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麻杏石甘汤对腺病毒感染的HELF细胞因子蛋白表达影响的实验研究 被引量:4
1
作者 王文革 徐华 +1 位作者 邓英贤 王喆 《世界中西医结合杂志》 2013年第1期22-24,共3页
目的探讨麻杏石甘汤含药血清对3型腺病毒感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)之转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法以3型腺病毒攻击体外培养的HELF,制备麻杏石甘汤含... 目的探讨麻杏石甘汤含药血清对3型腺病毒感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)之转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法以3型腺病毒攻击体外培养的HELF,制备麻杏石甘汤含药血清,作用于该细胞,另设正常细胞组,病毒对照组,利巴韦林组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测不同组细胞TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的蛋白表达,并进行比较。结果病毒对照组较正常细胞组之TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α蛋白表达均明显增强(P<0.01),含药血清组可显著降低3型腺病毒攻击后HELF的TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的蛋白表达(P<0.01)。结论麻杏石甘汤可下调3型腺病毒感染后TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的蛋白表达,这可能是其治疗病毒性肺炎的作用机制之一。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 人胚肺成纤维细胞(helf)腺病毒 TGF-β1 PDGF-BB TNF-α 酶联免疫吸附试验(ELISA法)
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HELF方案联合干扰素治疗晚期胆囊癌的临床观察 被引量:4
2
作者 刘秀峰 秦叔逵 《中华综合医学》 2001年第8期684-685,共2页
目的:观察HELF方案联合干扰素治疗晚期胆囊癌的临床疗效及毒副反应。方法:对13例晚期胆囊癌患者应用HELF方案化疗,即HPT6mg/m^2,d,VP1660mg/m^2,d,CF100mg/d,5-FU500mg/m^2·d均为静脉滴注,第1-5天;同时给予α干扰素300万单位... 目的:观察HELF方案联合干扰素治疗晚期胆囊癌的临床疗效及毒副反应。方法:对13例晚期胆囊癌患者应用HELF方案化疗,即HPT6mg/m^2,d,VP1660mg/m^2,d,CF100mg/d,5-FU500mg/m^2·d均为静脉滴注,第1-5天;同时给予α干扰素300万单位,肌肉注射,1次/隔日,连用3个月以上。化疗每4周为一周期,2-3周期后评价疗效及毒性。结果:13例中,CR1例,PR2例,SD8例,PD2例,总有效率为23.1%,中位生存期18.6个月。毒副反应主要为骨髓抑制,脱发和一过性药物热。结论:HELF方案联合α干扰素是治疗晚期胆囊癌的优良方案之一。毒副反应较轻可以耐受。 展开更多
关键词 helf方案 干扰素 治疗 晚期胆囊癌 临床观察
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苯并芘对HELF细胞周期及相关基因表达的影响 被引量:6
3
作者 王智琴 齐以涛 +5 位作者 杨迪 陈倩 周宗灿 王捷 梁震 肖希龙 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2009年第1期42-45,共4页
背景与目的:探讨苯并芘(benzo[a]pyrene,BaP)影响人胚肺成纤维细胞(HELF)周期的途径和作用机制。材料与方法:用5μmol/L的BaP处理HELF细胞后,采用细胞计数,流式细胞仪检测BaP对细胞生长和周期的影响,用PCR和Western_blotting检测BaP对... 背景与目的:探讨苯并芘(benzo[a]pyrene,BaP)影响人胚肺成纤维细胞(HELF)周期的途径和作用机制。材料与方法:用5μmol/L的BaP处理HELF细胞后,采用细胞计数,流式细胞仪检测BaP对细胞生长和周期的影响,用PCR和Western_blotting检测BaP对细胞周期相关基因mRNA和蛋白的影响。结果:BaP处理HELF细胞后,显著促进细胞的生长,在处理后第8d时细胞数目约增加50%(P<0.01),细胞体积增大,促进细胞由G1期向S期和G2/M期的转换。mRNA和蛋白检测结果显示:BaP处理细胞后可以促进p53、cyclinD1、CDK2、CDK4和p21mRNA及蛋白的表达(P<0.05或P<0.01),抑制cyclinEmRNA及蛋白的表达(P均<0.01),而对cyclinA和p27mRNA及蛋白表达没有明显影响(P均>0.05)。结论:BaP对HELF细胞周期的调控逃脱了p53_p21的关卡作用,而通过诱导cyclinD1、CDK2和CDK4的表达来加快细胞周期的进程,该途径为cyclinA和p27非依赖型。 展开更多
