公路工程工地试验室仪器检校结果确认方法

计量检定校准是仪器在使用过程中量值溯源的重要方式之一。仪器设备在检定校准后投入使用之前,试验检测人员或仪器使用者需要对检定校准证书进行符合性确认,通过研究检定校准确认的内容、要求、检定校准证书所涵盖的基础信息,给出了在不同情况下仪器设备检定校准确认的基本方法,并根据例证给出了确认的基本步骤,为公路工程工地试验室仪器设备管理提出了有效方法。

基于随机过程的退化模型确认试验设计

退化模型确认试验是评估退化模型可信度的一种试验。为了得到低成本、高可信度的退化模型确认试验方案,提出了一种基于随机过程的退化模型确认试验设计方法。首先,提出了一种基于随机过程的退化模型确认度量指标,该度量指标采用仿真响应和试验观测数据的概率密度函数在时域内的重合率。其中,试验数据的概率密度采用核密度估计,以减小试验样本不充足时样本数量对确认结果的影响。然后,建立了退化模型确认试验优化设计模型,该优化模型以试验成本为优化目标,确认度量指标为约束,并且同时考虑了试验样本数量、试验观测时刻数量和试验观测时刻分布的影响。随后,提出一种求解该优化模型的协同优化方法。最后,通过复合材料层压板案例验证了提出方法在工程应用中的可行性和有效性。

基于性能确认试验的湿热灭菌工艺开发

为确保湿热灭菌过程和灭菌效果具可靠性、重现性,湿热灭菌器应当经过性能确认。通过对湿热灭菌器进行空载热分布试验、满载热分布试验、热穿透试验以及微生物挑战性试验来确认湿热灭菌器灭菌性能在该试验条件下能够达到预期结果,并提供与灭菌过程和灭菌效果息息相关的灭菌器关键性能参数,继而我们可以基于性能确认试验来开发一系列灭菌工艺,并将其应用到产品的实际灭菌过程中去。

血清HIV抗体筛查阳性与免疫蛋白印迹试验确认的对比观察

探究血清HIV抗体筛查阳性与免疫蛋白印迹试验确认的效果。方法 选择2023年5月到2024年3月我院初步筛查HIV抗体阳性结果的65例患者进行研究,对所有艾滋病患者血清结果进行复检,以免疫蛋白印迹试验确认复检阳性患者的检查结果。结果;本组65例疑似患者,结果 为阳性56例,阴性9例。初筛 化学发光法52(92.86%)、免疫印迹法56例(100.00%),方法 的检测结果差异不显著(P>0.05)。免疫蛋白印迹试验确认HIV-1型抗体阳性56例中,gp160、gp120、gp41、p66、p51、p24条带的出现率分别是100.00%、96.43%.91.07%、94.64%、87.50%、92.86%,以上条带的出现率均高于80%,而p31的出现率为75.00%,p39为60.71%,p55为51.79%,p17最低,为39.29%。结论 血清HIV抗体筛查可能存在假阳性结果,需要以免疫蛋白印迹试验进行确认。

中和确认试验对低水平HBsAg结果的确认及其应用评价

目的应用中和确认试验对低水平乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的结果进行确认,并对确认结果进行综合评价。方法采用微粒子酶免疫荧光法(MEIA)检测乙型肝炎血清学标志物,对从中筛选出的118例低水平HBsAg阳性标本进行中和确认试验,并对确认结果进行评价。结果118例HBsAg低水平阳性(2<S/N<20)标本,经中和确认试验确认阳性111例(94.1%),阴性1例(0.8%),不确定6例(5.1%);受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,当MEIA检测HBsAg的S/N=4.76时,特异性可达100.0%,敏感性为69.4%。结论MEIA对低水平HBsAg检测的敏感性高,特异性好;当HBsAg的S/N≥5时,一般可以排除假阳性的可能,无需进一步做确认试验。

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度（A）值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5-1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0-2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致（χ^2=0.078,P〉0.05）。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。

中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义

目的探讨中和试验在确认HBsAg弱反应性样本中的意义。方法对用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测出的126例HBsAg弱反应性患者的血清标本进行以微粒子酶免疫法（microparticle enzyme immunoassay，MEIA）检测，确认样本是真或假阳性，再进行中和试验分析检测结果。结果在126例HBsAg弱反应性样本中，MEIA确认的阴性为15例，该15例用中和试验法检测也为阴性；而其余的111例用MEIA确认为阳性，它们按ELISA法测得到的S／CO值分类4组：S／CO值在3．1—5．0的48例，中和抑制率为75．5％±12．5％；在2．1—3．0的30例，中和抑制率为80．3％±5．1％；在1．1—2．0的24例，中和抑制率为70．2％±8．7％，这3组样本的中和抑制率都高于50％，均可确认为阳性；S／CO值在0．6—1．1的9例，中和抑制率为50．0％±3．1％，这组样本用中和试验无法确认。结论对于ELISA法的S／CO值〉1．1的弱反应性样本，中和试验可确认其真假阳性，结果与MEIA法完全一致，但S／CO值〈1．1的样本不宜用中和试验确认。

