肝康健2号对部分应答慢性乙型肝炎患者HBsAg及调节性T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨肝康健2号对经恩替卡韦治疗后获得部分应答的慢性乙型肝炎患者HBsAg及调节性T淋巴细胞亚群的影响。方法将2020年5月—2022年10月在广州中医药大学顺德医院就诊的60例经恩替卡韦治疗获得部分应答的慢性乙型肝炎患者随机分为观察组和对照组各30例,对照组继续予以恩替卡韦治疗,观察组予以恩替卡韦联合肝康健2号治疗,2组疗程均为48周。观察2组患者治疗前后HBsAg定量、T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)及CD4^(+)/CD8^(+))、乙肝病毒载量、中医证候积分的变化及治疗安全性。结果治疗后,观察组HBsAg定量明显低于治疗前及对照组(P均<0.05),CD4^(+)明显高于治疗前及对照组(P均<0.05),对照组治疗后HBsAg定量及CD4^(+)与治疗前比较差异均无统计学意义(P均>0.05);治疗后2组CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)与治疗前比较变化均不明显,差异均无统计学意义(P均>0.05);2组的乙肝病毒载量、肝功能治疗前后均正常。结论肝康健2号联合恩替卡韦治疗部分应答的慢性乙型肝炎患者,能够有效降低HBsAg,上调CD4^(+),有望通过调节免疫平衡来获得临床治愈。

核苷(酸)类似物联合Peg-IFNα-2b治疗HBsAg低表达型慢性乙型肝炎临床效果

目的探讨核苷(酸)类似物(NAs)联合聚乙二醇干扰素α-2b(Peg-IFNα-2b)应用于乙肝病毒表面抗原(HBs Ag)低表达型慢性乙型肝炎(CHB)的临床效果。方法选取2020年1月~2023年5月期间于我院接受NAs治疗,HBs Ag≤1500IU/mL的CHB患者70例为研究对象,按照随机数表法将其分为对照组与观察组。对照组(n=35)接受NAs治疗,观察组(n=35)给予NAs联合Peg-IFNα-2b治疗。两组均持续治疗48周,期间观察组脱落2例,对照组脱落3例。对比两组血清学相关指标变化情况、HBsAg变化情况、肝功能水平以及肝脏纤维化情况。结果治疗24、48周后,观察组血清抗-HBs阳转率、HBsAg清除率均较对照组高(P<0.05),HBsAg水平较对照组低(P<0.05);治疗48周后,两组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平均较治疗前降低,但观察组水平较对照组水平高(P<0.05);观察组血清层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)水平低于对照组(P<0.05)。结论NAs与Peg-IFNα-2b联合治疗可以有效转变患者的血清学相关指标,降低HBsAg水平,改善肝纤维化。

2种消毒剂对HBsAg、HBV DNA灭活效果的试验观察

[目的]对复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛破坏HBsAg及HBVDNA的效果进行对比观察。[方法]采用悬液定量法进行试验。[结果]在19℃～21℃,以含有效季铵盐成分5000mg/L该消毒剂水溶液对HBsAg悬液作用30min,6000mg/L时作用20min,10000mg/L时作用10min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性;以含有效季铵盐成分5000mg/L该消毒剂水溶液对含HBVDNA的血清作用30min,含有效季铵盐成分6000mg/L、10000mg/L分别作用10min,对HBVDNA的杀灭率达99.9%。2%强化戊二醛与HBsAg悬液作用10min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性,与含HBVDNA的血清作用10min,对HBVDNA的杀灭率达99.9%。[结论]复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛均可将HBsAg及HBVDNA破坏,在消毒实践中可选择使用。

复方六月雪对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的:观察复方六月雪(CLYX)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测CLYX对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在TC0基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定上清液HBsAg和HBeAg的滴度。结果:TC50为3.070g·L-1,TC0为0.945g·L-1,复方六月雪对HepG2.2.15细胞毒性较低。无毒浓度的复方六月雪在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBsAg(乙型肝炎表面抗原)和HBeAg(乙型肝炎E抗原)的分泌;且治疗指数(TI)均大于2,为高效低毒的抗HBV药物。结论:CLYX在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。

