MMP2/MMP9介导的CD100剪切在促进肝内HBV特异性CD8 T淋巴细胞应答和介导病毒的肝内清除中发挥关键作用

[据《J Hepatol》2019年6月报道]题:MMP2/MMP9介导的CD100剪切在促进肝内HBV特异性CD8 T淋巴细胞应答和介导病毒的肝内清除中发挥关键作用(作者Yang SQ等).HBV感染是危害人类健康的最严重的世界性健康问题之一,虽然预防性疫苗的普遍使用极大降低了新发感染的发生率,但是已经感染的患者进展为肝硬化或肝癌的发生率和病死率依然居高不下,并且目前还无有效的干预手段.

活动性慢性乙型肝炎患者特异性CD8^+T细胞转录因子T-bet表达及临床意义

目的分析转录因子T-bet在活动性慢性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中的表达及其临床意义。方法用HBV肽五聚体结合流式细胞仪检测HLA-A2阳性的活动性慢性乙型肝炎患者和急性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet的表达。比较分析HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达在急性、慢性乙型肝炎之间的差异,并进一步分析慢性乙型肝炎患者HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达与HBV DNA水平、ALT水平以及临床预后之间的相关性。结果急性乙型肝炎患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平显著高于活动性慢性乙型肝炎患者。活动性慢性乙型肝炎患者及CHB患者外周血HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平与HBV DNA水平及ALT水平无明显相关性,HBV特异性CD8+T细胞中T-bet表达水平高的活动性慢性乙型肝炎患者发生HBeAg血清转换率显著升高。结论活动性慢性乙型肝炎患者特异性CD8+T细胞转录因子T-bet表达与HBV感染的免疫控制密切相关。

HBcAg肽特异性CD8^+T细胞抑制乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的观察HBV感染者的HBcAg肽特异性CD8+T细胞体外抑制乙型肝炎病毒(HBV)的作用和探讨非溶细胞机制清除病毒的效应分子。方法以HepG2.2.15细胞为靶细胞。用HLA-A匹配的HBcAg肽特异性CD8+T细胞克隆(效应细胞)与靶细胞(效靶比例1∶50)共同培养,于24h、48h和72h收集培养上清,通过检测其中HBV产物的变化,观察CD8+T克隆对HBV的抑制作用。用抗体中和法观察CD8+T细胞分泌的IFN-γ被封闭后HBV抑制的变化。结果 HBV特异性CD8+T克隆与靶细胞共育后,培养上清可检出高水平IFN-γ。共育后对HBsAg、HBeAg和HBV-DNA的最高抑制率分别为54.55%、50.36%和74.55%,均在72h。IFN-γ被抗体封闭后,对HBV DNA的抑制率显著下降,24h和48h分别为6.22%和17.48%。细胞毒活性最高见于24h,15.66%。结论①病毒特异性CD8+T细胞对靶细胞中HBV的清除既有溶细胞机制,也有非溶细胞机制参与;②IFN-γ是非溶细胞机制清除病毒的主要效应分子。

乙肝病毒核心抗原特异性CD8^+细胞毒T淋巴细胞及相关细胞因子与HBV-DNA、ALT的相关性研究

目的探讨乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗原特异性CD8^+细胞毒T淋巴细胞及相关细胞因子与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、谷丙转氨酶(ALT)的相关性。方法选择47例急性乙肝患者作为急性乙肝组,同期39例慢性乙肝活动期患者作为慢性乙肝组,同期28例健康体检者作为对照组,比较三组核心抗原特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞及相关因子(Core18-27、Env335-343、Pol575-583)、HBV-DNA、ALT、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)、总胆红素(TBIL)水平,分析乙肝病毒核心抗原特异性CD8+细胞毒T淋巴细胞及相关因子与HBV-DNA、ALT的相关性。结果急性乙肝组Core18-27、Env335-343、Pol 575-583水平分别为(1.24±0.51)%、(0.09±0.01)%、(0.09±0.02)%,高于对照组的(0.09±0.02)%、(0.06±0.02)%、(0.07±0.02)%和慢性乙肝组的(0.05±0.01)%、(0.04±0.01)%、(0.03±0.01)%,且对照组均高于慢性乙肝组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。急性乙肝组HBVDNA、ALT、AST、GGT及TBIL水平分别为(21.59±4.32)×10^3 copies/ml、(85.35±5.49)U/L、(120.59±12.19)U/L、(125.98±13.42)U/L、(40.39±1.32)μmol/L,均高于慢性乙肝组的(13.21±3.29)×10^3 copies/ml、(62.14±5.05)U/L、(87.56±6.87)U/L、(102.12±10.06)U/L、(25.49±1.21)μmol/L和对照组的0、(32.21±3.25)U/L、(30.29±3.41)U/L、(33.49±3.09)U/L、(12.59±0.14)μmol/L,且慢性乙肝组高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。Core18-27、Env335-343和Pol 575-583与HBV-DNA、AST、ALT、GGT及TBIL水平均呈正相关(P<0.05)。结论乙肝病毒核心抗原特异性CD8+细胞毒T淋巴细胞及相关细胞因子与HBV-DNA、ALT存在相关性,加强其表达水平测定反映疾病严重程度,有助于指导临床治疗。

髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4+T细胞免疫记忆形成的影响

目的研究髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成的影响。方法构建髓系细胞特异缺失ATG5的条件敲除小鼠,在其感染约氏疟原虫Plasmodium yoelii(P.yoelii)17XNL自愈后1个月、3个月和6个月分别再次感染该虫株,观察其原虫率变化。同时采用流式细胞术检测髓系细胞ATG5条件缺失感染自愈小鼠疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量的变化。结果成功构建髓系细胞ATG5条件缺失实验小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))。与对照组(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))相比,初次感染P.y 17XNL的实验组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))原虫血症明显低于对照组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))。在上述感染小鼠自愈后1个月、3个月和6个月再次感染P.y 17XNL,结果发现感染小鼠原虫血症与初次感染相比,均显著降低,且所有感染小鼠在攻击后6~8 d内完全清除体内疟原虫。流式检测后发现,ATG5^(f/f)-LysM cre^(+)与ATGf/f-LysM cre^(-)小鼠感染自愈后3个月或6个月,其脾脏疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量均无统计学差异。结论P.y 17XNL感染自愈小鼠可以有效诱导宿主免疫记忆,但髓系细胞缺失ATG5不影响疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成。

甲型H1N1流感病毒感染年轻和老年C57BL/6小鼠 诱导肺组织CD8^(+)T细胞特异性免疫应答的比较研究

目的比较甲型H1N1流感病毒PR8毒株感染老年和年轻C57BL/6小鼠诱导肺组织CD8^(+)T细胞特异性免疫应答的能力。方法使用490 PFU的PR8病毒分别滴鼻感染年轻(3月龄)和老年(24月龄)C57BL/6小鼠,连续14 d每日记录其体重变化及死亡情况。在感染后第8天分离小鼠肺组织细胞,使用流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting,FACS)技术检测病毒抗原特异性CD8^(+)T细胞数量及功能:MHC-I表位肽四聚体法(tetramer staining)染色流感特异性CD8^(+)T细胞,细胞内细胞因子染色法(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞经流感病毒特异性肽刺激后分泌细胞因子水平包括TNF-α、IFN-γ、IL-2以及与CD8^(+)T细胞杀伤功能有关的颗粒酶B(Granzyme B)的水平。结果相同量的PR8流感病毒感染小鼠后,老年小鼠体重下降更多,死亡率显著高于年轻小鼠(P<0.01)。另一方面,老年组小鼠诱生的病毒特异性CD8^(+)T细胞比例显著低于年轻组;同时,老年组CD8^(+)T细胞活化后分泌细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2的水平显著低于年轻组;此外,老年组CD8^(+)T细胞表达granzyme B的水平同样显著低于年轻组。结论PR8流感病毒感染老年和年轻C57BL/6小鼠后,老年小鼠肺组织诱导产生的特异性CD8^(+)T细胞的数量减少且功能降低。结果表明:与年轻小鼠相比,老年小鼠肺组织CD8^(+)T细胞特异性免疫应答功能受损。

采用IL-12刺激慢性HBV携带者的外周血单核细胞可促进HBV-特异性中心记忆型CD8＋T细胞反应

为了治疗HBV感染，了解在HBV感染个体中免疫耐受或低反应性的机制是非常重要的。在本项研究中作者检测了慢性无症状HBV携带者的细胞免疫状态并设法找出促进其特异性细胞免疫反应的对策。HBV非特异抗原性和特异性抗原单独或与IL-12联合用于激活来自HBV携带者和健康对照者外周血单核细胞（PBMCs）以评价其细胞因子反应。

病毒特异性CD8^＋T细胞抗病毒免疫的研究进展

病毒利用宿主细胞核酸和蛋白质装置进行增殖,并与宿主细胞表面的受体结合,感染众多靶细胞.一旦建立感染,抗原呈递细胞通过内源性抗原呈递途径加工、呈递病毒抗原,激活机体免疫应答.病毒特异性免疫主要机制是细胞毒性T淋巴细胞作用,清除病原体和感染的靶细胞,同时CD8+T细胞分化为记忆T细胞,介导再次免疫应答.

