治疗型HBV基因疫苗免疫效果的研究

为探索治疗型HBV基因疫苗治疗慢性乙型肝炎的可行性 ,自行构建了HBV包膜蛋白前S2 ·S基因及人IL 2和IFN γ融合蛋白基因真核表达质粒 ,并将双质粒融合蛋白作为佐剂组合成治疗型HBV基因疫苗 ,在健康小鼠、HBV转基因 (Tg)小鼠、新西兰兔和恒河猴体内进行了免疫效果试验。结果发现 :①特异性CTL活性提高 ;②对HBsAg特异性T细胞增殖能力提高 ,HBsAg 3 0 μg /ml对pcS2 ·S免疫的小鼠脾细胞的刺激指数 (SI =5 6± 0 9)明显较空白质粒pcDNA3 1组 (SI =2 0± 0 5 )为高 (P <0 0 1) ,免疫组的IL 2 /IFN γ分泌水平为 (2 2 6 3± 41 0 5pg/ml) /(5 1 1± 7 7pg/ml) ,明显较空白组的 (69 0± 2 2 1pg/ml) /(0 9± 0 7pg/ml)为高 (P <0 0 1) ;③HBV基因疫苗免疫健康小鼠局部引流淋巴结中DCs的诱导HBsAg致敏T细胞增殖指数 (4 2 0 )较pcDNA3 1组 (2 5 5 )为高 ;⑤用在体电脉冲法注射治疗型HBV基因疫苗后 ,检测血清抗 HBs水平 ,无论是小鼠、兔还是猴均有明显提高。提示该治疗型HBV基因疫苗能较好地诱导体液和细胞免疫 。

治疗性HBV基因疫苗的研究进展

一、HBV的危害 乙型肝炎是一个严重的全球性公共卫生问题，全世界约有20亿人曾感染乙型肝炎病毒（HBV），约有3．5亿慢性HBV感染者，其中15％～40％的HBV感染者可能发展为肝硬化、肝衰竭或肝细胞性肝癌。我国是HBV感染的高流行地区。根据2002年的全国HBV感染者血清流行病学调查，HBsAg流行率为9．09％，约1．2亿人，其中慢性乙型肝炎患者约为2000万-3000万，每年死于乙肝相关性肝病约为30万人。

抗肿瘤和乙肝双效IL18-HBVS基因疫苗的构建

目的]探讨IL_18及乙肝病毒S基因(HBVS)的联合功效。[方法]从胎肝组织中抽提总RNA ,RT-PCR扩增IL-18cDNA基因。从载体 pcDNA3.0/S中限制性酶切获取HBVS基因 ,然后 ,将其与IL -18cDNA一并亚克隆到真核表达质粒 pIRES-EGFP中。[结果]构建了具有抗肿瘤及乙肝双重功效的IL18_HBVS乙肝基因疫苗。

HBV／HEV二价疫苗性抗原基因在E．coli中表达条件优化的初步研究

为有效提高由乙型肝炎的S抗原基因和戊型肝炎ORF2编码区羧基末端414—606氨基酸基因片段构建的高效表达载体质粒PTΩ-T7SE在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达效率,研究了质粒稳定性、葡萄糖质量分数、pH值、IPTG浓度、转接量、诱导时间、诱导温度、溶解氧对目的蛋白相对产量的影响,优化得到了较好的培养方法,使目的蛋白的相对含量达48.23%,菌体干重达0.5963g/L.结果表明,采用优化方法可制备较高纯度蛋白.本研究为大规模的发酵工艺提供了依据.