青钱柳提取物对HepG2 2.2.15细胞HBsAg和HBeAg表达的影响

目的研究青钱柳提取物体外抗乙肝病毒作用。方法青钱柳用75%乙醇提取后按溶剂极性萃取,获得的三氯甲烷部位经柱层析得到Fr.2组分。体外培养HepG2 2.2.15细胞,MTT法检测青钱柳提取物Fr.2组分对HepG22.2.15细胞的细胞毒作用,用ELISA法检测HepG2 2.2.15细胞培养液中HBsAg和HBeAg的表达。结果青钱柳提取物Fr.2组分对HepG2 2.2.15细胞无明显的细胞毒作用。与对照组比较,Fr.2组分对HBsAg和HBeAg的表达均有显著性抑制作用(P<0.01或0.05)。结论青钱柳提取物体外具有较强的抗乙肝病毒作用。

新加达原饮对HepG2.2.15细胞表达HBsAg、HBeAg的影响

目的观察新加达原饮(IXJDY)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法采用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测IXJDY对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0);在TC0基础上观察不同浓度药物作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72小时和144小时收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定上清液Hb-sAg和HbeAg的滴度。结果 TC50=14.22mg.ml-1,TC0=8.13 mg.ml-1,新加达原饮对HepG2.2.15细胞毒性较低。无毒浓度的新加达原饮在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制HBsAg和HBeAg的分泌(P<0.05,P<0.01);且呈现量效和时效关系。结论 IXJDY在体外有显著的抗HBV的作用,且毒性较低。

槐果碱体外对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg HBeAg的影响

目的:探讨槐果碱的体外抗乙型肝炎病毒作用。方法:采用HepG2.2.15细胞模型进行体外培养,给予不同浓度槐果碱,以拉米夫定作阳性对照,作用9天后检测上清液中HBsAg、HBeAg的分泌,观察药物对HepG2.2.15细胞分泌HBV病毒抗原的影响,同时以MTT法检测药物在体外对HepG2.2.15细胞的生长抑制作用,从而评价药物的抗HBV作用。结果:药物作用9天后,槐果碱对HepG2.2.15细胞的50%生长抑制率(TC50)为0.002M,对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的50%抑制率(IC50)为4.9uM,其治疗指数(TI=TC50/IC50)为408.16;而拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%。槐果碱对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率在所选浓度范围内均低于50%,但明显优于拉米夫定对HepG2.2.15细胞分泌HBeAg的抑制率。结论:槐果碱在体外具有显著的抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的作用,是一个高效低毒的抗乙肝病毒的有效药物。

聚乙二醇干扰素-α-2a治疗血清低水平HBsAg阳性的慢性乙型肝炎患者临床结局预测研究

目的分析聚乙二醇干扰素-α-2a(Peg-IFNα-2a)治疗低水平HBs Ag阳性的慢性乙型肝炎(CHB)患者的临床结局及其血清HBs Ag水平对疗效的预测价值。方法 2014年4月~2016年4月我院就诊的低水平HBs Ag阳性的CHB患者80例,采用随机数字表法将其分成两组,每组40例。患者入组前经核苷(酸)类似物(NAs)治疗获得病毒学应答。给予对照组恩替卡韦治疗,观察组接受恩替卡韦和Peg-IFNα-2a联合治疗48 w。采用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)评估基线HBs Ag水平预测HBs Ag清除的效能。结果在治疗48 w末,观察组血清HBs Ag和HBV DNA水平分别为(1.5±0.3)lg U/ml和(0.1±0.1)lg U/ml,显著低于对照组的(2.0±0.2)lg U/ml和(1.3±0.3)lg U/ml(P<0.05),观察组HBs Ag清除率和HBV DNA转阴率分别为32.5%和92.5%,显著高于对照组的6.3%和55.0%(P<0.05);基线HBs Ag水平是HBs Ag清除的独立相关因素(OR:0.337,95%CI:0.026~0.652,P<0.05);经ROC曲线分析,以基线HBs Ag水平等于2.0 lg U/m L为截断点,基线HBs Ag水平预测治疗48 w血清HBs Ag清除的AUC为0.77,敏感度为0.85,特异度为0.68,阳性预测值为67.2%,阴性预测值为85.3%,正确性为72.5%。结论应用peg-IFN-α-2a治疗已经NAs治疗获得低水平HBs Ag阳性的CHB患者可进一步提高临床疗效,且基线HBs Ag水平能预测治疗结束时血清HBs Ag清除情况。