关键词 苯并芘 细胞周期 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖激酶 CKIs 人胚肺成纤维细胞
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miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响 被引量:4
4
作者 宿利清 王立红 +1 位作者 贺岚 付秀华 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第1期139-143,共5页
目的:探讨miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响。方法:通过转染miR-155抑制剂构建miR-155低表达的HELF细胞株,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8法和流式细胞仪检测miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡的影响,West... 目的:探讨miR-155对人胚肺成纤维细胞HELF增殖、凋亡和胶原蛋白合成的影响。方法:通过转染miR-155抑制剂构建miR-155低表达的HELF细胞株,采用qRT-PCR检测转染效果,CCK-8法和流式细胞仪检测miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡的影响,Western blot检测miR-155低表达对Col-Ⅰ和Col-Ⅲ胶原蛋白表达的影响。采用TargetScan软件预测并通过双荧光素酶报告基因实验检测miR-155和Smad5的靶向关系,qRT-PCR和Western blot检测miR-155和Smad5的调控关系。将si-Smad5和miR-155抑制剂共同转染HELF细胞后,观察Smad5沉默是否影响miR-155对HELF细胞增殖、凋亡和胶原蛋白合成的作用。结果:转染miR-155抑制剂成功下调了HELF细胞中miR-155的表达,miR-155低表达能够明显抑制HELF细胞增殖和Col-Ⅰ、Col-Ⅲ胶原蛋白的合成,并促进HELF细胞凋亡(P<0.05)。miR-155可与Smad53′UTR区域结合并负向调控Smad5表达(P<0.05)。Smad5沉默可逆转miR-155低表达对HELF细胞增殖、凋亡和胶原蛋白合成的调控作用(P<0.05)。结论:miR-155低表达可通过靶向调控Smad5抑制HELF细胞增殖和胶原蛋白合成,并促进HELF细胞凋亡。 展开更多
关键词 MIR-155 肺成纤维细胞 细胞增殖 胶原蛋白合成 凋亡 SMAD5
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麻杏石甘汤对3型腺病毒感染HELF部分细胞因子mRNA基因表达的影响 被引量:4
5
作者 王文革 徐华 张俊红 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2014年第6期36-38,共3页
目的:探讨麻杏石甘汤含药血清对3型腺病毒感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)之转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA基因表达的影响。方法:以3型腺病毒分别攻击体外培养的HELF,制备麻... 目的:探讨麻杏石甘汤含药血清对3型腺病毒感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)之转化生长因子-β1(TGF-β1)、血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA基因表达的影响。方法:以3型腺病毒分别攻击体外培养的HELF,制备麻杏石甘汤含药血清,作用于该细胞,另设正常细胞组、病毒对照组、利巴韦林组,采用原位杂交法检测不同组细胞TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的mRNA基因表达,进行各组间比较。结果:病毒对照组较正常细胞组之TGF-β1、PDGF-BB、TNF-αmRNA的表达均明显升高(P<0.01),含药血清组对腺病毒攻击后的TGF-β1、PDGF-BB、TNF-αmRNA表达均有显著降低作用(P<0.01)。结论:麻杏石甘汤可下调TGF-β1、PDGF-BB、TNF-α的mRNA表达,这可能是其治疗病毒性肺炎的作用机制之一。 展开更多
关键词 麻杏石甘汤 人胚肺成纤维细胞 腺病毒 TGF-β1 PDGF-BB、TNF-αmRNA 原位杂交
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稳定转染Dicer基因对HELF细胞功能的影响
6
作者 何琳 王禄增 郑志红 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第4期50-55,90,共7页
