBV cccDNA在治疗24周时、HBsAg在治疗12周时、HBV pgRNA在治疗12周时的下降水平均明显高于未获得组(Z值分别为-2.352、-2.566、-2.389,P值分别为0.006、0.001、0.004)。血清HBsAg、HBV pgRNA与肝组织HBV cccDNA均呈正相关(r值分别为0.553、0.757,P值均<0.001)。治疗24周时HBV cccDNA、治疗12周时HBsAg、治疗12周时HBV pgRNA的水平可作为预测完全应答的独立影响因素(OR分别为6.248、5.452、5.670,95%CI分别为1.574~14.262、2.048~16.888、1.201~16.183,P值均<0.05)。HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA的ROC曲线下面积值分别为0.845、0.741、0.773,均明显小于三者联合检测的0.913(Z值分别为-2.411、-2.712、-2.673,P值均<0.001),其临界值小于9.7时患者治疗48周时可获得完全应答。结论血清HBV cccDNA、HBsAg、HBV pgRNA联合检测对HBeAg阳性CHB患者的ETV疗效具有较好的预测价值。

血清乙型肝炎病毒前基因组RNA在慢性乙型肝炎患者长期抗病毒治疗中的变化特点

目的探究新型临床标志物血清乙型肝炎病毒(HBV)前基因组RNA(pgRNA)水平在长期抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者中的的临床变化特点。方法纳入在北京大学第一医院就诊的100例核苷(酸)类似物(NAs)初治CHB患者,分别检测患者随访期间的丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV DNA、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)水平,并使用Taqman法实时定量PCR检测血清HBV pgRNA水平。连续变量采用独立样本t检验和Mann-Whitney U检验进行组间比较,分类变量采用Pearsonχ^(2)检验和Fisher精确检验进行组间比较。结果48周时发生病毒学应答者(n=54)在后续治疗中的HBV pgRNA下降水平显著高于未发生病毒学应答者(n=46);HBeAg阳性患者的HBV pgRNA下降水平低于HBeAg阴性者;P<0.05或P<0.01。抗病毒治疗后,基线期HBV DNA水平更高、HBeAg阳性患者HBV pgRNA水平更高,基线期HBV pgRNA水平不同的患者抗病毒治疗后的HBV pgRNA水平差异无统计学意义。血清HBV pgRNA与HBsAg在基线期无相关性,而在长期抗病毒治疗后出现相关性,抗病毒治疗第5年、第9年HBV pgRNA与HBsAg存在弱相关性(分别为r=0.262,P=0.031;r=0.288,P=0.008)。结论在CHB长期抗病毒治疗过程中,HBV活性较高CHB患者的HBV pgRNA水平更高。

慢性乙肝合并妊娠患者血清HBV pgRNA、HBsAg表达与妊娠结局的相关性研究

目的:探讨慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)合并妊娠患者血清乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)前基因组RNA(pregenomic RNA,pgRNA)、乙肝表面抗原(Hepatitis B surface antigen,HBsAg)表达与妊娠结局的相关性。方法:选取2019年3月-2022年3月收治的确诊为CHB的孕妇135例作为研究对象,根据肝功能是否存在异常分为CHB组32例,携带组103例。比较两组血清HBV pgRNA、HBsAg水平;分析受试者发生不良妊娠结局的情况;受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清HBV pgRNA、HBsAg表达水平预测不良妊娠结局的价值。结果:与携带组相比,CHB组孕妇血清HBV pgRNA、HBsAg表达水平及发生胎儿宫内生长受限(IUGR)、早产儿、胎儿畸形、产后出血、胎死宫内比例升高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,HBV pgRNA、HBsAg水平偏高是CHB合并妊娠患者发生不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。ROC分析结果显示,HBV pgRNA、HBsAg预测CHB合并妊娠患者发生不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.839(95%CI:0.757-0.921)、0.815(95%CI:0.730-0.900),联合检测预测CHB合并妊娠患者发生不良妊娠结局的AUC为0.935(95%CI:0.914~0.975)。结论:CHB合并妊娠患者血清HBV pgRNA、HBsAg水平及发生不良妊娠结局的比例较携带孕妇升高,血清HBV pgRNA、HBsAg与不良妊娠结局密切相关,可能作为潜在的诊断标志物。