期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
Cellular Oxidative Damage of HEK293T Cells Induced by Combination of CdCl_2 and Nano-TiO_2 被引量:1
1
作者 夏彬 陈建伟 周宜开 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2011年第3期290-294,共5页
This study investigated the conjoined cellular oxidative damage of human embryo kidney 293T(HEK293T) cells induced by cadmium chloride(CdCl2) and nanometer titanium dioxide(nano-TiO2).RT-PCR technique was used t... This study investigated the conjoined cellular oxidative damage of human embryo kidney 293T(HEK293T) cells induced by cadmium chloride(CdCl2) and nanometer titanium dioxide(nano-TiO2).RT-PCR technique was used to detect the expressions of Heme oxygenase-1(HO-1) and 8-oxoguanine DNA glycosylase(OGG1).The activities of superoxide dismutase(SOD) and catalase enzyme(CAT) and concentrations of reactive oxygen species(ROS) and maldondialdehyde(MDA) were measured by different approaches.The results showed that CdCl2 and nano-TiO2 at a low concen-tration of 0.75 total toxic unit(TU) exerted an additive effects on HO-1 gene expression,CAT activities and MDA concentrations.When the total TU was increased to 1 or 1.25 TU,the interaction was syner-getic.Moreover,the mixture with high proportion of CdCl2 produced an additive effect on the OGG1 gene expression,and the interaction was changed to be synergetic when the concentration of CdCl2 was lower than or equal to that of nano-TiO2.Synergetic effects of CdCl2 and nano-TiO2 on cellular oxida-tive damage of HEK293T cells were found as indicated by the changes in the SOD activities and ROS concentrations.It was concluded that CdCl2 and nano-TiO2 exerts synergistic effects on the cellular oxidative damage of HEK293T cells,and the sensitivity of these indicators of oxidative damage varies with the proportion of CdCl2 and nano-TiO2 in the mixture. 展开更多
关键词 cadmium chloride NANO-TIO2 oxidative damage hek293T cells
下载PDF
20(S)-原人参二醇对人胚肾293细胞生长的抑制作用 被引量:2
2
作者 翟旭光 陈广通 《南通大学学报(医学版)》 2010年第5期315-318,F0002,共5页
