HBsAg/HCcAg融合表达细胞系的建立

目的 建立融合表达 HBV表面抗原与 HCV核心蛋白的体外培养细胞系 ,使之作为细胞杀伤实验的靶细胞 .方法 将含 HBV S和 HCV C融合基因真核表达质粒 CSpc D-NA3.1用电穿孔法转染 p81 5细胞 ,G41 8筛选后 ,再用有限稀释法进行单细胞克隆筛选 .RT- PCR与免疫荧光法分别检测基因转录与蛋白表达 .结果 HBV S基因与 HCV C基因的RT- PCR检测均为阳性 ,HBV表面抗原与 HCV核心蛋白的免疫荧光检测均为阳性 .结论 成功获得融合表达 HBV表面抗原与

抗HCV-NS3法检测肝组织中丙型肝炎病毒抗原的研究

以单克隆抗-HCV-NS3直接酶标法对石蜡包埋肝组织中丙肝炎病毒抗原(HCAg-NS3)进行测定,该抗体系应用基因重组表达丙肝抗原(HCV-NS3区-C33-C)免疫小鼠并通过细胞融合术后获得。49例病毒性肝炎患者肝组织测定结果,抗-HCV阳性组的HCAg-NS3检出率为51.9%(14/27),抗-HCV阴性组为13.6%(3/22),两组有显著性差异(P<0.01),以慢性重症肝炎和肝硬化患者检出率最高。HCAg-NS3阳性物在肝细胞的胞核或胞浆中均可见呈棕黄色细小颗粒状,以核型居多。直接酶标法测定HCAg与原位杂交法测定HCV RNA的比较,其符合率为81.6%(40/49)。本项技术具有简便、快捷、特异性、敏感性佳、图象清晰等优点,易于推广应用,为HCV感染的临床和发病机理研究提供重要检测手段。