干扰素α-2b对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响

目的:探讨干扰素α-2b(IFN α-2b)对HepG 2.2.15细胞增殖、凋亡及HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:应用SRB法检测IFNα-2b作用3、6d后对HepG 2.2.15细胞增殖的影响,ELISA法检测IFN α-2b对HBsAg与HBeAg表达的影响。Hochest 33342、PI双染观察细胞凋亡情况。结果:IFN α-2b作用3、6d后细胞增殖均有所抑制,3d后上清中HBsAg、HBeAg表达就受到抑制,并呈剂量依赖性,6d后HBsAg表达明显受抑,而HBeAg表达与3d后的结果相似。Hochest33342、PI双染显示IFNα-2b可引起细胞凋亡,随药物浓度增加,凋亡细胞也逐渐增加,并且有少量细胞开始死亡。结论:IFNα-2b体外可抑制HBsAg、HBeAg表达,且对细胞增殖也有所抑制,并可引起细胞的凋亡和死亡。

乙醛脱氢酶2与饮酒和HBsAg致肝癌交互作用

目的 研究乙醛脱氢酶 - 2 (ALDH2 )基因多态性与饮酒习惯和HBsAg致肝癌的交互作用。 方法 选择88例新发肝癌病人按性别、年龄和居住地进行 1∶1配对流行病学调查。病例和对照均采集静脉血 ,用PCR -RFLP法检测研究对象的ALDH2基因型 ,用ELISA法检测血中乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)。 结果 病例组 ( 3 6 40 % )与对照组 ( 3 5 2 2 % )ALDH2变异基因型 (G/L +L/L)的分布频率无显著性差异 ;但HBsAg阳性率病例组 ( 72 73 % )显著高于对照组 ( 2 2 73 % ) ;大量饮酒、HBsAg阳性与ALDH变异基因型的交互作用指数分别为 0 83 2 0和 0 663 4。 结论 乙醛脱氢酶 2变异基因型与大量饮酒和HBsAg阳性致肝癌发生有显著的交互作用。

抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2融合蛋白的构建与序列测定

目的:构建以人抗乙肝表面抗原（HBsAg）单链抗体（ScFv）为导向作用,白细胞介素-2（IL-2）为治疗作用的融合蛋白原核表达载体pQE 40/ScFv-IL-2。方法:应用PCR技术将抗HBsAg单链抗体与白细胞介素-2在分子水平上进行基因重组,构建中间载体pGEM7Zf（+）/ScFv-IL-2,经酶切鉴定及序列测定正确后,将目的基因片段克隆到pQE 40表达载体中,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。结果:SDS-PAGE结果显示在相对分子质量约4.3×104Da处,可见蛋白表达带。以鼠抗人IL-2单克隆抗体经免疫印迹验证,该表达蛋白为所设计的融合蛋白。结论:融合蛋白ScFv-IL-2的成功构建及表达,为融合蛋白的纯化和研究开发新型的乙肝导向治疗的基因工程药物打下良好的基础。

HBsAg和B19VP2复合抗原的基因克隆及在大肠杆菌中的表达

目的:构建乙肝表面抗原(HBsAg)人微小病毒B19VP2蛋白的原核高效表达系统。方法:用PCR扩增HBsAg基因及B19病毒VP2基因,分别与pGEMT重组,构建出pGEMTHBs及pGEMTVP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEMTHBs中的HBs基因克隆入pGEX-5-X-1表达载体中,得到pGEX-5X-1-HBs;再将pGEMTVP2中的VP2基因克隆入pGEX5X1HBs中,得到pGEX5-X-1-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定。结果:pGEX5X1HBsVP2可在大肠杆菌BL21中高效表达,表达产物经Western-blot鉴定具有HBsAg及B19VP2的双重抗原性。结论:成功构建pGEX5X1HBsVP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为HBV和B19病毒重组多价疫苗的研究奠定了基础。