目的观察正常人胚肺成纤维细胞(HELF)在稳定转染Dicer基因后增殖能力及迁移能力的变化。方法应用脂质体介导方法转染Dicer基因表达载体于HELF细胞,G418筛选,PCR检测整合情况,RT-PCR检测表达情况,Western-blot检测蛋白表达水平,确定稳定... 目的观察正常人胚肺成纤维细胞(HELF)在稳定转染Dicer基因后增殖能力及迁移能力的变化。方法应用脂质体介导方法转染Dicer基因表达载体于HELF细胞,G418筛选,PCR检测整合情况,RT-PCR检测表达情况,Western-blot检测蛋白表达水平,确定稳定转染细胞株,MTT方法检测细胞增值能力,Transwell方法检测细胞迁移能力。结果Dicer基因稳定转染HELF细胞系建立,用RT-PCR和Western-blot方法检测到Dicer基因mRNA和蛋白表达水平都明显增强。与转染空载体的HELF细胞相比,转染Dicer基因的HELF细胞48、72、96h的MTT光吸收值明显升高(P<0.05),并且穿过人工重构基底膜的细胞数明显增多。结论Dicer基因稳定转染HELF细胞后,HELF细胞增殖能力和迁移能力都明显增强。 展开更多
关键词 DICER helf 稳定转染
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HELF方案治疗晚期胃癌40例疗效观察
7
作者 韩忠然 韩冰 《中国医药导报》 CAS 2008年第25期42-42,44,共2页
胃癌是一种相对化疗敏感的恶性肿瘤,但晚期胃癌仍是不可治愈的疾病,联合化疗可以达到姑息性治疗的目的,以往的化疗基本上都是以氟尿嘧啶为主的方案,自20世纪80代中期以来,FAM方案是治疗晚期胃癌的标准方案,但缓解率低.近年来运用... 胃癌是一种相对化疗敏感的恶性肿瘤,但晚期胃癌仍是不可治愈的疾病,联合化疗可以达到姑息性治疗的目的,以往的化疗基本上都是以氟尿嘧啶为主的方案,自20世纪80代中期以来,FAM方案是治疗晚期胃癌的标准方案,但缓解率低.近年来运用EAP方案治疗晚期胃癌,Pyeusser等^[1]曾报告过总有效率为64%,但EAP方案毒性较大,特别是对心脏、肾脏及造血系统损害较重,不宜于连续给药6个周期以上。为此,我科2003年11月~2004年12月,用HELF方案治疗晚期胃癌40例,取得了较为满意的效果,现报道如下: 展开更多
关键词 helf方案 晚期胃癌 疗效观察
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Mfn2通过Ras-Raf-ERK1/2信号通路抑制ARDS肺纤维化及其机制 被引量:1
8
作者 安宁 许涛 +2 位作者 张晓霞 杨涛 许美霞 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期217-220,共4页
目的探讨线粒体融合蛋白(Mfn)2通过细胞外信号调节激酶(Ras-Raf-ERK)1/2信号通路抑制急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺纤维化及其机制。方法离体培养人胚肺成纤维细胞(HELF),给予脂多糖(LPS)刺激建立ARDS细胞模型,构建腺病毒重组体Adv-Mfn21-... 目的探讨线粒体融合蛋白(Mfn)2通过细胞外信号调节激酶(Ras-Raf-ERK)1/2信号通路抑制急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺纤维化及其机制。方法离体培养人胚肺成纤维细胞(HELF),给予脂多糖(LPS)刺激建立ARDS细胞模型,构建腺病毒重组体Adv-Mfn21-264-GFP、Adv-Mfn2265-757-GFP、Adv-Mfn21-757-GFP,分别转染HELF,使其分别过表达Mfn2的N端GTP酶结构域(aa1-264)、C端跨膜区(aa265-757)及Mfn2的全长氨基酸残基(aa1-757),将细胞分为:Control组、Adv-vector组、LPS组、Adv-Mfn21-264-GFP组、Adv-Mfn2265-757-GFP组、Adv-Mfn21-757-GFP组;噻唑蓝(MTT)法观察各组HELF细胞增殖情况,并检测细胞内胶原蛋白的表达情况,Western印迹及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Ras信号通路Ras、Raf-1及ERK1/2的表达。结果Control组与Adv-vector组细胞增殖水平无明显差异(P>0.05);与Control组比较,LPS组第2、3、4、5、6天细胞增殖水平均明显增加(P<0.01);转染不同Mfn2基因片段后,与LPS组比较,Adv-Mfn21-264-GFP组、Adv-Mfn2265-757-GFP组、Adv-Mfn21-757-GFP组肺成纤维细胞增生受到抑制,细胞增殖水平明显下降(P<0.01);且LPS组较Control组细胞内胶原蛋白含量明显增加,Adv-Mfn21-264-GFP组、Adv-Mfn2265-757-GFP组、Adv-Mfn21-757-GFP组较LPS组细胞内胶原蛋白含量明显减少(均P<0.01);Western印迹及RT-PCR检测结果显示,与Control组比较,LPS组Ras、Raf-1、ERK1/2蛋白及基因表达明显增加,而转染不同Mfn2基因片段腺病毒后,与LPS组比较,Adv-Mfn21-264-GFP组、Adv-Mfn2265-757-GFP组、Adv-Mfn21-757-GFP组Ras、Raf-1、ERK1/2蛋白及基因表达明显下调(均P<0.05)。结论Mfn2可能通过N端GTP酶结构域、C端跨膜区调控Ras-Raf-ERK1/2信号通路影响成纤维细胞异常增殖抑制ARDS肺纤维化。 展开更多
