一种基于表面增强拉曼光谱技术的环境水中啶虫脒现场快速检测试剂盒

啶虫脒(acetamiprid,AC)在环境中的蓄积可对生态系统和人体健康产生不利影响。本研究利用表面增强拉曼光谱(Surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)技术,构建了一种快速定性及定量检测环境水中啶虫脒的检测试剂盒。采用化学合成法制备了粒径为40~60 nm的纳米金溶胶作为SERS活性基底,以包覆铝箔的24孔板为反应平台,将一定量的聚沉盐负载到反应孔中诱导信号热点,并与便携式拉曼光谱仪集成为适用于现场检测的试剂盒。通过对聚沉盐负载量、聚沉时间等条件进行优化,在浓度为25~750 ng·mL^(-1)范围内,啶虫脒浓度与SERS信号强度呈现良好的线性关系,R2=0.988。试剂盒检出限低至15.56 ng·mL^(-1),平均加标回收率为90.04%~106.10%,在5 min内实现了环境水中啶虫脒的现场检测。与传统方法相比,该试剂盒便携、操作简单、快速、成本低廉、可同时进行多样本检测,为环境水体中啶虫脒的现场检测分析提供了新选择。

丙型肝炎病毒抗体快速检测试剂国家参考品的研制

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)为单股正链RNA病毒,主要通过血源性传播,呈全球性流行趋势,不同性别、种族及年龄对HCV均易感[1]。有数据显示,目前全球患有丙型肝炎的人数为1.85亿,我国人群的感染率为3.2%[2]。丙型肝炎发病隐匿,慢性化程度高,可导致肝硬化甚至肝癌[3-4]。

HBsAg金标快速试剂检测漏检原因分析

目的探讨采用HBsAg金标快速试剂筛查献血者的意义以及分析初筛漏检原因。方法采用HB-sAg金标快速试剂对捐血前献血者进行初筛,ELISA法对捐献血液进行复检,初筛阴性而ELISA法检测阳性标本用金标快速试剂复试。结果23195例自愿无偿献血者中,ELISA检测HBsAg阳性率为7.5%,其中初筛阳性率为6.4%;21711例初筛阴性献血者中,ELISA试剂复检阳性率为1.15%(249/21711),初筛漏检率为1.07%(249/23195),其中初筛试剂因素漏检率为0.95%(220/23195);人为因素失误漏检29例,占11.6%(29/249)。结论初筛操作者应严格按照金标快速法试剂的操作要求进行操作,对进一步提高金标快速法试剂的灵敏性,减少血液的浪费,降低输血传播疾病的风险,确保输血安全具有重要意义。

用于黄曲霉毒素B_(1)快速检测的胶体金试剂盒质量评价

为评估黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))胶体金快速检测试剂盒性能,对6个胶体金快速检测试剂盒生产厂家的产品进行质量评价。以大豆油为基质,通过人为加入标准物质的方法制备盲样,对6个生产厂家的试剂盒组成、前处理过程、显色情况、性能指标、检测时间等进行评价,并将其用于国家及河南省抽检食用油样品的检测。结果表明,6个生产厂家的试剂盒组成完整,前处理快速,易操作,检测时间短(均在25 min以内),但合格率仅50%,有3个生产厂家的试剂盒因较高的假阴性率而不达标。由此可知,质量优良的快速检测试剂盒能很好地满足实际样品检测需求,但目前市场上的快速检测试剂盒整体质量还有待提升,生产企业应严格按照国家相关标准进行研发和生产,同时国家相关部门要继续完善评价体系,加强监管。

立可读EIA(TMB-快速法)检测HBsAg试剂盒的重复性质量分析

为了解上海科华生物技术有限公司出品的立可读ＥＩＡ（ＴＭＢ－快速法）检测ＨＢｓＡｇ试剂盒的重复性质量情况，本文就１９９７年３月～１９９８年５月连续使用该公司试剂盒，对３１３２２份血清标本中初检阳性的２２０３份血清标本都进行复检；初检阴性的血清标本随机抽样了８４３份进行复检，结果阳性一致率为８９．５％（８８．２％～９０．８％），阴性一致为９９．９％（９９．６％～１００．０％），Ｋａｐｐａ＝０．８２３８，可认为该试盒重现性较好。

生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究

研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40～50μg／mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,其CPM值下降最快,然后下降速度不断减缓;反应的最适温度为24℃-25℃;而体系的最佳pH为7．2—7．4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h,可以保持86％的活力,在25℃时保温1h,活力下降较少,随时间的增加,活力逐渐下降,到6．5h时,仅剩53．5％的活力,而在33℃时,随着保温时间的延长,酶活力下降较快,保温1．5h,活力剩下59．1％,因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都会抑制ATP发光反应,当NaCl浓度达到1．5g／L时,即可以抑制52．5％的发光,TritonX- 100及酸、碱对系统均有一定的影响,CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。

松材线虫快速检测试剂盒研制

采用引物对K09F2/R对枯死松树内分离的松材线虫、拟松材线虫及其他线虫进行检测,结果表明,所有松材线虫株系均扩增出一条340bp的清晰、明亮的条带。而拟松材线虫、其他线虫均无扩增产物。利用引物对K09F2/R构建了松材线虫检测试剂盒。采用该试剂盒可使整个检测过程不超过2.5h;该试剂盒检测灵敏度为1/7条线虫,达到了对幼虫成功鉴定的目的,且检测结果便于判读,检测费用较低。

