米力农对LPS诱导下人冠状动脉内皮细胞炎症反应的影响

目的:观察米力农对LPS诱导下人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)炎症反应及NF-κB的影响。方法:体外培养HCAEC,分为正常组、LPS组(1μg/ml)、米力农50μmol/L组和米力农200μmol/L组,后两组均与LPS共同孵育24 h。分别采用qRT-PCR和ELISA检测IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA和蛋白水平,分别采用Western blot和免疫荧光法检测NF-κB活化和核移位。结果:与LPS组相比,米力农显著降低HCAEC的IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA和蛋白表达;抑制NF-κB活化和核移位(P<0.05),且呈一定量效关系。结论:米力农可通过抑制NF-κB活化而降低LPS诱导的HCAEC释放炎症因子。

重组人白细胞介素35(rhIL-35)通过抑制NF-κB通路减轻川崎病的冠状动脉内皮细胞损害

目的探究重组人白细胞介素35(rhIL-35)对川崎病(KD)冠脉损害的保护作用及其作用机制。方法采用体外培养的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)建立KD血管模型,利用肿瘤坏死因子α(TNF-α)及KD患者血清刺激HCAEC以模拟KD的局部炎性病变。将细胞分为对照组、TNF-α及KD血清刺激组、(25、50)ng/mL rhIL-35处理组,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时定量PCR检测HCAEC的IL-1β、IL-6、IL-17A、闭锁小带蛋白1(ZO-1)mRNA水平,ELISA检测KD患儿血浆IL-35水平及HCAEC上清液IL-1β、IL-6、IL-17A含量,Western blot法检测核因子κB p65(NF-κB p65)及ZO-1的表达。结果TNF-α及KD血清处理抑制HCAEC增殖,rhIL-35则明显逆转以上作用;rhIL-35预保护细胞后可明显下调IL-1β、IL-6及IL-17A的表达;与TNF-α及KD血清刺激组相比,rhIL-35预处理细胞后可明显增高ZO-1蛋白的表达,抑制NF-κB p65的高表达。结论rhIL-35能够通过抑制NF-κB通路减轻KD的冠状动脉内皮细胞损害。