三价HCV疫苗在小鼠和恒河猴诱导产生具有协同作用的广谱多克隆抗体反应

【据《Gut》2017年11月报道】题:三价HCV疫苗在小鼠和恒河猴诱导产生具有协同作用的广谱多克隆抗体反应(作者WangX等)尽管最近上市的直接抗病毒药物大大提升了丙型肝炎的治愈率,但HCV的彻底清除仍需要一种有效的预防性疫苗。HCV疫苗开发的一个主要难点在于需要诱导出针对高度序列差异的多种基因型病毒的免疫反应。前期研究发现一种由昆虫细胞表达的可溶性E2(sE2)能诱导广谱中和抗体(NAbs),并有效防止HCV感染。本研究的目的是研制一种多价的丙型肝炎疫苗,进一步提升疫苗的抗原性覆盖度。

HCV疫苗涉及的诸多因素

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)属于黄病毒科肝炎病毒属的病毒,不经治疗可能发展为肝硬化和肝癌。虽然在丙型肝炎治疗上已经取得了很大进步,但是HCV疫苗仍然没有研制出来。HCV疫苗主要困难在于HCV基因遗传多样性、HCV持续性感染的多种机制、宿主在抗病毒方面较差的免疫反应以及缺乏合适的模型系统等方面。了解固有免疫和适应性免疫应答对候选疫苗的设计也很重要。一个疫苗技术的创新应用需要生物学评价、保护性免疫评价及临床试验等各方面评估。

关于HCV疫苗的一个值得关注的问题

Puig和合作者们使用黑猩猩模型分析了一种疫苗诱导的T细胞反应在没有中和抗体情况下的保护效果。两只之前感染HCV已经痊愈的动物，随后被接种一种重组牛痘病毒-HCV蛋白刺激的只含非结构蛋白N53、NS5A或NS5B DNA引物的疫苗。

抗HCV树突状细胞疫苗的制备及功能研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前发现的功能最强的专职抗原递呈细胞,在免疫反应中起着举足轻重的作用,因此备受重视,1990年以来,人们在体外诱导扩增DC成功之后,克眼了以往由于DC在组织中含量很少、难以获取的困难,使DC研究取得了许多突破性的进展,为人们探索新的疾病防治手段开辟了新的天地,以下从树突状细胞的特性、体外诱生及以DC为基础的治疗性疫苗在抗HCV感染中的作用等三个方面作—综述。

丙肝疫苗研究的困惑与希望

约80％的非甲非乙型肝炎为丙型肝炎病毒(HCV)所致。与甲肝、乙肝不同的是,约有60％的丙肝呈慢性化,且容易发生肝硬化,并与肝细胞肝癌关系密切”,危害很大。长期以来,对丙肝的治疗一直悬而未决。近几年采用基因工程产物IFN-α、IFN-β等治疗,但很不理想。因此对丙肝的预防很重要。除了加强对抗-HCV及HCV RNA的检测外,人们已注意到HCV疫苗,但由于多种因素的影响,该疫苗的研制并不顺利。

丙型肝炎疫苗研究现状与策略

丙型肝炎病毒(HCV)是引起慢性肝炎的主要病原之一,严重危害人类健康.据统计,在世界范围内约有1.7亿慢性感染者[1].75%左右的HCV急性感染者转为慢性,其中10%～20%慢性患者发展至肝硬化,1%～5%发展为肝癌.目前,对于慢性HCV感染,干扰素(IFN)联合利巴韦林的抗病毒治疗方案有效率仅为50%左右[2],结果不令人满意.因此,研制安全有效的预防性及治疗性HCV疫苗意义重大.

丙型病毒性肝炎预防性疫苗的研究近况

丙型肝炎症毒(HCV)是肠道外非甲非乙肝炎的主要致病因子，呈世界范围性，其致病常引起持续感染，并且HCV的慢性感染和慢性肝脏疾病，肝硬化及肝癌明显相关。因此，运用疫苗保护免受HCV感染很有必要。

关于丙型肝炎病毒疫苗的前景

问：抗HCV疫苗的前景如何？ 答：在过去的20年中，关于抗病毒性肝炎疫苗的发展已有了很大的进步。尤其是安全和有效的抗HBV疫苗已使用大约20年了，并且在大多数国家中从婴儿开始接种已成为一种常规。同样安全和有效的抗甲肝疫苗也很有作用，尽管该疫苗不推荐全部婴儿接种但可广泛使用在具有甲肝病毒感染风险的旅行者和其他个体中。

丙型肝炎病毒H株包膜蛋白在昆虫细胞中的表达及意义

目的 获得丙型肝炎病毒 (HCV) H株包膜糖蛋白的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2 ,并初步应用于丙型肝炎患者血清抗体的检测。方法 用 PCR方法自 HCV H株扩增出包膜蛋白 E基因 ,构建重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2。免疫荧光及 Western blot方法鉴定表达产物。用表达的 E1和 E2蛋白与 35例丙型肝炎患者血清反应。结果 昆虫细胞中表达的 E蛋白呈现 3种分子大小 ,E1的相对分子量为 2 1× 10 3和 33× 10 3 ,E2的相对分子量为 6 0× 10 3。在 35份感染者血清中 ,有 4例 E1抗体阳性 ,其中 1例检出 E2抗体。在 9例 PCR检测 HCV RNA阳性而抗 HCV检测阴性的血清中 ,有 3例血清与表达的 E蛋白反应。结论 HCV E蛋白基因可在昆虫细胞中稳定表达 ,表达的 E1和 E2蛋白可用于