对甘精胰岛素有关物质分析用系统适用性试验的研究

目的:对不同企业甘精胰岛素有关物质分析用系统适用性试验进行研究,发现存在的问题,提示企业完善质量标准,更科学有效地控制产品质量。方法:采用高效液相色谱法及液质联用方法对不同企业有关物质分析用系统适用性试验进行研究评价,发现存在多种问题。结果:部分企业系统适用性溶液中所用的“0A-甘精胰岛素”的结构经LC-MS/MS确认后,发现与理论序列不同,部分企业采用酶切方法制备系统适用性溶液,存在杂质较多、操作步骤复杂、溶液易浑浊等问题。结论:建议企业提高对系统适用性试验的重视程度,加强研究,完善质量标准,科学有效地进行药品质量控制。

甲状腺球蛋白确认试验测定术前血清球蛋白在分化型甲状腺癌颈部淋巴结转移诊断中的临床价值

目的探讨甲状腺球蛋白(Tg)确认试验测定术前血清Tg在分化型甲状腺癌(DTC)患者淋巴结转移诊断中的临床价值。方法收集2020年12月1日—2021年12月1日期间于遵义医科大学附属医院诊断为甲状腺癌431例患者作为研究对象,以病理诊断为金标准分成颈部淋巴结转移组和未转移组,血清样本进行Tg确认试验,得到的术前Tg1,未进行Tg确认试验检测的为术前Tg,通过非参数秩和检验分析两组血清Tg水平的差异,ROC曲线确定诊断DTC淋巴结转移的最佳临界值,分析相关转移危险因素。结果转移组术前Tg1水平和Tg水平高于未转移组,差异有统计学意义(P<0.005)。术前Tg1诊断DTC淋巴结转移的曲线下面积(AUC):0.704(P<0.005),最佳临界值为72.8 ng/mL;术前Tg水平诊断DTC淋巴结转移的曲线下面积0.691(P<0.005),最佳临界值为13.37 ng/mL。术前Tg、肿瘤最大直径是DTC患者发生淋巴结转移的危险因素。结论本研究中Tg确认试验检测的术前Tg1水平﹥72.8 ng/mL和Tg水平﹥13.37 ng/mL是诊断DTC淋巴结转的最佳临界值;Tg1确认试验在血清甲状腺球蛋白抗体(TgAb)阳性患者中的诊断价值明显优于Tg;血清Tg水平的最佳临界值结合肿瘤最大直径≥1cm是判断DTC发生淋巴结转移的重要依据。

自然环境试验元数据体系研究

目的形成自然环境试验元数据体系,为数据资源提供完备的描述及合理的规则规范,为数据库设计开发、数据挖掘分析、数据共建共享等提供支持。方法针对自然环境试验专业特点、数据类型以及应用需求,借鉴其他领域的元数据标准规范,梳理分析自然环境试验涉及的数据特征元素集合,划分自然环境试验元数据类别,评估元数据作用,形成自然环境试验元数据体系。结果形成了覆盖数据集描述信息、要素参数信息、数据质量信息、维护信息、限制信息、数据集分发信息、元数据参考信息、数据应用成果信息共8个类别的自然环境试验元数据体系。结论自然环境试验元数据具有资源描述、数据选择、信息检索、管理溯源、解释分析、储存入库等作用,为数据有效管理和共建共享提供了基础。本文提出的元数据体系为自然环境试验元数据标准提供了参考思路。

献血者HCV筛查及确认试验结果分析

目的通过分析青岛地区献血者丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)筛查及确认试验结果,了解献血者中HCV流行情况及感染状态,评估现有试剂检测水平,为血液筛查策略的选择提供参考。方法选取2019年1—12月青岛地区献血者标本119602人例进行抗-HCV检测,统计分析两遍抗-HCV血液筛查结果,并留取抗-HCV不合格标本,用双抗原夹心法试剂进行抗-HCV检测作为补充试验,可疑标本再进行确认试验:包括重组免疫印迹试验(recombinant strip immunoblot assay,RIBA)和核酸检测(nucleic acid amplification test,NAT)。结果61例抗-HCV筛查不合格标本中,双试剂反应性有15例,夹心法补充试验检测上述15例标本全部为反应性,RIBA确认试验阳性14例,阴性1例;核酸检测阳性9例,阴性6例(其中5例RIBA结果阳性)。而血液初筛单试剂反应性标本46例,夹心法试剂仅2例为反应性,经核酸检测全部阴性;RIBA确认试验不确定7例,阴性39例。结论现阶段血液核酸检测不能完全替代血清学检测,夹心法抗-HCV血筛试剂灵敏度可靠,并且假阳性率较低。