关键词 脂多糖(LPS) 线粒体融合蛋白(Mfn)2 细胞外信号调节激酶(Ras-Raf-ERK)1/2信号通路 人胚肺成纤维细胞(helf) 急性呼吸窘迫综合征(ARDS) 肺纤维化
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银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞增殖与凋亡的干预研究 被引量:5
9
作者 张兴彩 蔡余力 +1 位作者 张伟 陈宪海 《中医药学报》 CAS 2017年第2期29-32,共4页
目的:观察银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响,为临床治疗肺纤维化提供理论依据。方法:HELF细胞培养后,分别分为A对照组;B模型组加入TGF-β1;C1-3TGF-β1+银杏叶提取物低中高剂量组。MTT法测量各孔吸光度OD值并计算各药物... 目的:观察银杏叶提取物对人胚肺成纤维细胞增殖、凋亡的影响,为临床治疗肺纤维化提供理论依据。方法:HELF细胞培养后,分别分为A对照组;B模型组加入TGF-β1;C1-3TGF-β1+银杏叶提取物低中高剂量组。MTT法测量各孔吸光度OD值并计算各药物组细胞生长抑制率,流式细胞术Annexin V/PI双染色法检测细胞凋亡率。结果:与对照组相比,模型组细胞OD值明显升高;与模型组相比,银杏叶提取物各浓度组细胞增殖OD值均明显降低,其中高浓度组明显低于中、低浓度组,经统计学处理,有显著差异性(P<0.05)。与对照组相比,模型组细胞凋亡率明显降低;与模型组相比,银杏叶提取物各浓度组细胞凋亡率均明显升高,其中高浓度组明显高于中、低浓度组,经统计学处理,有显著差异性(P<0.05)。结论:TGF-β1可明显促进成肺纤维细胞的增殖,抑制其凋亡;银杏叶提取物具有抑制肺成纤维细胞增殖,促进其凋亡的作用,且作用成一定量效相关。 展开更多
关键词 TGF-Β 人胚肺成纤维细胞(helf) 银杏叶提取物 肺纤维化
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胃差分化腺癌根治术后辅助化疗的临床研究 被引量:2
10
作者 陈映霞 秦叔逵 +6 位作者 何泽明 王琳 钱军 邵志坚 刘秀峰 廖峰 龚新雷 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2007年第9期651-654,658,共5页
目的:观察和比较HELF方案和HELF/HPLF交替方案对胃差分化腺癌(低分化腺癌、粘液腺癌、印戒细胞癌)根治术后患者无病生存期(DFS)、总生存期(OS)的影响。方法:经组织学证实为低分化腺癌、粘液腺癌及印戒细胞癌的Ⅱ-Ⅲ期胃癌根治... 目的:观察和比较HELF方案和HELF/HPLF交替方案对胃差分化腺癌(低分化腺癌、粘液腺癌、印戒细胞癌)根治术后患者无病生存期(DFS)、总生存期(OS)的影响。方法:经组织学证实为低分化腺癌、粘液腺癌及印戒细胞癌的Ⅱ-Ⅲ期胃癌根治术后患者,随机分配至A组(单独HELF方案化疗)或B组(HELF/HPLF方案交替化疗),术后3—5周开始化疗,化疗4—6周期。结果:共入组80例患者,72例可按要求随访及评价不良反应,A组、B组各36例。全组患者共随访7—98月,A组与B组中位随访期差异无统计学意义(30月vs.33月,P=0.383)。A组患者的DFS为4~97月(中位值20月),B组为5~98月(中位值39月),两组差异有统计学意义(P=0.025)。A组的OS为10~97月(中位值28月),B组为7~98月(中位值48月),以B组生存时间更长(P=0.042)。主要不良反应为骨髓抑制及消化道反应,多为Ⅰ-Ⅱ度。结论:HELF方案与HPLF方案交替用于差分化胃腺癌根治术后的辅助治疗,在推迟肿瘤复发转移及延长生存期方面可能优于单用HELF方案。 展开更多
关键词 胃癌 差分化腺癌 辅助化疗 helf/HPLF方案
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1,4-苯醌致人胚肺成纤维细胞的凋亡效应与调控机制 被引量:8
11
作者 熊梦祯 张娟 +2 位作者 孙蓉丽 尹立红 浦跃朴 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2012年第1期6-9,共4页
