增食欲素受体2在哺乳仔猪空肠中的表达规律

采食状况是影响猪早期生长发育的一个主要因素。增食欲素在调节食欲上具有重要作用,但其发挥作用的前提是必须与其受体结合。为研究增食欲素受体2(HCRTR2)在哺乳仔猪肠道是否表达及其表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测其在0、3、8、14、21日龄大约克仔猪空肠中的表达。结果表明:HCRTR2能在哺乳仔猪空肠中表达,与0日龄相比,HCRTR2在3、8、14、21日龄表达水平均明显上升,其中在3日龄的表达量达到最高水平,而后逐渐下降趋于平稳状态,增加幅度分别为5.2、3.5、2.9、2.7倍。这表明HCRTR2在哺乳仔猪空肠中有表达,且在3日龄达到高峰。据此可以推测,该基因在仔猪肠道生长发育过程中具有调节作用。

鹅食欲素及其受体2基因克隆、序列和组织表达分析

旨在根据GenBank公布的人、原鸡、绿头鸭等物种HCRT和HCRTR2基因序列设计特异性引物克隆扩增鹅HCRT和HCRTR2基因编码区序列,并进行生物信息学分析;同时应用RT-qPCR技术检测HCRT和HCRTR2mRNA在四川白鹅19个组织中的表达情况。成功获得鹅HCRT和HCRTR2基因完整编码区序列,分别为456,1506bp,各自编码151,501个氨基酸。其中,HCRT基因编码的前体食欲素蛋白水解后可产生OXA和OXB2种多肽;序列分析表明,鹅OXA和OXB分别为含34,28个氨基酸的残留肽。序列比对结果显示,鹅OXA、OXB和HCRTR2氨基酸序列在近源物种间呈高度保守,提示OXA、OXB和HCRTR2可能在物种的进化中扮演着重要的角色;但各物种间食欲素蛋白的信号肽保守性较低,暗示其信号肽序列可能对于各物种的功能特性具有重要的意义。进化树分析表明,HCRT和HCRTR2两者进化较为相似,其中,鹅与鸡的亲缘关系最近,而与斑马鱼的亲缘关系最远。RT-qPCR结果显示,鹅HCRT和HCRTR2基因在下丘脑中的表达量均达到最高,且在其他组织中也有不同程度的表达,推测食欲素系统可能通过下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)参与动物生殖机能的调节。为进一步研究HCRT和HCRTR2基因在鹅繁殖活动中的作用奠定了基础。