艾滋病患者HIV-1抗原特异性CD8^+记忆性母细胞样T细胞的扩增

目的对艾滋病患者人类免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)抗原特异性CD8^+记忆性母细胞样T细胞(TSCM)的扩增进行分析。方法纳入10例HIV-1感染者作为研究对象,磁珠法分离艾滋病患者CD8^+T淋巴细胞,并利用Tetramer-SL9标记T细胞表面抗原受体。利用流式细胞术检测标记有流式抗体的HIV-1抗原特异性CD8^+TSCM的分布情况,利用细胞因子探索其扩增。结果 HIV-1抗原特异性CD8^+TSCM在CD8^+T淋巴细胞中的比例,随着时间延长,可诱导出更多的TSCM细胞,但是峰值在10 d左右。结论艾滋病患者CD8^+T细胞中TSCM细胞的存在,用HIV-1抗原表位(SL9)来标记安全性高,扩增效果好,可为艾滋病的过继免疫治疗提供技术参考。

乙型肝炎肝硬化抗病毒治疗前后抗原特异性CD8^(+)T细胞功能分析

目的观察乙型肝炎肝硬化抗病毒治疗前后外周血HBV抗原特异性T细胞的数量功能与临床预后的相关性。方法经HLA-A2分型检测选取46例患者,采用主要组织相容性复合物(MHC)-抗原肽四聚体标记技术,经流式细胞仪检测乙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗前后外周血HBV抗原特异性CD8^(+)T细胞百分比,并对其细胞因子分泌能力及表型进行检测分析。结果46例人类白细胞相关抗原HLA-A2阳性者中,检出抗原特异性CD8^(+)T细胞表达的为22例。TDF治疗后患者ALT为(31.29±18.42)U/L,较治疗前(124.05±29.18)U/L明显下降(t=72,P=0.015),HBV DNA全部转阴,转阴率为100%。治疗后抗原特异性的CD8^(+)T细胞数量为(1.15±0.37)%,明显高于治疗前的(0.65±0.25)%(t=59,P<0.01);治疗后γ干扰素为(6.86±2.08)%,明显高于治疗前(3.58±1.26)%(t=46,P<0.01);抗病毒治疗后HBV表位特异性的CD8^(+)T细胞表达抑制性因子PD-1的细胞百分比为(0.43±0.19)%,低于治疗前的(0.76±0.43)%(t=131,P=0.0084);HBV表位特异性的CD8^(+)T细胞表达活性因子CD28的细胞百分比为(1.03±0.45)%,高于治疗前的(0.56±0.26)%(t=100,P=0.0006)。结论乙型肝炎肝硬化患者外周血中抗原特异性CD8^(+)T细胞存在功能缺陷,经抗病毒治疗后抗原特异性CD8^(+)T细胞数量和功能有一定程度的增强。

HBV感染型原发性肝癌患者肿瘤微环境中CD4^+、CD8^+T细胞和VEGF水平变化特征及其临床意义

目的探究慢性乙肝炎病毒(HBV)感染型研发型肝癌患者肿瘤微环境中CD4^+、CD8^+T细胞、血管内皮生长因子水平变化特点以及临床意义。方法选取94例原发性肝癌患者作为研究对象,按照是否感染HBV分为观察组和对照组,观察组54例患者为HBV感染型原发性肝癌,对照组40例为未感染HBV型原发性肝癌患者。对所有患者的肝穿刺活检标本或肝癌根治切除标本检测,比较分析两组患者肿瘤组织CD4^+T淋巴细胞(CD4^+)、CD8^+T淋巴细胞(CD8^+)的表达情况以及血管内皮因子(VEGF)水平变化情况。结果观察组的CD4^+T细胞水平(55.6%)明显高于对照组的(10.0%),而CD8^+T细胞水平(44.4%)明显低于对照组的(90.0%),差异具有统计学意义(χ^2=20.7,P<0.05);观察组血清VEGF水平[(588.7±148.4)ng/l]显著高于对照组[(217.0±94.3)ng/l],差异具有统计学意义(P<0.001)。结论T细胞的亚群表达情况、血清VEGF与HBV感染型原发性肝癌病情发展和转移有着一定重要意义,能够了解患者的机体免疫情况和病情转移情况,具有良好的临床研究价值。