目的:研究20(S)-原人参二醇(PPD)对人胚肾293细胞(HEK-293细胞)生长抑制作用。方法:采用台盼蓝染色和噻唑蓝(MTT)法观察PPD对HEK-293细胞增殖的抑制作用,同时通过Hoechst33258染色和DNA Ladder方法测定PPD对HEK-293细胞凋亡影响。结果:... 目的:研究20(S)-原人参二醇(PPD)对人胚肾293细胞(HEK-293细胞)生长抑制作用。方法:采用台盼蓝染色和噻唑蓝(MTT)法观察PPD对HEK-293细胞增殖的抑制作用,同时通过Hoechst33258染色和DNA Ladder方法测定PPD对HEK-293细胞凋亡影响。结果:PPD可明显降低HEK-293细胞存活率和细胞活性,半数抑制浓度(IC50)为21.8μmol/L。PPD处理后HEK-293细胞核出现典型的凋亡形态学的改变,琼脂糖电泳呈现明显的DNALadder条带。结论:PPD对HEK-293细胞生长有明显的抑制作用并有剂量依赖关系。 展开更多
关键词 20(S)-原人参二醇 人胚肾293细胞 Hoechst33258 噻唑蓝
下载PDF
Construction of the pIRES2-ZsGreen1 eukaryotic expression vector of factor Ⅸ gene and expression in HEK-293 cells
3
作者 陈剑芳 《China Medical Abstracts(Internal Medicine)》 2017年第1期53-,共1页
Objective To construct p IRES2-ZsG reen1/FⅨexpression vector,using the pcDNA/FⅨplasmid containing FⅨcDNA as template,and expressing in HEK-293cells.Methods The total ORF of FⅨgene was amlified from pcDNA/FⅨplasmi... Objective To construct p IRES2-ZsG reen1/FⅨexpression vector,using the pcDNA/FⅨplasmid containing FⅨcDNA as template,and expressing in HEK-293cells.Methods The total ORF of FⅨgene was amlified from pcDNA/FⅨplasmid,then the amplified fragment was clonded into the p IRES2-ZsG reen1 vector using 展开更多
关键词 hek gene and expression in hek-293 cells Construction of the pIRES2-ZsGreen1 eukaryotic expression vector of factor
原文传递
人Bcl-2基因重组腺病毒的构建及其在螺旋神经节细胞中的表达 被引量:5
4
作者 罗凌惠 龚树生 +2 位作者 宋鹏 鄢开胜 刘英鹏 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期513-516,共4页
目的构建表达人Bcl2基因的重组腺病毒,并研究其在原代培养螺旋神经节细胞(spiralganglioncells,SGC)的表达特性。方法采用细菌内同源重组法,从pUCCAGGS/Bcl2质粒中获得人Bcl2cDNA,克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV上,后者和腺病毒骨架质... 目的构建表达人Bcl2基因的重组腺病毒,并研究其在原代培养螺旋神经节细胞(spiralganglioncells,SGC)的表达特性。方法采用细菌内同源重组法,从pUCCAGGS/Bcl2质粒中获得人Bcl2cDNA,克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrackCMV上,后者和腺病毒骨架质粒pAdEasy1在细菌内同源重组,在HEK293细胞中包装成为重组Ad增强型绿色荧光蛋白/Bcl2腺病毒,电镜观察病毒颗粒,用病毒感染原代培养的大鼠螺旋神经节细胞,在荧光显微镜下观察感染效率,用逆转录聚合酶链反应方法检测Bcl2基因在螺旋神经节细胞的转录表达,用WesternBlot检测其蛋白的表达。结果经酶切鉴定证实重组腺病毒质粒构建成功,电镜显示包装细胞中有大量病毒颗粒存在,呈规则六边形。荧光显微镜下观测到感染病毒的SGC细胞发出明亮的绿色荧光。分别在mRNA水平及蛋白水平证实有外源性Bcl2基因的表达。结论细菌内同源重组法是一种简便、高效的制备方法。构建的重组Ad增强型绿色荧光蛋白/Bcl2腺病毒能有效的感染SGC,并可在SGC中正确地转录和翻译,为进一步研究腺病毒介导的Bcl2基因对螺旋神经节损伤的保护作用奠定基础。 展开更多
关键词 螺旋神经节细胞 基因重组腺病毒 增强型绿色荧光蛋白 Bcl-2基因 细菌内同源重组法 hek293细胞 聚合酶链反应方法 Western 螺旋神经节损伤 显微镜下观察 BLOT检测 mRNA水平 原代培养 病毒颗粒 cells 腺病毒介导 构建表达
原文传递
基于血管紧张素转换酶2受体表达的SARS-CoV-2假病毒中和活性检测方法的建立及验证
5