目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制。方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L PBQ处理HELF细胞24、48... 目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,PBQ)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblast,HELF)的凋亡效应与调控机制。方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的PBQ处理HELF细胞24 h和40μmol/L PBQ处理HELF细胞24、48、72 h后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测PBQ对HELF细胞增殖的抑制作用,以PI单染法检测细胞周期的改变,用Annexin-Ⅴ/PI双染法检测细胞凋亡,以实时荧光PCR法检测Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平的改变。结果:与对照组相比,不同PBQ染毒浓度下作用24 h后,随PBQ浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(P<0.05),G0/G 1期细胞下降(在40和60μmol/L时,P<0.05),S期细胞增加(P<0.05),以40μmol/L PBQ浓度作用于HELF细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和S期细胞均下降(P<0.05),而G0/G1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(P<0.05);当染毒浓度大于20μmol/L时,染毒24 h可诱导HELF细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);不同浓度的PBQ染毒24 h,细胞的Bax、Bcl-2、p53 mRNA表达水平均上调。40μmol/L PBQ作用不同时间后,Bax、p53 mRNA水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(P均<0.05);Bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72 h时与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);Bax/Bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PBQ能抑制HELF细胞增殖,影响HELF细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与Bax/Bcl-2比值的上升,及p53 mRNA表达的上调有关。 展开更多
关键词 1 4-苯醌 helf细胞 细胞凋亡 BAX/BCL-2 P53
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柴胡皂甙D通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白产生 被引量:18
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作者 孙金玲 郑金旭 +3 位作者 史小东 钱海 金承基 徐莉莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期256-261,共6页
目的研究柴胡皂甙D(SSD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖、转分化以及TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响。方法体外培养HELF,设立正常对照组、 1 ng/mL TGF-β1处理组、 1 ng/m... 目的研究柴胡皂甙D(SSD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖、转分化以及TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响。方法体外培养HELF,设立正常对照组、 1 ng/mL TGF-β1处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合0.5μmol/L SSD处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合1μmol/L SSD处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合2μmol/L SSD处理组。采用CCK-8法检测HELF的增殖情况,荧光定量PCR法检测Smad2、 Smad3、 Smad7的mRNA水平, Western blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 1型胶原蛋白(Col1)、 Smad2、 Smad3、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、 p-Smad3、 Smad7的蛋白水平。结果与正常对照组比较, TGF-β1处理组细胞增殖明显, Col1、α-SMA蛋白水平增加, Smad2和Smad3 mRNA和蛋白磷酸化水平显著增加, Smad7 mRNA和蛋白水平显著降低;与TGF-β1处理组比较,不同浓度SSD处理组细胞增殖降低,可逆转以上各指标的改变,呈一定的量效关系。结论 SSD通过调控TGF-β1/Smads信号通路,发挥抗肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 柴胡皂甙D 人胚肺成纤维细胞(helf) 转化生长因子β1(TGF-β1) 果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白(Smads)