水芹提取物对HBV-DNA克隆转染2215人肝细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的 观察水芹提取物在乙型肝炎病毒 (HBV)基因转染的人肝癌细胞系 2 2 15细胞培养中 ,对细胞的毒性及其分泌的表面抗原 (HBsAg)和e抗原 (HBeAg)的抑制作用。方法 (1)药物对细胞的毒性实验 ,在接种 2 2 15细胞后 2 4h ,加 2倍稀释的 6个稀释度药液 12 .0 0、8.0 0、4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-1,4d换一次药液 ,维持 12d ,用显微镜观察细胞病变 ;(2 )药效学实验 ,在无毒浓度 (4.0 0mg·ml-1)下 ,以 2倍稀释药液稀释为 4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-14个浓度 ,37℃ 5 %CO2 培养 ,每 4d收取培养液 ,换原浓度药液培养 ,并于第 12d时收集培养液 ,同时测定HBsAg和HBeAg。结果 (1)细胞毒实验结果表明 ,水芹提取物对细胞的半数细胞毒浓度 (TC50 )为 8.6 6 2± 0 .2 9mg·ml-1,最大无毒浓度 (TC0 )为 4.0 0mg·ml-1。 (2 )药效学试验 ,在最大无毒浓度4.0 0mg·ml-1对细胞分泌的HBsAg抑制率为 (6 9.1± 6 .6 ) % ,半数有效剂量 (IC50 )为 2 .15mg·ml-1;对细胞分泌的HBeAg的抑制率为 (78.9± 1.2 ) % ,IC50 为 1.0 4mg·ml-1。与细胞对照组比较均有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 水芹提取物在 2 2 15细胞中培养 12d ,无毒浓度对 2 2

HBsAg核酸疫苗诱导H—2^b小鼠体液免疫应答的初步研究

目的 :观察 adw和 adr亚型 HBV Pre S2 +S核酸疫苗单一或联合 HBc Ag核酸疫苗诱导的小鼠体液免疫反应。方法 :C5 7BL / 6小鼠 2 3只随机分为 4组 :p JW430 3组 (P组 )、p JW430 3/ S2 +S(adw亚型 )组 (W组 )、p JW430 3/ S2 +S(adr亚型 )组 (R组 )、p JW430 3/ S2 +S(adr) +p JW430 3/ HBc组 (R+C组 )。免疫方法为每只小鼠每次肌注相应质粒 DNA10 0 μg(10 0 μl)。免疫程序为 0、2、4周。于第 0、2、4、6、8周采集小鼠血清 ,用 EL ISA法检测血清抗 - HBs和抗 - HBc。结果 :于第 3次免疫后 4周 W组、R组、R+C组小鼠血清全部检出抗 - HBs,抗体含量随免疫次数增多而增加 ,抗 - HBs浓度最高达 2 2 32 9IU / L ,与 P组 (对照质粒组 )相比差异有显著性 (P<0 .0 1) ,但各核酸疫苗组之间差异无显著性 (P>0 .5 )。抗 - HBc在第 1次免疫后 2周即在 R+C组全部出现 ,抗 - HBs和抗 - HBc在 P组始终未检出。结论 :adw和 adr亚型 HBV Pre S2 +S核酸疫苗和 HBc核酸疫苗能诱导 H- 2 b小鼠产生较强的体液免疫反应 ,联合 HBc核酸疫苗有助于抗 -

