乙型肝炎病毒e抗原前体蛋白在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化及其特性的初步研究(英文)

目的 研究仅存在宿主细胞内的HBeAg前体蛋白 (2 5kD)在乙型肝炎发病机制中的作用和QIAGEN表达和纯化系统在HBV研究中的价值。方法 HBV前C/C基因被克隆到表达载体pQE30中 ,HBeAg前体蛋白 (2 5kD)在大肠杆菌中表达后纯化 ,经ELISA和westernblot检测其是否具有成熟HBeAg(17kD)的抗原性。结果 表达载体中的克隆片段经测序后证实为ayw亚型。在T5启动子的调节下可表达 2 5kD的可溶性溶合蛋白 ,合成的HBeAg前体蛋白在与抗HBe反应方面具有与成熟HBeAg(17kD)相同的抗原性。表达的HBeAg前体蛋白经纯化后纯度可达 89 6 %。每升诱导后的菌液可得到HBeAg前体蛋白 2 4mg。结论 HBeAg前体蛋白 (2 5kD)具有与成熟HBeAg相同的反应原性 ,在乙型肝炎的发病机制中可能起着重要作用。