昆明地区2019年HIV/HCV共感染患者HCV核衣壳蛋白基因分型

目的 基于丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein)基因序列了解昆明地区人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)/HCV共感染患者中HCV基因型及基因亚型流行情况。方法 2019年3—8月在云南省传染病医院收集临床诊断为HIV/HCV共感染住院且户籍地为昆明所辖14个县级市、区及县的患者血清,从血清中提取病毒RNA,反转录合成第一链cDNA,采用HCV核衣壳蛋白基因特异性引物进行巢式PCR扩增。结果 共收集到临床诊断疑似HIV/HCV患者样本64例,采用HCV核衣壳蛋白基因特异性引物扩增,其中17例样品扩增阳性。序列分析结果显示,有9例病例的序列与HCV 3b基因亚型序列位于同一个进化分支,核苷酸同源性为93.3%~95.2%;5例病例的序列与HCV 1b基因亚型序列位于同一个进化分支,核苷酸同源性为96.8%~97.6%;1例病例序列与HCV 3a基因亚型序列位于同一个进化分支,核苷酸同源性为95.2%;1例病例序列与HCV 6n基因亚型序列位于同一个进化分支,核苷酸同源性为97.9%;1例病例与HCV 6u基因亚型序列位于同一个进化分支,核苷酸同源性为98.4%。结论 昆明地区存在着HCV 1b、HCV 3a、HCV 3b、HCV 6n和HCV 6u等多个基因型/基因亚型HCV流行,以HCV 3b为主要流行的基因亚型。

丙型肝炎病毒C基因在E.coli中的高效表达

目的：通过观察影响ＨＣＶＣ基因在大肠杆菌中表达的因素，研制高表达工程菌株，制备重组抗原，用于免疫诊断和生物学功能研究。方法：将２种不同大小的ＨＣＶＣ基因片段克隆到带有ＰＬ启动子的表达载体中，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫印迹分析基因表达产物。结果：在观察影响表达因素的基础上，获得了高表达工程菌株，其基因表达产物占菌体蛋白的３８．５％。结论：本研究表明。