丙型肝炎病毒E2包膜糖蛋白的研究进展

HCV E2包膜糖蛋白是 HCV的结构蛋白之一 ,具有重要的受体结合位点和抗原表位 ,在病毒感染和宿主免疫过程中起着十分重要的作用 ,也是目前疫苗研究的热点。其分子和功能特性的研究对 HCV作用机制及预防和治疗的研究有重要意义。近年来 ,该领域的研究取得一定进展。本文综述了 E2蛋白在病毒的入胞作用 。

用HLA-A2.1转基因鼠研究丙型肝炎病毒自然感染时的表位排列

丙型肝炎病毒(HCV)的治疗效果很大程度上取决于所感染HCV的基因型。有效的HCV疫苗必须能诱导强而持续的免疫反应,其中诱导广谱的CD8^+T细胞应答最为重要。

丙型肝炎

丙型肝炎病毒高变区及其变异机制——秦照玲等（上海第二军医大学微生物学教研室200433）；《生命的化学》2007，27（2）：119-122[丙型肝炎病毒（HCV）包膜糖蛋白E2所含的3个高变区（HVR1／2／3）是HCV基因组中变异程度最高的部分，参与病毒识别、黏附和入侵等过程。了解HVR的特点、变异规律及其生物学意义，不仅有利于阐明HCV持续感染及耐药机制，还可为未来HCV疫苗和新型治疗药物的设计提供理论依据。]

HCV新型抗原疫苗大鼠长期毒性试验研究

目的:观察重复注射给予SD大鼠HCV新型抗原疫苗所产生的毒性反应及其严重程度。方法:SD大鼠随机分为500μg/kg、1500μg/kg低、高两个剂量组和溶媒对照组,同设卫星组用于特异性抗体检测,各组于给药0、2、4周皮下注射1次,给药结束恢复性观察4周。结果:给药期间各组动物一般状况良好,注射部位肉眼观察无异常;摄食量、体重、体温无明显异常。低、高两个剂量组大鼠免疫后的血清HCV特异性抗体水平明显升高,随免疫时间延长呈上升趋势(高剂量雌鼠较明显)。两组给药后的各表现均以高剂量(1500μg/kg)组较明显,主要为TP、ALB略微降低,NE%略升高、LY%略降低,注射部位皮肤出现不同程度皮下组织急性炎症反应,有一定剂量-效应趋势,雄鼠脑、肾系数和附睾重量及系数微减少,但停药后均可恢复,未见明显延迟毒性。结论:HCV新型抗原疫苗500μg/kg(为推荐临床拟用剂量的299.4倍,大鼠等效剂量的48.5倍)以下为无毒性反应剂量;临床需重点关注注射部位皮肤局部皮下组织急性炎症反应,注意白细胞及其分类和TP、ALB的变化情况。

丙型病毒性肝炎实验性疫苗研究进展

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是肠道外非甲非乙肝炎的主要致病因子，呈世界范围性，其致病常引起持续感染，并且ＨＣＶ的慢性感染和慢性肝脏疾病、肝硬化及肝癌明显相关。因此，运用疫苗保护免受ＨＣＶ感染很有必要［１］。本文作者就有关ＨＣＶ疫苗的实验研究作一综述。一、重...

Al(OH)3和CpG ODN免疫佐剂对丙型肝炎病毒多表位抗原PCX3疫苗免疫效果的影响

以HCV蛋白疫苗PCX3为抗原,分别加入Al(OH)3佐剂,CpG ODN佐剂,以及两种佐剂联合作用的复合佐剂,对雄性六周龄BALB/c小鼠进行常规免疫.与其他免疫组相比,Al(OH)3和CpG ODN复合佐剂与PCX3抗原联合作用组产生的特异性IgG(1×106)和IgM(1×105)抗体滴度最高、持续时间最长;自然杀伤效应(CTL)实验显示该组小鼠诱发的CTL杀伤效应(40.91%)显著高于其他免疫组(P<0.05);流式细胞仪对小鼠淋巴细胞亚群进行分型分析发现:从第2周开始,该组小鼠体内CD4+/CD8+细胞比值(3.26)显著高于PCX3抗原单独作用组(P<0.05).结果表明,Al(OH)3和CpG ODN复合佐剂可以从体液免疫和细胞免疫两方面对HCV蛋白疫苗PCX3的免疫效果进行增强,并且具有协同效应.

丙型肝炎疫苗研究取得新进展

加拿大Alberta大学Houghton公布了历时10年的HCV研究结果，为开发有效的HCV疫苗带来了希望。这种疫苗利用单个病毒株制备，可诱导对抗HCV各主要病毒株的广谱交叉中和抗体。国立卫生研究院已支持对该疫苗进行试验，以进一步明确疫苗接种者能否产生中和实际感染病毒的抗体，如果能产生，中和应答的范围有多广。

丙型肝炎病毒E2蛋白HVR1在体液免疫应答中的作用

丙型肝炎病毒（HCV）感染是肝硬化、肝癌的高危险因素，目前尚无HCV疫苗上市。HCV包膜E2蛋白能诱导机体产生中和抗体，是重要的候选疫苗成分。E2蛋白氨基末端由27个氨基酸残基组成的高变区1（hypervariable region1，HVR1）含有多个线性中和抗体表位，变异频率极高，增加了HCV疫苗研制的难度。近年发现，除了HVR1含有中和抗体表位外，E2蛋白还存在其他的保守空间构象和线性中和抗体表位心。本研究构建了羧基端截短的含有HVR1和缺失HVR1的E2蛋白真核表达质粒，以之免疫小鼠，分析HVR1在E2蛋白诱导的小鼠体液免疫应答中的作用。