preS2反义寡核苷酸降低肝癌细胞HepG2.2.15的致瘤性

目的 :观察反义寡核苷酸 (as preS2 )对HepG2 .2 .15细胞致瘤的抑制作用。方法 :合成针对preS2翻译起始区反义寡核苷酸 ,以 10 μmol L的终浓度作用于HepG2 .2 .15细胞 ,用FACSCAN流式细胞仪检测细胞凋亡率 ,TRAP银染测定细胞端粒酶活性 ,用ABC免疫化学染色P2 1ras、P6 2 c myc蛋白 ;同时收集上清以RIA法检测血清铁蛋白浓度 ,ELISA法测定HBsAg、HBeAg浓度。体内抑瘤实验以HepG2 .2 .15细胞荷瘤裸鼠进行。结果 :as preS2可显著抑制HBsAg、HBeAg表达 ,抑制率分别为 6 6 %和 91%。as preS2作用 3d后抑制P2 1ras、P6 2 c myc蛋白表达 ,并降低肝癌细胞端粒酶活性 ,同时明显诱导细胞凋亡 (6 .13%vs 1.16 % ,P <0 .0 5 )。as preS2不影响宿主细胞自身血清铁蛋白的分泌。体外在荷HepG2 .2 .15细胞裸鼠中注射as preS2可抑制成瘤率。结论 :as preS2在体内外均能有效抑制HepG2 .2 .15细胞增殖 ,as preS2不仅抑制HBV抗原表达 ,而且明显降低肝癌细胞端粒酶活性 ,诱导肝癌细胞凋亡。