髓鞘抗原特异性CD8^+T细胞在MS/EAE脑组织免疫豁免中作用的研究进展

对多发性硬化(MS)及其动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中T细胞迁移的研究长期关注于CD4^+T细胞。活细胞成像研究提供CD4^+T细胞进入CNS的3种可能途径,而且发现必须连续破坏两种不同的组织屏障。但近年来发现CD8^+T细胞在MS/EAE发病中的重要地位,同时它们的迁移,并显示其机制与CD4^+T细胞的机制不同。因此,我们综述了MS/EAE中髓鞘抗原特异性CD8^+T细胞的体内迁移和免疫豁免的国内外最新研究进展,以期了解它们与MS/EAE发病的精确机制。

CD8^+CD28^-调节性T细胞及血小板特异性自身抗体在免疫性血小板减少症中的表达

目的检测免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中CD8^+CD28^-调节性T细胞(Treg)、血小板特异性自身抗体、细胞因子的表达水平,分析其在ITP发病机制以及临床治疗中的意义。方法 73例ITP患者分为激素治疗组( n =42)、重组人粒血小板生成素(rhTPO)治疗组( n =31),并根据治疗效果分为有效组和无效组。流式细胞术检测患者治疗前后外周血CD8^+CD28^- Treg的表达,流式微球技术检测患者外周血血小板特异性自身抗体的表达。ELISA法检测患者治疗前后转化生长因子(TGF)-β1、白介素(IL)-10和干扰素(IFN)-γ表达水平。以30例健康体检者作为正常对照组。结果① 73例ITP患者治疗前CD8^+CD28^-Treg及细胞因子IL-10、TGF-β1的表达低于正常对照组,IFN-γ表达高于正常对照组( P <0.05),激素及rhTPO治疗后有效组CD8^+CD28^- Treg、IL-10、TGF-β1的表达均比治疗前显著上升,IFN-γ的表达较治疗前显著降低( P <0.05)。无效组CD8^+CD28^- Treg、IFN-γ、IL-10、TGF-β1的表达和治疗前相比均未有明显变化。②根据受试者工作特征曲线(ROC),激素组治疗前CD8^+CD28^-Treg的临界值为14.35,此时预测激素疗效的敏感性和特异性分别为66.7%和73.3%。27例有效者中小于14.35的有18例(66.7%),15例无效者中大于14.35的有11例(73.3%)。rhTPO组治疗前CD8^+CD28^-Treg的临界值为15.45,此时预测rhTPO疗效的敏感性和特异性分别为63.6%和88.9%。22例有效者中大于15.45的有14例(63.6%),9例无效者中小于15.45的有8例(88.9%)。③激素组抗血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)抗体阳性患者18例,治疗后有效率44.4%,抗GPIb抗体阴性24例,有效率79.1%,两者比较差异有统计学意义( P <0.05)。结论 CD8^+CD28^- Treg及相关细胞因子的表达异常参与了ITP的发病,激素和rhTPO可能通过改变这种异常发挥作用。治疗前检测CD8^+CD28^-Treg有助于预测激素及rhTPO的疗效。抗GPIb抗体阳性可能是激素治疗不敏感的影响因素之一。