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大蒜新素对人巨细胞病毒感染的人胚肺成纤维细胞凋亡的影响 被引量:4
13
作者 聂兴草 方峰 +4 位作者 李红 董永绥 甄宏 刘志峰 李革 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1015-1018,共4页
目的研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fasmRNA表达的影响。方法用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96... 目的研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)诱导感染的人胚肺成纤维细胞(HELF)凋亡的动态变化及凋亡调控基因bcl-2和fasmRNA表达的影响。方法用流式细胞术测定HELF在高、低感染复数(MOI分别为2.5、0.25)HCMV感染后1、12、24、36、48、72、96h凋亡细胞比率;大、中、小剂量大蒜新素(9、6和3μg/mL)处理正常的和感染的HELF细胞(MOI为2.5)后上述各时间点凋亡细胞比率。用原位杂交法检测大剂量大蒜新素处理感染细胞(MIO为0.25)72h后bcl-2和fasmRNA表达强度变化,并与正常细胞和感染细胞对比分析。结果正常细胞凋亡比率保持恒定低水平(凋亡率平均2.68%);低、高感染复数感染细胞随时间延长凋亡细胞逐渐增多,凋亡率峰值分别达8.85%(96h)和25.63%(72h);各剂量大蒜新素处理的正常细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性,峰值分别为4.88%、6.47%和8.35%;但各剂量药物处理感染细胞后却使细胞凋亡比率下降,大剂量药物处理72h时效应最为明显,凋亡细胞比率由25.63%降至16.24%。正常细胞高表达bcl-2,低表达fas基因;感染HCMV后,bcl-2表达显著下调,fas表达明显增强;大蒜新素处理感染细胞后使bcl-2表达强度明显高于感染细胞,fas表达水平明显低于感染细胞,但仍未恢复到正常细胞水平。结论HCMV是HELF凋亡的强诱导剂; 展开更多
关键词 大蒜新素 细胞凋亡 凋亡调控基因 人巨细胞病毒 人胚肺成纤维细胞
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染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞应激蛋白诱导表达 被引量:4
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作者 张海英 邹伟明 +1 位作者 李慧祺 黄明立 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2008年第2期105-107,共3页
目的观察染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞(HELF)血红素氧合酶-1(HO-1)、金属硫蛋白(MT)表达的影响。方法采用大鼠巨噬细胞(AM)和HELF组成体外模型,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测二氧化硅粉尘处理AM24h的培养上清液刺激H... 目的观察染尘巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞(HELF)血红素氧合酶-1(HO-1)、金属硫蛋白(MT)表达的影响。方法采用大鼠巨噬细胞(AM)和HELF组成体外模型,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测二氧化硅粉尘处理AM24h的培养上清液刺激HELF细胞的MT1A、MT2A和HO-1mRNA表达情况。同时用二氧化钛作为阴性对照,以不用粉尘处理的AM培养上清液作为正常对照。结果HO-1能被染尘AM诱导表达且呈良好的剂量-效应关系。MT1A、MT2A也能被诱导表达,但没观察到明显的剂量-效应关系。结论HO-1可能参与了矽尘致细胞氧化应激过程,起到一定的抗氧化保护作用。 展开更多
关键词 矽尘 人胚肺成纤维细胞 血红素氧合酶 金属硫蛋白
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人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及转染 被引量:3
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作者 林雪梅 李芳菲 +2 位作者 姜蓉 王莎莉 王亚平 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期134-137,共4页
