鼠李糖乳杆菌HN001菌株水平快速定量方法的建立及应用

目的应用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR),建立鼠李糖乳杆菌HN001菌株水平的快速定量检测方法。方法通过比对鼠李糖乳杆菌HN001的近缘菌株的基因组,筛选出鼠李糖乳杆菌HN001菌株水平的特异基因,以菌株水平的特异基因为靶标设计引物及探针,优化反应体系和条件,建立鼠李糖乳杆菌HN001株水平的qPCR检测方法。对方法的特异性、灵敏度、检出限进行验证,并采用已建立的qPCR方法进行模拟添加样品和实际样品的检测。结果所建立的方法特异性强,与近缘菌株无交叉反应,鼠李糖乳杆菌HN001纯培养液检出限为10^(2)CFU/mL,灵敏度可达到650 copies/μL,可在2 h内完成样品检测。对模拟添加样品以及实际样品检测中qPCR和平板计数法结果的对数值进行显著性分析检验,两种方法的测定值结果均无显著性差异(P>0.05)。结论本研究建立的qPCR检测方法可有效应用于益生菌产品中鼠李糖乳杆菌HN001菌株水平定量检测,具有快速、灵敏、准确的特点。

转基因大豆低水平混杂定量检测及其不确定度分析

开展转基因大豆GTS-40-3-2低水平混杂定量检测及其不确定度研究。在95%置信区间和成本可接受、操作程序不复杂的条件下,建立实时聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和数字PCR定性检测方法可稳定检出含0.01%转基因大豆GTS-40-3-2的样品,而数字PCR定量检测方法可对含0.1%转基因大豆GTS-40-3-2的样品进行准确定量,即使转基因含量低至0.05%,定量误差仍不超过50%。通过分析数字PCR定量的不确定度来源,参考化学分析中计算模型,给出转基因定量的不确定度测算公式,并以转基因大豆GTS-40-3-2为试样进行室内验证,计算得到含0.1%和0.05%的转基因大豆GTS-40-3-2定量扩展不确定度分别为23.56%和107.29%(k=2)。

利用横波反射技术定量计算水平井储层边界

低渗透率砾岩油藏采用水平井与体积压裂技术进行开发,而储层边界是井眼轨迹评价和压裂设计的重要参数。利用地质建模计算储层边界受到电阻率与伽马反演影响,储层边界计算精度低,难以准确定量化计算。准噶尔盆地低渗透率砾岩油藏地层倾角小、储盖层波阻抗差异大、水平井轨迹角度接近90°、偶极横波传播方向与储层边界垂直、储层边界偶极横波反射信号强烈,根据这些规律,提出利用横波反射技术定量计算水平井储层边界的方法。该方法仅用正交偶极声波数据即可准确计算水平井储层边界距井眼的距离,结合地层产状、厚度、井眼轨迹,计算储层边界垂直深度,形成水平井储层、井眼轨迹、上下隔层垂向剖面,能够准确评价水平井储层和井眼轨迹,为低渗透率砾岩油藏效益开发提供量化依据。

绿地建设水平的城市间差异及其影响因素定量分析

城市生态环境质量和生态系统服务与城市绿地建设水平有很大关系。但对于绿地建设水平的城市间差异及其主要影响因素了解还很有限。本研究基于中国省会城市的社会经济调查统计数据,采用相关分析、因子分析和多元回归分析等方法,研究了绿地建设水平的城市间差异规律及其主要影响因素。结果表明,全国省会城市市辖区绿地率平均为8.1%(1.8%~34.5%),人均绿地面积平均为58.4m2(27.1~190.6m2),人均公园绿地面积平均为14.0m2(7.9~32.0m2)。市辖区绿地率及人均绿地和人均公园面积在不同城市间存在很大差异,并且没有明显的地理分布规律。多元统计分析表明,绿地建设水平的城市间差异同时受到城市化水平、经济水平、自然气候和城市规模等因素的综合影响,并且对于反映城市绿地建设水平的不同指标,各类影响因素的贡献也存在差异。因此,应该针对不同城市,明确各自绿地建设的关键限制因素,采取各自适宜的措施和对策,提高城市绿地建设水平。

人力资源开发与经济增长关系的定量研究

文章通过采集和分析相关数据,揭示了人力资源开发对经济增长的显著影响。研究结果清晰展示了人力资源开发水平提升与经济增长正相关的关系。具体而言,提高教育水平、增加培训机会以及提升技能水平都为经济增长作出了积极贡献。同时也深入研究了不同发展阶段和行业之间的联系。研究表明,在初级阶段,人力资源开发扮演着更为关键的角色,而在高级阶段则更加积极地推动经济发展。

“计件+绩效”提升数字化供电所综合管理水平

1提出背景国网邢台市任泽区供电公司经济开发区供电所现有供服员工82人,其中50岁以上的有47人。任泽区供电公司经济开发区供电所原有的供电所供服员工的绩效考核指标体系基本以定性考核为主、以定量考核为辅,各项量化考核指标任务按职能进行分解下达。