甲型流感病毒H1N1 pdm09与PR8感染C57BL/6小鼠诱生特异性CD8^+T细胞免疫应答的比较研究

目的比较甲型流感病毒H1N1两亚型毒株A/Shanghai/37T/2009(H1N1)(pdm09)临床分离株和A/Puerto Rico/8/34(H1N1)(PR8)标准株感染C57BL/6小鼠后,其病理状态的改变及诱生特异性CD8+T细胞的免疫反应。方法①用9.85×10 6半数组织细胞感染剂量(50% tissue culture infective dose,TCID 50 )的PR8和pdm09病毒分别滴鼻感染野生型C57BL/6小鼠,每日(连续14 d)观察其状态并记录死亡情况。于感染后第1、3天处死小鼠,取其肺称重计算肺指数;左叶肺经4%多聚甲醛固定后进行H&E(hematoxylin-eosin staining)染色,观察感染后肺的病理变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺病毒载量。②用0.25倍半数致死量(lethal dose 50%,LD50)的PR8和pdm09分别滴鼻感染小鼠,每日称重连续观察。于感染后第8天解剖取肺和脾,通过H&E染色比较肺部病理改变;通过流式细胞术(FACS)检测脾病毒特异性CD8+T细胞数量比例,以及IFN-γ、TNF-α、IL-2、granzyme B等细胞因子和免疫抑制检查点分子PD-1、LAG-3、Tim-3、CTLA-4的表达情况。结果①以相同TCID 50 流感病毒感染后,两组小鼠均出现疾病状态。PR8组小鼠感染第5天全部死亡,死亡率显著高于pdm09组( P<0.01);第1、3天肺指数和病毒载量的结果PR8组均显著高于pdm09组;H&E染色结果显示PR8组病理损伤严重,肺泡壁增厚,出现肺实质化,血细胞渗出增多,而pdm09组小鼠肺组织病理损伤较轻,炎症浸润少;②以相同LD50流感病毒感染后,PR8组小鼠的体重损失和肺组织病理损伤均比pdm09组严重;流式结果显示PR8组诱生的病毒特异性CD8+T细胞比例高于pdm09组,但是PR8组中活化的CD8+T细胞(CD8+CD44 High )表达的IFN-γ、IL-2和TNF-α显著低于pdm09组;检测该群细胞免疫功能耗竭分子,发现其表达了更多的免疫抑制分子PD-1和LAG-3。结论 PR8相对于pdm09能够对小鼠造成更严重的损伤,可能是因为其活化的特异性的CD8+T细胞出现功能耗竭导致特异的免疫保护力受损,抵抗和清除病毒的能力下降,故而造成更严重的病理损伤。

受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型流感病毒H1N1感染C57BL/6小鼠诱导特异性CD8^+T细胞应答

目的研究受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein 3, RIP3)在C57BL/6小鼠感染甲型流感病毒H1N1 PR8后,在特异性CD8+T细胞免疫应答中的作用。方法用剂量为0.7×10^3半数组织细胞感染剂量(50% tissue culture infective dose, TCID 50 )的甲型流感H1N1 PR8病毒株,通过滴鼻方式分别感染RIP3敲除(RIP3 -/-)和野生型(WT)的C57BL/6小鼠。在感染后第8天(day post infection, d.p.i)分离小鼠脾细胞,使用流式细胞术(fluorescence-activated cell sorting, FACS)检测流感抗原特异性CD8+T细胞数量及功能:MHC I表位肽四聚体法(tetramer staining)染色流感特异性CD8+T细胞,细胞内细胞因子染色法(intracellular cytokine staining, ICS)检测CD8 +T细胞产生IFN-γ、TNF-α、IL-2等效应性细胞因子水平和与CD8+T细胞杀伤功能有关的颗粒酶(granzyme B)的表达情况。结果 0.7×10^3 TCID 50 流感病毒感染后,WT小鼠中流感抗原特异性CD8 +T细胞比例为RIP3 -/-小鼠的2.71倍;WT小鼠中CD8+T细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2的能力均显著高于RIP3 -/-小鼠( P<0.01);且WT小鼠CD8+T表达granzyme B水平显著高于RIP3 -/-小鼠( P<0.01)。结论本研究在甲型流感病毒感染的小鼠体内发现敲除RIP3分子可导致流感感染诱导的特异性CD8+T细胞数量减少、功能降低,表明RIP3是参与流感抗原特异性CD8 +T细胞的诱生及功能发挥的关键分子之一。

Renca细胞exosomes所诱导的CD8^+T细胞的特异性杀伤作用

目的检测Renca细胞exosomes对CD8^+T细胞的激活效应以及exosomes负载的树突状细胞(DCs)所诱导的CD8^+T细胞对Renca细胞特异性杀伤作用。方法采用超速离心法从Renca细胞无血清上清液中提取出exosomes并鉴定,体内通过流式和ELISA;体外通过CFSE荧光染色和ELISA检测exosomes对CD8^+T细胞的激活效应。小鼠骨髓分离出DCs并进行体外培养,用exosomes冲击成熟的DCs然后活化CD8^+T细胞,测定其对Renca、4T1、CT26细胞的杀伤率。结果透射电镜下观察exosomes是直径在30~100 nm的盘状囊泡,Western blot检测exosomes高表达MHC-1和HSP70。Exosomes能在体内和体外促进CD8^+T细胞的增殖和激活效应。在体外杀伤实验中,exosomes冲击的DCs所诱导的CD8^+T细胞相对于4T1和CT26细胞,其对Renca细胞具有明显更强的杀伤作用。结论 Renca细胞exosomes对CD8^+T细胞具有明显的激活作用且exosomes负载的DCs所诱导的CD8^+T细胞对自体肿瘤细胞具有强烈的特异性杀伤能力。

慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达的变化和意义

目的检测慢性HBV感染者外周血CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR表达水平,探索HBV感染过程中CD8^+T细胞活化与耗竭的相关性。方法收集未经抗病毒治疗的HBV感染者76例及健康对照者14例外周血,根据外周血HBV DNA水平分为高病毒载量组与低病毒载量组;使用流式细胞术检测HBV感染者CD8^+T细胞CD95、CD38、HLA-DR的表达以及共表达水平,同时进行相关性分析。结果与健康对照组比较,慢性HBV感染者CD8^+T细胞CD95、HLA-DR的表达、CD38和HLA-DR的共表达水平显著升高(P<0.01);CD8^+T细胞CD95与HLA-DR表达呈正相关(P<0.05)。结论慢性HBV感染过程中CD95的表达可能对外周血CD8^+T细胞的耗竭过程发挥重要作用,而HLA-DR的表达升高和CD38+HLA-DR+CD8^+T细胞频率的升高提示CD8^+T细胞仍然维持着一定的效应潜能。

特异性免疫治疗对变应性鼻炎外周血CD4+CD25+T调节细胞的影响及远期疗效的观察

【目的】通过检测变应性鼻炎患者皮下特异性免疫治疗前后外周血CD4+T淋巴细胞表面CD25表达情况的变化及观察相关指标,探讨皮下特异性免疫治疗的机制,评价其远期疗效。【方法】将90例确诊变应性鼻炎患者随机分为免疫治疗组和药物治疗组,每组45例。通过症状评分、使用药物评分和鼻结膜炎相关生活质量调查问卷等评价临床疗效,同时通过流式细胞仪检测外周血CD4+T淋巴细胞表面CD25表达情况。【结果】随着特异性免疫治疗的进行,免疫治疗组与药物治疗组症状评分无统计学差异;而免疫治疗组药物评分要明显低于药物治疗组,鼻结膜炎相关生活质量调查问卷评分要高于药物治疗组,差异有统计学意义。变应性鼻炎患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞比例要低于健康对照组,免疫治疗组治疗3年后比例较治疗前升高,差异有统计学意义。而药物治疗组的比例没有明显提高。【结论】经过3年的特异性免疫治疗后,患者症状控制理想,对症治疗的药物明显减少,生活质量明显提高。这可能与影响CD4+CD25+T调节细胞的功能有关。

儿童过敏性鼻炎特异性免疫治疗过程中外周血CD4^+调节性T细胞的变化及意义

目的探讨儿童过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的发病及特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)的治疗机制。方法采用流式细胞术检测56例AR患者SIT治疗前、治疗1年后外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg表达水平:采用ELISA法检测血清中IL-10、TGF-β1,并与30例健康儿童进行对比。结果 56例AR患儿SIT治疗前外周血中CD4+CD25+CD127lo/-Treg占CD4+T细胞的百分比为(5.36±1.31)%,显著低于对照组(10.23±2.26)%,P<0.05,但SIT治疗1年后其数值为(9.37±2.15)%,与对照组无明显差异。AR患儿治疗前血清中IL-10值为(3.68±1.21)pg/ml,显著低于对照组的(12.37±2.18)pg/ml,P<0.05;TGF-β1表达水平与对照组比较差异无统计学意义。SIT治疗1年后血清中IL-10水平亦与对照组差异不明显(P<0.05);而TGF-β1表达水平分别为(20.16±4.45)pg/ml及(9.27±2.38)pg/ml,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童AR患者外周血中CD4+Treg表达水平低,且存在功能缺陷,导致体内诱导免疫耐受机能不足,SIT治疗可以明显调节免疫免疫细胞的功能。

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞的影响

目的:探讨特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)对哮喘大鼠白细胞介素-10(IL-10)和CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)的影响。方法:40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白(OVA)雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4+CD25+Tr百分率变化。结果:正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组(均为P<0.01),哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组(P<0.01,P<0.05);正常对照组外周血CD4+CD25+Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组(P<0.01),而SIT治疗组CD4+CD25+Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组(P<0.05)。结论:通过上调体内IL-10和CD4+CD25+Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。