国家动物布病参考实验室评估确认:动物布病疫苗安全可靠 能有效防控牛羊布病

近期,中国兽医药品监察所国家动物布病参考实验室,对我国现有动物布病疫苗进行了安全性和有效性评价。评价结果显示,我国现有动物布病疫苗安全可靠,规范使用布病疫苗能有效防控牛羊布病。国家动物布病参考实验室对我国已上市和正在注册申报的所有布病活疫苗生产用菌种,进行了豚鼠、小鼠安全试验等实验室安全性评价;对A19株和S2株布病活疫苗,在牛羊养殖场开展了田间安全性和有效性评价。

电化学发光法进行HBsAg阳性确认的可行性及应用研究

目的评估电化学发光法HBsAg检测用于献血者HBsAg阳性确认的可行性,探索HBsAg ELISA的灰区设定条件和HBsAg阳性确认的替代方法,简化献血者归队的判定流程。方法以HBsAg电化学发光检测(Electrochemiluminescence assay,ECL)作为血液HBsAg常规筛查ELISA反应性的补充试验,并对HBsAg ECL反应性的标本进行中和试验(ECL)确证。联合核酸检测(Nucleic acid test,NAT)、ECL、ELISA检测技术以及献血者的跟踪检测进行HBsAg的阳性确认。比较电化学发光中和试验和HBsAg ECL对HBsAg ELISA双试剂反应性(S/CO≥1)中的HBV DNA阳性的检出能力;比较不同检测流程在补充HBsAg ECL检测前后以及不同灰区界值的设定对HBsAg确认阳性检出的效果影响,以敏感度(Sensitivity,SEN)和阳性预期值(Positive Predictive Value,PPV)表示;比较ELISA假反应性与确认阳性检出时S/CO值的分布差异。结果 2013年1月1日-2015年6月30日间,在本中心采集的192065份血液标本中检出HBsAg反应性821份,其中通过联合检测和献血者的跟踪检测估算出HBsAg确认阳性有160份。ECL对HBsAg ELISA双试剂反应性(S/CO≥1)标本的核酸检出显著高于电化学中和试验(P<0.05);以HBsAg ECL作为HBsAg反应性的补充试验能够将各筛查流程的HBsAg确认阳性检出的PPV提高至92.6%-99.2%(P=0);2种HBsAg ELISA试剂各自假反应性与确认阳性检出时S/CO值的分布存在着明显的差异,S/CO≤2可作为假反应性的简化判定标准;随着灰区界值的降低,2种ELISA试剂对HBsAg确认阳性检出的SEN和PPV变化均存在1个平台区,S/CO≤1时ELISA1的此2个指标即处于其平台区,ELISA2则为S/CO≤0.8。结论 HBsAg ECL能够作为血液HBsAg筛查的阳性确认试验。以该方法得到的HBsAg阳性确认数据为依据可以简化ELISA假反应性献血者归队的判定流程、合理地设定灰区。本研究采用的2种ELISA检测试剂其假反应性献血者的判定标准均可设定为S/CO≤2.0;ELISA1不宜设置灰区,ELISA2的灰区界值宜设为S/CO=0.8。

Elecsys HBsAg确证试验在灰区及弱反应性标本检测中的应用

目的探讨ElecsysHBsAg确证试验在ELISA定性试验和ECLIA定量试验临界灰区及弱反应性标本检测中的临床应用价值。方法所有被检测血清标本均来自门诊和住院患者，对其中145例ELISA法检出的灰区及弱反应性标本分别进行E1ecsysHBsAg定量试验及确证试验，并对结果进行了比较分析。结果血清HBsAg经EUSA法检测OD／CUTOFF结果在0．85～O．99之间标本共35例，其中1例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占2．9％（1／35）；OD／CUTOFF结果在1．0～1．99弱反应性标本共54例，ElecsysHBsAg定量试验有反应性14例，占25．9％（14／54），ElecsysHBsAg确证试验阳性18例占33．3％（18／54）；OD／CUTOFF结果在2．0～4．99共31例，有17例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占54．8％（17／31）；OD／CUTOFF结果在5．O～7．99共25例，有21例ElecsysHBsAg定量及确证试验阳性占84．0％（21／25）。通过对EuSA法与ECLIA法、ELISA法与ElecsysHBsAg确证试验检测HBsAg结果比较差异具有统计学意义（P〈O．01）。结论ELISA法检测HBsAg灰区及较低含量的弱反应性标本、可疑或乙肝感染模式不常见的标本需再次用敏感性更高的ECLIA等方法复检以防假阴性或假阳性出现，有条件的实验室可用Elect；ysHBsAg确证试验进一步确认。

