基于HBV核心抗原CTL表位的治疗性多肽在体诱导抗原特异性细胞免疫应答的研究

目的 探讨基于表位的治疗性多肽抗原组分、结构与诱导免疫应答之间的关系。方法 用分子设计的理论和方法 ,设计基于HBV抗原免疫优势性CTL、Th及B细胞表位的 3种治疗性多肽候选疫苗分子 ,经Merrifield固相多肽合成技术合成 ,并经HPLC纯化、鉴定。以BALB c(H 2 d)纯系小鼠为实验对象 ,进行体内免疫学功能研究。结果 所设计治疗性多肽分子可在体诱导较强的抗原特异性CTL应答和适度的抗体反应。Th、B细胞表位的引入可增强CTL表位肽的效应。结论 提示在治疗性表位多肽疫苗的分子设计中 ,引入B -、Th表位可显著提高CTL表位肽的免疫原性。

HLA-表位肽四聚复合物检测系统在研究HBV/HCV抗原特异性CTL中的应用

HLA I-表位肽四聚复合物检测系统(简称:四聚复合物检测系统)是以生物素-亲和素、人工制备的HLAI类分子、β2-M和特异性抗原表位多肽构建的四聚复合物,模拟靶细胞膜表面的HLAI类分子-表位复合物检测系统。它通过T细胞受体识别并结合相应表位的特异性CTL,以生物素-荧光标记的亲和素为标记物并利用流式细胞仪进行定量检测和分拣;它能在体外直接定性、定量检测T细胞群中的特异性CTL,因而对微生物感染、肿瘤、移植排斥等疾病的细胞免疫学研究将产生重大的影响。本文着重介绍了该技术在HBV/HCV感染研究中的应用进展。

抗原表位特异性CTL在慢性HBV感染肝损伤和抗病毒中的作用研究

目的:探讨抗原表位特异性CTL在肝炎发作中的抗病毒和肝损害作用.方法:用四个HBV抗原表位肽四聚体对外周血中抗原特异性CTL进行检测,(HBV抗原表位肽分别为HBcAg18-27,序列为FLPSDFFPSV(C18),HBsAg183-191序列为WLSLLVPFV(E183),HBeAg335-343序列FLLTRILTI(E3.35),多聚酶P的575-583序列为FLLSLGIHL(P575))检测慢性乙型肝炎患者肝炎发作时病毒抗原表位特异性CTL出现频率,统计分析抗原表位特异性CTL频率与病毒载量和血清ALT水平的相关关系.将所有检测的病例按照血清ALT水平高低重新分组进行对比,分析各组间抗原表位特异性CTL频率的差异.结果:36例慢性HBV感染患者抗原表位特异性CTL检测阳性33例(91.7%),HBeAg183-191表位特异性CTL频率高于其他三个(P<0.05).统计分析抗原表位特异性CTL频率与病毒载量和血清ALT水平相关性不显著;分组对比发现血清ALT升高5-10倍组多个抗原表位特异性CTL水平高于其他组(P<0.05).结论:慢性HBV感染患者外周血中存在抗原表位特异性CTL,但特异性CTL的存在并不能代表保护性免疫.认为慢性HBV感染肝炎发作时抗原表位特异性CTL反应增强,抗原表位特异性CTL在肝炎发作过程中具有抗病毒和肝组织损害双重作用,肝组织损害可能比较轻微,严重的肝损害可能是非特异性细胞造成.

特异性细胞毒T淋巴细胞治疗慢性乙型肝炎

近年来HBV免疫病理学研究提示:HBV抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)在清除肝内HBV的免疫反应过程中起着关键性的作用。因此,增强特异性CTL的功能,可能有助于清除肝内HBV,从而起到治疗作用。1992笔者在中国医学科学院基础医学研究所单克隆抗体研究室朱力平教授的帮助和指导下,建立了体外制备HBV特异性CTL的方法,并自1992～1995进行了3期前瞻性、多中心临床试验,现报告如下:1 资料与方法1.1 病例选择标准

通过腺相关病毒载体导入树突状细胞的HBV基因可诱导CTL的活性

乙型肝炎已是一个越来越重要的全球问题，但是还很难治疗。不过免疫学治疗提供了新的有效的治疗措施。3种重组性腺相关病毒（AAV）2型载体分别将HBV基因S，C或X中的任何一个导入专职抗原提呈树突状细胞（DC），可刺激体内细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的活性。研究发现这3种携带重组性AAV／HBV抗原病毒的DC其转导有效率为90％。更为重要的是，这3种AAV转导树突状细胞都刺激了快速的，抗原特异性的MHCCTL活性。

HBV组织相容性复合物-抗原肽五聚体在特异性细胞毒T淋巴细胞检测中的应用

组织相容性复合物（MHC）-抗原肽五聚体（Pentamer）复合物是目前检测特异性细胞毒T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes，CTL）最为敏感而特异的方法之一，正被广泛应用于多种病毒感染性疾病发病机制的研究以及作为临床感染转归的预测指标。但由于外周血淋巴细胞中特异性CTL的数量非常低，对于如何确定特异性CTL频数存在相当大的困难。

乙型肝炎的免疫及治疗性疫苗研究

乙型肝炎是一种危害严重的传染病.全世界有超过3.5亿人为乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)慢性感染者,每年因乙型肝炎相关性肝病死亡的人数达一百万[1].我国是乙型肝炎的高发地区,虽然经过近年来全国性的新生儿乙型肝炎疫苗接种,5岁以下儿童的HBsAg阳性率已降为0.96％,但现有的慢性HBV感染者仍有约9300万人,其中慢性乙型肝炎患者约2000万人[2],乙型肝炎仍然是威胁我国人民健康的最严重的传染病.