肝组织HBVDNA定量检查的临床意义

由于对HBV感染的认识正在不断深入,抗病毒治疗急待寻找判定效果可靠的方法,HBVDNA检测,特别是血液和肝组织定量检测显得极其重要。不加选择对HBV感染者作肝活检时留取小粒肝组织,同时采血作HB-VDNA定量检查。急慢性HBV感染病例均示肝组织内HBVDNA检查明显高于血内检出率,同时肝组织HBV含量明显高于血液的含量。肝组织检测HBVDNA可以明显提高HBV感染诊断率,血内HBVDNA阴转时不能说明肝组织内亦已阴转,血内HBVDNA阴转不宜随即停止治疗。

血液和组织内HBVDNA定量检查的临床意义

HBV感染的治疗应以抗病毒为主 ,评价疗效应以HBVDNA消长来衡量。用PCR定量法不加选择地观察98例HBV急慢性感染病例的血液和肝、脾、肾、脑组织内HBVDNA含量。急性HBV感染血和肝组织内HBVDNA阳性率和平均含量均较低 ,慢性感染则均明显较高。治疗血内HBVDNA阴转后 ,肝组织内多数亦随之阴转。慢性HBV感染者血和肝、脾、肾、脑组织均可查见HBVDNA ,肝、脾脏组织内含量较高 ,少数阴转可能晚于血液 ,不应忽略巩固治疗 ,防止复发。

2.2.15细胞上清HBVDNA定量检测方法的比较

目的拟筛选和比较2.2.15细胞上清中HBVDNA定量检测的方法。方法分别采用3种方法抽提HBVDNA,抽提物分别采用Taqman荧光定量、SYBR荧光定量PCR技术检测其滴度。结果直接应用上清分别采取热变性,碱裂解法抽提HBVDNA均为阴性,而应用PEG沉淀后检测结果证实细胞上清中有高拷贝的分泌性HBVDNA,Taqman荧光定量方法的敏感性高于SYBR实时定量PCR,在高拷贝时,两种方法的检测结果一致。结论PEG沉淀法是2.2.15细胞上清HBVDNA提取的有效方法,Taqman荧光定量方法敏感性高,是HBVDNA定量检查的首选方法。SYBR法简便,经济,也可用于上清HBVDNA的检测。

HBeAg阴、阳性慢乙肝患者细胞免疫状态及HBVDNA水平分析

目的对比HBeAg阴性及HBeAg阳性慢性乙肝患者在细胞免疫状态及HBV DNA水平方面的差别,分析造成这种差别的可能原因。方法应用流式细胞仪进行T淋巴细胞分类检测、荧光定量PCR测量血清中的HBVDNA。结果在HBVDNA水平方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者均值为(5.13±1.43)Log,显著低于HBeAg阳性组的(6.29±1.70)Log(P<0.05);在T淋巴细胞分类方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者CD8+T显著高于HBeAg阳性患者,分别是:23.25±3.79和20.69±3.30(P<0.05),总T、CD4+T及CD44+/CD8+比值方面两组无明显差别(P>0.05)。结论HBeAg阴性慢性乙肝患者HBV DNA水平低于HBeAg阳性患者,可能与HBeAg阴性慢性乙肝患者具有相对较强的细胞免疫状态有关。

雏鸡不同组织TLR1、TLR2、TLR4、TLR5和TLR15 mRNA转录水平相对定量研究

参考GenBank登录的ChTLRs基因序列设计实时定量PCR特异性引物,建立检测鸡Toll样受体(ChTLR)mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析ChTLR1、ChTLR2、ChTLR4、ChTLR5和ChTLR15在雏鸡不同器官组织中的转录水平。结果显示5种ChTLRs在脾脏、法氏囊、胸腺和各段肠道组织中均有转录。其中,ChTLR1 mRNA在法氏囊、肾脏和盲肠组织中转录水平较高;ChTLR2 mRNA在脾脏、法氏囊和肝脏等组织中转录水平较高,在肾脏、肺脏和皮肤未检测到转录;ChTLR4 mRNA在所检测组织中转录水平差异较小,在脾脏、十二指肠和胸腺转录水平较高;ChTLR5 mRNA在肾脏、脾脏和空肠中的转录水平较高;ChTLR15 mRNA在法氏囊中转录水平最高,其次为脾脏和盲肠。本研究建立了检测ChTLRs mRNA在不同器官组织中表达水平的实时定量PCR方法,ChTLRs mRNA在雏鸡各器官组织中转录水平差异较大,可能与雏鸡各器官组织对病原的识别和抵抗能力有关。

标准化水平定量评价及其指标体系

对标准化水平定量及评价指标体系进行了探讨,初步建立了一套完整的指标体系。

半定量RT-PCR测定中药成分对小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平的影响

应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响。结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同。

三西地区可持续发展水平综合定量评价研究

以三西地区为背景 ,针对区域可持续发展水平综合评价问题 ,建立多层次、多要素评价指标体系 ,以及多级模糊综合评价的定量化计算模型。借助于该模型 ,运用有关实地调查资料和统计数据 ,对三西地区各县 (市、区 )可持续发展水平进行综合排序计算 ,有关结果为三西地区可持续发展决策提供了依据。