目的:构建携带人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达载体,并转染人胚肺成纤维细胞,为研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.方法:以重组质粒pcDNA3.1/lif为模板,PCR扩增LIF基因,将扩增片断双酶切后连接... 目的:构建携带人LIF基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达载体,并转染人胚肺成纤维细胞,为研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础.方法:以重组质粒pcDNA3.1/lif为模板,PCR扩增LIF基因,将扩增片断双酶切后连接到质粒pEGFP-Nl中,形成重组表达载体pEGFP-Nl/lif,并用脂质体法转染人胚肺成纤维细胞,荧光显微镜下观察,RT-PCR及Western杂交检测融合蛋白的表达.结果:成功构建融合表达载体pEGFP-N1/lif,在人胚肺成纤维细胞实现表达,检测到融合蛋白EGFP-LIF.结论重组pEGFP-N1/lif载体构建成功,可用于标记LIF蛋白,为进一步研究LIF在维持人胚胎生殖细胞自我更新中的作用机制奠定基础. 展开更多
关键词 白血病抑制因子(LIF)基因 增强型绿色荧光蛋白 人胚肺成纤维细胞
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农药废液中氧乐果及其中间体水解实验研究 被引量:2
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作者 高健磊 张凡 侯杰 《河南科学》 1999年第2期168-173,共6页
以农药厂产生的高浓度铵磷废液为对象,研究了其中的主要有毒物质氧乐果及其合成中间体氧硫磷酯在不同存在环境中的水解状况。实验结果表明:这两种供试化合物的水解反应在一定pH值条件下呈一级动力学反应;它们的水解速率随温度和p... 以农药厂产生的高浓度铵磷废液为对象,研究了其中的主要有毒物质氧乐果及其合成中间体氧硫磷酯在不同存在环境中的水解状况。实验结果表明:这两种供试化合物的水解反应在一定pH值条件下呈一级动力学反应;它们的水解速率随温度和pH的升高而增大;20℃时它们在土壤pH环境中其水解半衰期为6.66和4.04h,为极易水解降解的有毒有机物。这为该废液作为液体肥料用于农灌提供环境依据。 展开更多
关键词 有机磷农药 废液 氧乐果 中间体 水解 环境影响
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FIZZ1通过NOTCH信号通路促进肺成纤维细胞转分化 被引量:1
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作者 徐芳 王爱利 黄莺 《临床肺科杂志》 2020年第12期1885-1888,共4页
目的基于NOTCH信号通路探讨FIZZ1对人胚肺成纤维细胞(HELF)转分化为肌成纤维细胞(MFb)的影响。方法1)HELF培养与传代后分成5组,加入不同浓度的FIZZ1(0.25ug/mL,0.5 ug/mL,1ug/mL,2ug/mL),采用CCK8实验检测细胞增殖活性。2)用不同浓度DAP... 目的基于NOTCH信号通路探讨FIZZ1对人胚肺成纤维细胞(HELF)转分化为肌成纤维细胞(MFb)的影响。方法1)HELF培养与传代后分成5组,加入不同浓度的FIZZ1(0.25ug/mL,0.5 ug/mL,1ug/mL,2ug/mL),采用CCK8实验检测细胞增殖活性。2)用不同浓度DAPT(0.25umol/L,0.5umol/L)处理4小时,再加入1ug/mL FIZZ1处理24小时,用CCK8法检测细胞增殖活性确定DAPT的最佳实验浓度。3)HELF分成3组:对照组(无血清培养基4h+2%PBS处理24h)、模型组(无血清培养基4h+1ug/mLFIZZ1处理24h)、DAPT组(含0.5umol/L DAPT的无血清培养基4h+1ug/mL FIZZ1处理24h),RT-PCR检测HELF中a-SMA、NOTCH的mRNA表达。结果1)FIZZ1刺激HELF后,与空白组相比,细胞核质比缩小,变成长梭形,数量增多。2)CKK8实验结果显示1ug/mL FIZZ1组增值率(OD值)最高(P<0.05﹚。用0.5umol/L浓度DAPT处理后细胞增殖率下降最为显著。3)RT-PCR实验显示,用1ug/mLFIZZ1刺激HELF后,与对照组相比,a-SMA及NOTCH1的mRNA表达显著增高(P<0.05﹚,0.5umol/L浓度DAPT处理后其两者表达显著降低。结论FIZZ1可能通过NOTCH信号通路的激活促进成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化增殖,导致a-SMA分泌增多,加重肺间质纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 人胚肺成纤维细胞 FIZZ1 NOTCH信号通路 Γ-分泌酶抑制剂 分化
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结合照相法建立烟流扩散新模式