聚乙二醇化干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎发生HBsAg转阴的相关因素探讨

目的探讨聚乙二醇化干扰素α-2a治疗慢性乙型肝炎发生HBsAg转阴患者的临床及实验室指标特点,探索影响HBsAg转阴的相关因素。方法收集4年时间我院所有确诊的经聚乙二醇化干扰素α-2a治疗的慢性乙型肝炎患者共61例,建立病史资料库,并按人口学特征、患病情况、实验室指标、病毒学指标、免疫状态及相关影响因素等多项指标分别进行统计学处理。结果61例经聚乙二醇化干扰素α-2a治疗的慢性乙型肝炎患者中,HBsAg转阴患者5例,56例未发现HBsAg转阴。通过多因素Logistic回归分析得出:病毒基因型、年龄、病程、HBV DNA水平成为最有可能的相关影响因素。结论聚乙二醇化干扰素α-2a的抗病毒治疗能够使HBsAg转阴;治疗前根据相关因素进行疗效评估有一定的参考意义。

表达HBeAg和HBsAg对HepG_2细胞系细胞因子分泌及ACE活性的影响

目的:观察HBeAg和HBsAg对人肝癌细胞系 HepG2细胞中血管紧张素转化酶(ACE)分泌的影响．方法:利用本所既往构建的表达乙肝病毒 (HBV)表面抗原和E抗原的真核表达载体 pcDNA3．1(-)-HBsAg、pcDNA3．1(-)-HBeAg 及空载体pcDNA3．1(-)转染HepG2细胞,观察转染24,48 h后细胞上清中ACE活性和炎性细胞因子IL-6、IL-8的变化．培养细胞上清液内 ACE活性采用底物裂解法检测;IL-6、IL-8浓度采用流式细胞仪检测．结果:转染48 h的HepG2细胞裂解液中检测到了HBsAg和HBeAg的表达,但二者细胞上清中的ACE与转染空载体对照pcDNA3．1(-)细胞上清中的ACE无显著差异;同样,炎性因子 IL-6和IL-8也没有显著差异．结论:HBV HBsAg和HBeAg对ACE活性、 IL-6和IL-8不具有显著的上调或下调作用; HBsAg和HBeAg在肝纤维化发生过程中的作用机制尚待进一步阐明．

慢性无症状HBsAg携带者血清中游离白细胞介素2受体(FIL_2R)测定

应用放射免疫分析法分别测定HBeAg(+)、HBsAg(+)慢性无症状携带者和单纯HBsAg(+)携带者血清中FIL2R,结果:两者血清中FIL_2R均明显高于抗-HBs(+)及抗-HBs(-)的健康人(P<0.01);而健康人血清中FIL_2R含量无显著差异,(P>0.05)。

非活动性HBsAg携带者接受PEG-IFNα-2a±阿德福韦酯治疗可获得较高HBsAg清除率

【据《Hepatology》2017年4月报道】题：非活动性HBsAg携带者接受PEG-IFNα-2a±阿德福韦酯治疗可获得较高HBsAg清除率（作者Chen XY等）。HBsAg清除代表＂临床治愈＂,但发生率极低。本文评价了PEG-IFNα-2a±阿德福韦酯（ADV）治疗非活动性HBsAg携带者（IHC）的有效性。

聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎获得HBsAg血清学转换1例

患者,男性,53岁,患慢性乙型肝炎（CHB）29年,乙型肝炎血清标记物HBeAg（-）,曾因反复肝功能异常10余次,先后使用保肝降酶等中西药物治疗,效果不明显。近两年来持续肝功能异常,ALT在80～118 U/L波动,经保肝降酶治疗无效。诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎。既往无抗病毒治疗史。治疗前ALT 85 IU/L,AST 76 IU/L,TBil 12μmol/L,

MF-2消毒剂破坏HBsAg测试分析

目的 :检测分析MF - 2消毒剂的水和醇溶液破坏HBsAg作用 ,为饮水及临床应用提供依据。 方法 :应用RIA法制备HBsAg标准曲线 ,测定水溶液对HBsAg标准液 ( 5 0ng/ml)的灭活率。应用SPRIA法测定CPM值 ,检验醇溶液对乙肝病人血清 (HBsAgS/N值 76 6)的破坏。 结果 :0 0 8%水溶液与HBsAg作用 10min和3 0min ,灭活率为 63 %和 66%。 0 5 %的醇溶液 ( 75 % )对 1∶10乙肝病人血清作用 15min ,其S/N比值全部小于2 1。结论 :不同浓度的水溶液对HBsAg有一定破坏作用 。