基于水平井信息的辫状河岩相单元与砂体定量研究——以委内瑞拉奥里诺科重油带MPE3区块为例

采用直井信息进行砂体定量研究时,往往由于井间对比的不确定性,导致对砂体规模的认识存在较大的不确定性。水平井对储层砂体横向预测具有重要参考价值,这是常规直井难以达到的。因为水平井可以揭示砂体横向变化,从而为我们在砂体定量表征、岩相单元划分等定量化地质研究方面提供帮助。针对研究区辫状河储层特点,结合直井岩心、直井与水平井的测井信息,首先确定出4类岩相单元,进行直井与水平井岩相单元划分;然后结合直井与水平井信息,进行砂体定量研究,确定了心滩和辫状河道砂体的形态及发育规模,进而建立了心滩长宽比、心滩与河道宽度比、夹层与心滩宽度比等定量关系;随后以水平井钻遇砂体信息为约束,进行储层地震波阻抗反演;最后结合砂体定量表征与波阻抗反演结果,进行岩相单元的预测。研究结果表明:基于水平井信息可以精细刻画储层内部岩相分布特征,提高储层砂体定量研究与内部非均质性描述的精度;水平井段信息增加了参与地震储层反演的样点数量,从而减小了井间储层预测的不确定性,可以明显提高储层内部地震反演精度和可靠性,并可以提供更为可靠的储层岩相模型。

行人服务水平评价的半定量方法

为了更加科学、合理地计算交叉口的行人服务水平,运用定性推理方法和基于类相关的连续属性离散化理论,探讨在具有高度混合和不确定性的交通环境下,建立行人服务水平评价指标计算的半定量模型、确定服务水平分级标准的方法;并以北京市城市道路平交信号交叉口为例,运用所提出的半定量方法,说明了建立混合交通环境下城市道路信号交叉口行人服务水平评价系统的过程,并得出了混合环境下交叉口行人服务水平评价指标计算的半定量模型以及分级标准.运用服务水平评价指标的半定量模型及其分级标准来评价指定交叉口的行人服务水平,具有计算过程简单、结果科学的特点.

中国热点旅游城市旅游国际化水平定量评价研究

从国际旅游业发展水平和国际旅游业发展环境两大方面入手,构建了4层39个指标的评价体系,采用层次分析法,定量评价了中国27座热点旅游城市的旅游国际化水平。在此基础上,运用SPSS软件进行聚类分析,将中国热点旅游城市的旅游国际化水平划分为4种类型,最后分析了各城市旅游国际水平的优劣势和提升方向。

定量CT与血清骨钙素水平联合诊断老年女性骨质疏松的临床价值分析

目的探讨定量CT与血清骨钙素水平联合诊断老年女性骨质疏松的临床价值。方法选取云南省文山州人民医院收治的90例老年女性疑似骨质疏松患者,所有患者均采用定量CT增强扫描,并抽取外周血检测血清骨钙素水平,并对定量CT、血清骨钙素以及二者联合检测结果与“金标准”诊断进行对比,分析二者的临床诊断价值。结果“金标准”为世界卫生组织(WHO)制定的骨质疏松诊断标准,T值≤-2.5SD为骨质疏松,90例疑似骨质疏松患者中有74例为骨质疏松患者,16例非骨质疏松患者。CT诊断为阳性60例(66.67%),阴性30例(33.33%),其中“金标准”证实54例为骨质疏松患者,10例为非骨质疏松患者。骨钙素水平诊断为阳性56例(62.22%),阴性34例(37.78%),其中“金标准”证实50例为骨质疏松患者,10例为非骨质疏松患者。CT及血清骨钙素水平联合检测,诊断阳性64例,阴性28例,“金标准”证实58例为骨质疏松患者,22例为非骨质疏松患者。CT和骨钙素联合检测的灵敏度为90.63%,高于CT单独检测的72.97%以及骨钙素单独检测的67.57%,差异均具有统计学意义(χ^2=35.6028,52.6464,P<0.05);联合检测特异度为83.33%,均高于CT、骨钙素单独检测(χ^2=3.8843,3.8843,P<0.05);联合检测的符合率为88.89%,均高于CT、骨钙素单独检测(χ^2=58.1818,81.8182,P<0.05);联合检测的Kappa值为0.783,均高于CT、骨钙素单独检测(χ^2=11.3764,13.5664,P<0.05)。结论定量CT与血清骨钙素水平联合诊断老年女性骨质疏松的灵敏度及特异度均较高,具有较高的可行性,临床诊断价值较高,值得推广应用。

研究堆应急行动水平的定量化

应急行动水平(EAL)是用作应急状态分级的技术准则或参数。参照国外制定应急行动水平的方法 ,笔者在参与制定和审评国内几个研究堆应急计划的过程中认为 ,应尽量将导致反应堆应急状态的初始条件量化为一些相应的仪表读数或报警设定值 ,从而为工作人员迅速识别和确认应急状态等级并采取相应的应急响应行动提供清晰的技术基础。并根据这一原则 ,实现于清华大学核能技术设计研究院核设施应急计划的修改和制定中 。