在鼻咽癌中hCDC4基因编码区不存在突变

目的：hCdc4蛋白可以通过泛素介导的蛋白降解途径来调节细胞周期素E的水平。在一些人类肿瘤细胞系中，发现hCdc4突变。方法：采用PCR-测序方法在3个鼻咽癌(NPC)细胞系和21例NPC活检组织中对hCDC4基因的编码区进行了检测。结果：没有发现hCDC4基因突变。结论：说明hCDC4基因可能与NPC发病无关。

四甲基硅烷流量对硬质合金表面沉积的SiC涂层的影响

采用强电流直流伸展电弧化学气相沉积(HCDCA CVD)技术,在Ar、H2和四甲基硅烷(TMS)先驱体组成的混合气体气氛下,在YG6硬质合金衬底表面沉积了SiC涂层。本文对不同TMS流量条件下制备的SiC涂层的沉积速率、表面形貌、化学成分、物相组成以及附着力进行了对比研究。在此基础上,实验选取表面连续致密且附着力良好的SiC涂层作为过渡层进行了金刚石涂层的沉积,并对金刚石涂层的形貌、质量以及附着力进行了表征。实验发现。随着TMS流量的增加,SiC涂层的沉积速率加快,连续和致密性逐渐改善,但其附着力明显降低。连续致密且附着力良好的SiC涂层作为过渡层,可以有效地抑制硬质合金中Co的扩散,消除Co在金刚石涂层沉积过程中的不利影响,获得附着力良好的纳米金刚石涂层。

饲用微生物的高密度培养

高密度培养(HCDC,highcelldensityculture)以其优越性在发酵生产上得到了广泛的应用。它能获得高的产率,降低生产成本,从而提高产品在市场上的竞争力。将高密度培养技术用于直接饲用微生物(DFM)的生产中,对于提高发酵水平,更好地满足市场需求,具有重要的意义。

高密度培养技术对微生态制剂的增效作用

微生物饲料添加剂 (DFM )在应用中存在着作用不明显 ,效果不稳定的问题。如何增强并保持其应用效果已成为制约此类添加剂在实际生产中推广应用的关键因素。高密度培养技术 (HCDC ,highcelldensityculture)在现代发酵工业中已得到广泛应用 ,具有多种优势 :①可以提高菌体的发酵密度或单位体积培养液中菌体的浓度 ,进而提高体积产率 ;②可以缩小生物反应器体积 ,减少生产设备投资 ;③强化下游分离提取过程 ,减少废水量。若将HCDC用于DFM的生产 ,可以显著提高发酵水平并相应增加终产品中菌体含量 。

基因工程抗体anti-HBsAgFab原核表达体系大规模培养条件的实验研究

目的探讨含anti-HBsAg Fab/pBAD表达载体的工程化大肠杆菌的大规模培养条件。方法在摇瓶发酵条件下探讨工程菌的生长和表达规律,摸索最佳的培养模式及诱导表达条件。后根据摇瓶发酵结果于发酵罐中行补料高密度发酵试验,确定最佳补料模式。结果由摇瓶发酵获得的数据表明,以培养体系处于对数生长中期为诱导表达的起点、在25 ℃条件下以0.2% 阿拉伯糖诱导12 h,Fab的得率最佳,采用溶氧控制补料模式可使培养体系的最大D600达到55.2,相当于湿菌含量110 g/L水平;同时,经证实Fab的抗原结合活性良好。结论初步确定了周期短、产率高且稳定可靠的发酵工艺路线,为应用原核表达体系工业化大批量生产基因工程抗体奠定了基础。

干酪乳杆菌增殖培养基的优化研究

为了提高干酪乳杆菌培养液单位体积的菌数,以MRS肉汤培养基为基础培养基,采用单因素试验和Box-Benhnken试验优化增殖培养基组成。单因素试验结果表明:干酪乳杆菌培养基的最佳碳源为葡萄糖和乳糖质量比为1∶1的混合糖,最佳氮源为酵母提取粉,最佳生长因子为黄豆浆。响应面试验得到最佳添加量为混合糖3.77%,酵母提取粉1.49%,黄豆浆3.96%。在该增殖培养基中培养24h得到培养基活菌数为2.81×1012 CFU/mL,比优化前提高了8.21倍。

适配柔直系统快速性及可靠性需求的雷击干扰识别方法

直流线路遭受雷击干扰易导致行波保护等灵敏性较高的主保护误动作。在主保护动作前,可靠区分雷击干扰和短路故障将有效提高主保护的安全性,保障直流系统的安全稳定运行。但对于柔直系统而言,现有雷击干扰识别方法动作速度不足,难以在主保护动作之前判定雷击/故障性质,且在因数据传输异常或噪声干扰条件下出现远偏离实际值的坏数据时,动作性能有待进一步提升。为此,提出了一种具有足够速动性及安全性的雷击干扰识别方法。首先揭示了反向线模电压行波的特征。然后根据所揭示的特征分别提出了基于小波熵相对变化率识别算法的判据以及一种结合中值滤波的线性拟合函数一次项系数大小的判据,二者协同工作实现不同雷击及故障叠加场景下雷击非故障场景的识别与主保护的闭锁,从而有效增强主保护的安全性。基于PSCAD/EMTDC的仿真结果表明,在短至1 ms的时窗内即可在全线范围内完成对雷击干扰的辨识,并具有良好的抗坏数据干扰能力。

毕赤酵母表达铜锌超氧化物歧化酶中试工艺研究

正交设计优化铜锌超氧化物歧化酶毕赤酵母在摇瓶及30L发酵罐的诱导表达条件,用两步层析法纯化表达的目的蛋白,在不同温度下进行原液稳定性试验。用考马斯亮蓝检测蛋白含量,活性检测试剂盒检测目的蛋白活性。纯化后原液参照中华人民共和国药典三部2005版进行检测,用SDS-PAGE、HPLC检测纯度,免疫印迹法检测rhCu,Zn-SOD特异性,等点聚焦测定该酶等电点,地高辛法检测残余DNA含量,酶联免疫法测定残余蛋白含量。结果显示正交试验的大罐高密度发酵最适条件比摇瓶的最适条所获得的目的蛋白活性高8倍,纯化后,HPLC纯度为99.7%,原液比活性大于6.0×103 U/mg,各项检测指标达到生物制品检定标准。该酶在45、65、85、100℃的半衰期分别为240、120、30、15。具有良好的酶稳定性。本研究建立了发酵、纯化的中试工艺,获得高表达、高纯度及高比活的铜锌超氧化物歧化酶,为规模化生产奠定了基础。

抑癌基因FBXW7与恶性肿瘤的研究进展

恶性肿瘤的发病是由多种外源性致癌物的诱导和内源性的基因表达失控的结果,其中基因的异常表达包括多种癌基因的活化和/或多种抑癌基因的失活。FBXW7基因（F框/WD40域蛋白基因）又称hCDC4,是最近发现的重要的抑癌基因，在人体细胞周期的进程、细胞的生长和分化起重要的调节作用，其缺失能引起和／或加快癌细胞增殖，不良预后增加。本文对FBXW7基因与恶性肿瘤之间关系的研究进展进行综述。1