作者 田莎莎 王建华 +2 位作者 孙百平 余飞 刘万卉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期718-723,728,共7页
目的建立基于血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)受体表达的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)假病毒中和活性检测方法,并进行验证。方法采用流式细胞术... 目的建立基于血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)受体表达的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)假病毒中和活性检测方法,并进行验证。方法采用流式细胞术和qPCR法分别检测Huh-7及HEK293T-hACE2细胞中ACE2受体蛋白表达和ACE2受体基因mRNA转录水平。选择ACE2受体蛋白表达及mRNA转录水平较高的细胞建立SARS-CoV-2假病毒中和活性检测方法,并优化病毒滴度、细胞浓度及抗体浓度。验证方法的准确性、线性范围、精密性及专属性。评价建立方法对假病毒拉姆达及德尔塔变异株的适用性。结果HEK293T-hACE2细胞中ACE2受体蛋白表达和ACE2受体基因mRNA转录水平远高于Huh-7细胞,因此采用HEK293T-h ACE2细胞建立SARS-CoV-2假病毒中和活性检测方法。最佳病毒滴度为2.6×104TCID50/mL,细胞浓度为4×1054个/mL,抗体浓度为100 nmol/L。150%、130%、100%、70%、50%5个相对活性浓度的SARS-CoV-2抗体参考品(简称参考品)的回收率在80%~120%范围内;参考品在50%~150%相对活性浓度范围内实际检测值与理论值呈良好线性关系,线性方程为:Y=1.061 X-7.72,R=0.9472;精密性验证CV均<10%;参考品的相对活性浓度与抑制率可拟合成四参数拟合曲线,重组抗RANKL人源化全单克隆抗体及制剂缓冲液均未显示曲线。假病毒拉姆达和德尔塔变异株的假病毒中和活性检测结果均可获得拟合曲线。结论建立的基于ACE2受体表达的SARS-CoV-2假病毒中和活性检测方法具有良好的准确度、精密性、线性及专属性,有望应用于SARS-CoV-2抗体类药物早期筛选及研发过程中质量的控制。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2受体 hek293t-hace2细胞 SARS-CoV-2 假病毒 中和活性
原文传递
镰形棘豆总黄酮抗肾癌分子作用机制的网络药理学初探 被引量:2
6
作者 彭岩枫 郭阳 +3 位作者 刘海瑞 周怡 张晓凤 张得钧 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期623-630,共8页
目的利用网络药理学和分子对接方法研究镰形棘豆总黄酮(TFOF)抗肾癌的分子机制。方法通过SEAdatabase、SwissTarget Prediction和TargetNet数据库预测TFOF的相关靶点。从DisGeNET、NCBI、GeneCards、OMIM和GeneCLip3数据库收集与肾癌相... 目的利用网络药理学和分子对接方法研究镰形棘豆总黄酮(TFOF)抗肾癌的分子机制。方法通过SEAdatabase、SwissTarget Prediction和TargetNet数据库预测TFOF的相关靶点。从DisGeNET、NCBI、GeneCards、OMIM和GeneCLip3数据库收集与肾癌相关的靶点,通过靶点映射确定活性化合物作用于炎症的靶点。利用Cytoscape3.7.2软件,构建药物-化合物-疾病-靶点蛋白互作网络图。借助Omicshare和Metascape开放平台对交集靶点进行GO及KEGG富集分析。检测活性化合物对TNF-α诱导特殊转染的人胚胎肾293细胞(HEK-293细胞)中NF-κB抑制率的影响,以验证其抗肿瘤活性。通过Autodock软件对核心化合物和核心靶点进行分子对接验证。结果靶点映射确定了460个镰形棘豆黄酮类化合物与炎症的共同靶点,其中,关键靶点8个(包括AKT1、TNF、SRC、VEGFA、EGFR等)。KEGG富集结果显示:TFOF的抗炎机制主要为调控cAMP信号通路、癌症中的微小RNA、VEGF信号通路等。分子对接显示核心成分与核心靶点对接良好。体外实验表明:7-羟基黄酮、2′,4′-二羟基查尔酮这两种化合物可显著抑制TNF-α活化HEK-293细胞中NF-κB的释放,具有明显的抗肾癌作用。结论镰形棘黄酮类化合物通过“多成分-多靶点-多通路”发挥抗肾癌作用,该作用可能与其对cAMP信号通路、癌症中的微小RNA、VEGF信号通路等的调控有关。 展开更多
关键词 镰形棘豆总黄酮 肾癌 镰形棘豆 网络药理学 分子对接 7-羟基黄酮 NF-ΚB 2 4′-二羟基查尔酮 人胚胎肾293细胞
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部