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HBcAg基因在甲醇型酵母中的表达、产物纯化及其性质的初步研究
1
作者
陈恒
黄亚红
+1 位作者
梁婉琪
张惟杰
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2003年第9期85-90,共6页
为研究乙肝核心抗原蛋白 (HBcAg)在甲醇型酵母 (PichiaPastoris)中的表达和性质 ,用PCR方法将HBcAg基因 (L)克隆到P .Pastoris胞内表达载体pPIC3k中 ,并利用电击和同源重组法 ,将重组质粒pPIC3k L转化感受态的甲醇型GS1 1 5酵母菌株。...
为研究乙肝核心抗原蛋白 (HBcAg)在甲醇型酵母 (PichiaPastoris)中的表达和性质 ,用PCR方法将HBcAg基因 (L)克隆到P .Pastoris胞内表达载体pPIC3k中 ,并利用电击和同源重组法 ,将重组质粒pPIC3k L转化感受态的甲醇型GS1 1 5酵母菌株。经过筛选得到阳性P .Pastoris重组子。重组菌株经甲醇诱导培养 ,表达产物的Western印迹结果表明 ,HBcAg蛋白能在甲醇型酵母(PichiaPastoris)中诱导表达 ,产物为一 2 1 5kDa的蛋白。经蔗糖密度梯度超离心和CsCl密度梯度超离心纯化后 ,ELISA和密度测定结果表明重组HBcAg蛋白主要分布在密度为 1 2 5 76g ml和1 30 1 3g ml的 2个峰值处。电镜观察表明 ,该重组HBcAg蛋白能自主装配成大小不同的 2种颗粒 (即核心颗粒 ) ,大颗粒直径约 34nm左右 ,小颗粒直径约 30nm左右。同时 ,我们还观察到 ,该核心蛋白颗粒在体外可发生集聚现象。
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关键词
乙肝病毒
hbcag基因
甲醇型酵母
表达
产物纯化
核心颗粒
抗原性
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职称材料
题名
HBcAg基因在甲醇型酵母中的表达、产物纯化及其性质的初步研究
1
作者
陈恒
黄亚红
梁婉琪
张惟杰
机构
上海交通大学生命科学技术学院
南京大学生物科学与技术系
上海市农业科学研究院生物技术中心
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2003年第9期85-90,共6页
文摘
为研究乙肝核心抗原蛋白 (HBcAg)在甲醇型酵母 (PichiaPastoris)中的表达和性质 ,用PCR方法将HBcAg基因 (L)克隆到P .Pastoris胞内表达载体pPIC3k中 ,并利用电击和同源重组法 ,将重组质粒pPIC3k L转化感受态的甲醇型GS1 1 5酵母菌株。经过筛选得到阳性P .Pastoris重组子。重组菌株经甲醇诱导培养 ,表达产物的Western印迹结果表明 ,HBcAg蛋白能在甲醇型酵母(PichiaPastoris)中诱导表达 ,产物为一 2 1 5kDa的蛋白。经蔗糖密度梯度超离心和CsCl密度梯度超离心纯化后 ,ELISA和密度测定结果表明重组HBcAg蛋白主要分布在密度为 1 2 5 76g ml和1 30 1 3g ml的 2个峰值处。电镜观察表明 ,该重组HBcAg蛋白能自主装配成大小不同的 2种颗粒 (即核心颗粒 ) ,大颗粒直径约 34nm左右 ,小颗粒直径约 30nm左右。同时 ,我们还观察到 ,该核心蛋白颗粒在体外可发生集聚现象。
关键词
乙肝病毒
hbcag基因
甲醇型酵母
表达
产物纯化
核心颗粒
抗原性
Keywords
hbcag
Pichia pastorisExpressionPurification Core particlesAntigenicity
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBcAg基因在甲醇型酵母中的表达、产物纯化及其性质的初步研究
陈恒
黄亚红
梁婉琪
张惟杰
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
2003
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