沙拉沙星ELISA快速检测试剂盒的研制及性能鉴定

利用已制备的高亲和力的抗沙拉沙星的单克隆抗体,研制沙拉沙星快速检测试剂盒,并对其性能进行鉴定。结果显示:研制的沙拉沙星试剂盒的标准曲线呈S型,符合4参数logit曲线拟合,相关线性方程为y=-0.384 8x+0.736 3,R2=0.990 1,IC50为4.11 ng/m L,LOD为2.06 ng/m L。与其他药物的交叉反应率(CR%)均低于1%;鸡肝和鸡肉中添加平均回收率分别为85.3%和88.7%,且变异系数均小于15%;试剂盒在4℃条件下保存6个月后检测能力无显著变化。

磺胺二甲基嘧啶残留快速检测阻断ELISA试剂盒的研制及其性能测定

应用磺胺二甲基嘧啶(SM2)单克隆抗体(mAb)成功研制出SM2残留快速检测阻断ELISA试剂盒(SM2-Kit)。研究结果表明,SM2-Kit的标准曲线呈典型的S型,相关系数R2=0.9911,符合4参数logit曲线拟合,线性检测范围为0.625μg/L～80μg/L,灵敏度为0.9μg/L,半数抑制浓度(IC50)为5.82μg/L,检测限为1μg/L;饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为83.4%、89.5%,平均批内和批间变异系数均低于15%;SM2-Kit与磺胺甲基嘧啶的交叉反应率(CR%)为2.08%,与其它磺胺类药几乎没有反应性;基质对SM2-Kit的检测结果影响不大;试剂盒在4℃可保存6个月。

空气中微量氨气快速检测试剂盒的研制

应用显色剂与氨在一定条件下反应生成一种蓝绿色化合物的原理 ,研制出一种简单、快速测定氨气含量的试剂盒。对不同实验条件进行比较 ,筛选出了最佳实验条件。采样体积 0 .1L ,检测管外径3 .2～ 3 .3 mm ,内径 1.8mm,吸附载体为 80～ 10 0目活化 Si O2 /Sn O2复合材料与吸附剂、催化剂、显色剂的混合物 ,采气速度为 0 .0 1L/min,采样时间 10 min,显色时间 5 min。实验结果表明 ,检测试剂盒显色强度与氨气浓度呈线性关系 ,最低检测浓度为 0 .1mg/m3,重现性较好。与国标对照实验中 ,6次测定结果的平均相对误差为 6.2 3 % ,小于 15 % ;一次测定最大相对误差 7.4% ,小于 2 5 % ;重复测定的相对标准偏差为 5 %～ 8% ;样品中加入 2 μg的氨 ,其回收率为 95 %～110 % ,符合 GB 75 3 0 -87要求。一定量的有机胺、甲醛、H2 S会产生干扰。试剂盒使用寿命在 8个月以上。

H9亚型禽流感病毒免疫层析快速检测试剂盒的研制及应用

利用胶体金免疫层析技术,在建立H9亚型禽流感病毒免疫层析检测方法的基础上组装成试剂盒,试剂盒由试纸卡、稀释液、样品管、塑料吸管、一次性手套及说明书组成。对试剂盒的特异性、敏感性、保存期和重复性等进行了测定。结果表明,试剂盒在室温可以保存6个月,4℃可以保存12个月;与HA试验相比特异性强、灵敏度高、重复性好,操作简单、方便、快捷,能在10min内准确检测出样品中是否含有H9亚型禽流感病毒。先后制备了5批试剂盒,对武汉市及周边地区的鸡场共抽检498份样品,经病毒分离鉴定准确率达到100%。

食品中总抗生素快速检测试剂盒性能的评价

动物性食品中抗生素残留问题引起了人们的广泛关注,而总抗生素快速检测试剂盒的产生给抗生素的快速检测带来了方便。为了解国产总抗生素快速检测试剂盒的可靠性,对其性能指标进行评价,通过灵敏度、准确度、适用范围、稳定性、重复性等试验进行考察,并将国产试剂盒与国外同类产品进行了比较。结果显示,总抗生素检测试剂盒可以检测20多种抗生素,重复性好,准确度达95%,结果准确可靠,且检测限均达到国外同类产品技术指标,其性能符合快速检测使用要求。

一种唾液快速检测HIV-1/2型抗体试剂的现场评价

目的对一种唾液快速检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体试剂进行现场评价,考核其现场使用的敏感性和特异性,以及与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法采集247例已知HIV感染者、1 090例正常献血人员、60例患有其它疾病的患者(包括孕妇、肿瘤患者、一般疾病患者),以及109例HCV感染者和119例未知HIV感染状况的吸毒人员的唾液标本,现场使用Vanguard OMTTM唾液HIV-1/2抗体快速检测试剂盒(CalypteBiomedical生产)进行检测,同时平行采集上述人群的血液标本,使用Vironostika HIV Uni-FormⅡplus O(BioMerieux生产)进行对比测试。结果247例已知HIV感染者中,247例唾液标本HIV-1/2型抗体检测均为阳性。1 259例血液酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HIV抗体阴性人群中,1 257例唾液检测为阴性,2例为阳性。119例吸毒人员中,28例血液标本HIV阳性中,唾液标本检出27例。91例HIV阴性中检出阴性90例。该唾液HIV抗体快速检测试剂,敏感性为99.64%,特异性为99.78%。与ELISA检测的一致性为99.75%。结论唾液HIV-1/2型抗体检测试剂与现行的血液ELISA检测结果相近。唾液标本的采集方便而且危险性小,推荐在采血较困难的人群、基层医疗机构、VCT门诊等,可考虑使用唾液HIV-1/2型抗体快速检测试剂进行HIV抗体初筛检测。