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作者 颜幼平 张学军 邓卓贤 《广东工业大学学报》 CAS 1998年第2期52-57,共6页
应用流体力学基本原理,导出了烟流扩散新模式,讨论了利用照相法估算烟流污染物浓度的方法及步骤,以高架点源烟流扩散为例,应用新模式结合照相法估算烟流污染物浓度,并与利用高斯模式计算的烟流污染物浓度进行比较。
关键词 照相法 烟流半厚度 高斯模式
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氟化钠对人胚肺成纤维细胞p16基因改变的研究
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作者 刘春生 马道新 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2000年第3期133-135,共3页
目的与方法 :为研究氟化物的遗传毒性 ,我们采用PCR -SSCP和免疫组化方法从基因和蛋白水平研究氟化钠对人胚肺成纤维细胞抑癌基因 p1 6改变的影响 ,结果与结论 :结果未发现氟化钠能引起 p1 6基因的改变。
关键词 氟化钠 人胚肺成纤维细胞 P16基因 遗传毒性
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Human cytomegalovirus autophagy is related to the interferon synthesis and mTOR signal pathway
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作者 DONGMEI GAO JIAOE CHEN +1 位作者 HONGZHANG LI JUN ZHAO 《BIOCELL》 SCIE 2022年第10期2275-2280,共6页
Introduction:Human cytomegalovirus(HCMV)is reported to be involved in the occurrence of many human diseases.To further investigate the biological changes of HCMV,we analyzed the relevant factors that affect the autoph... Introduction:Human cytomegalovirus(HCMV)is reported to be involved in the occurrence of many human diseases.To further investigate the biological changes of HCMV,we analyzed the relevant factors that affect the autophagy caused by HCMV infection.Methods:Firstly,we cultured human embryonic lung fibroblasts(HELF)cells with HCMV infection,and evaluated the effects of HELF cells infected with different viruses through Enzyme-linked immunoabsorbent assay(ELISA),Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction(RT-qPCR),Acridine orange(AO)staining and Western blotting(WB)experiments.Results:Through the above experiments,we found that the combined treatment of HCMV infection and carbamazepine,rapamycin and si-mTOR promoted the increase of interferon(IFN)-α/βexpression and protein level,and caused the increase of LC3B protein level in HELF cells.In addition,HCMV infection could also affect the biological activities of HELF cells by regulating signal pathways like the JAK/STAT.Conclusion:Autophagy induced by HCMV is affected by the changes in the biological behavior of HELF cells,especially IFN-α/βsynthesis and mTOR signal pathway.These findings might shed new light on HCMVrelated disease treatment. 展开更多
关键词 HCMV helf cell mTOR IFN-Α IFN-Β
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