对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究

目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法（MEIA）检测的HBsAg结果（S/CO）在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒（HBV）酶联免疫吸附试验（ELISA）,对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例（82.9%）,ELISA检测阳性47例（42.3%）,2项试验检测结果间差异有统计学意义（P=0.033）。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。

乙型肝炎病毒表面抗原确认试验方法的建立

目的建立适用于国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂测定为乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性样本的确认试验方法。方法以特异性抗-HBs中和样本中的HBsAg并设立加对照液的对照孔,然后按常规方法检测样本中HBsAg含量(吸光度表示),按公式求得加抗-HBs孔的抑制率,如抑制率≥50%即表示该样本被确认为HBsAg阳性。结果确定以混合抗-HBs阳性人血清为特异性中和抗体,选定确认试验常规操作步骤。对109份HBsAg阳性样本用确认试剂进行测定,结果均被确认。对4份乙型肝炎5项血清标志阴性的样本进行确认试验,结果均为HBsAg阴性。对17份HBsAg阳性血清用本法与Murex HBsAg确认试剂作比对试验,二者结果一致,17份HBsAg阳性者均被确认。结论本研究建立的HBsAg确认试验方法和试剂适用于对HBsAg阳性样本进行确认,填补国内确认试剂缺如的空白。经进一步临床试验后,值得推广应用。

ELISA法检测HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认结果分析

目的探讨ELISA法检测HBsAg结果判定灰区设置的必要性,以及中和试验对HBsAg灰区和单试剂反应性样本的确认情况。方法采用两个不同厂家生产的ELISA HBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,对检测结果在0.7≤S/CO〈1或单试剂为反应性的标本,再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1孔结果仍在灰区内或仍为反应性,留取标本做HBsAg中和试验确证。结果 136例灰区标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本10例,阳性率为7.35%,结果异常标本14例;159例单试剂反应性标本中HBsAg中和试验检测出阳性标本19例,阳性率为11.95%,结果异常标本16例。灰区与单试剂反应性样本阳性率的差异没有统计学意义;S/CO值在0.70～0.79区间、0.80～0.89区间、0.90～0.99区间的阳性率有逐渐升高的趋势,但差异无显著性;双试剂灰区的阳性率高于单试剂灰区的阳性率,但差异无统计学意义。结论对HBsAg灰区和单试剂反应性标本,ELISA检测漏检率较高,应结合自己实验室实际设置合适的灰区,最大限度地检出这些可疑标本,并进行确认实验,进一步减少HBsAg漏检和误检率,以提高输血安全,同时避免血源的浪费。

核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认

目的对单个标本核酸检测呈初始反应性（Initial reactive,IR）但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性（NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR）,且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus（盖立复）进行单个标本核酸检测（Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT）。应用超高速离心技术（25 0000 g×3 h）与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较。NAT NRR标本补充电化学发光法（ECL,罗氏）的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测。结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NAT NRR标本85份（0. 11%）,其中有79份标本进行了确认试验。超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份。配对比较显示超离体系明显优于推荐流程（McNemar test,P〈0. 05）：有48份（60. 7%）标本至少被1种流程确认,其中27份（34. 2%）标本同时被2种流程确认,16份（20. 2%）标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份（6. 3%）标本被推荐流程确认。HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc＋（92%和80%）和抗-HBs＋（42%和55%）的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布（中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL）明显低于未确认组（P〈0. 05）。在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染（Occult Hepatitis B virus infection,OBI）献血者45位（94%）、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染。结论加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60%的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBV DNA。NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感染献血者的排除; HBV DNA低水平感染构成了血液安全的潜在风险,对NAT NRR献血者进行屏蔽是防范此类风险的合理措施。

中和确认试验在电化学发光免疫法检测乙型肝炎表面抗原弱反应性中的价值探讨

目的对电化学发光免疫法(ECLIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱反应性的标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。方法筛选ECLIA检测HBsAg弱反应性(COI值在1.00～50.00之间)的100例标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。结果 100例HBsAg弱反应性标本经确认试验确认阳性87例(87.0%),阴性10例(10.0%),不确定3例(3.0%)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,当ECLIA检测HBsAg的COI值为1.97时,特异性可达100.0%,敏感性为83.9%。结论中和确认试验可作为HBsAg弱反应性标本进一步确认的手段;ECLIA对弱反应性HBsAg检测敏感性高,特异性好;当ECLIA检测HBsAg的COI值>2.00时,一般可以排除假阳性的可能,无需进一步做确认试验。