目的:通过构建基因突变小鼠模型,研究小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)技术,构建Henmt1基因...目的:通过构建基因突变小鼠模型,研究小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)技术,构建Henmt1基因突变小鼠,通过计算机辅助精子分析、HE染色及免疫荧光检测等技术对小鼠表型进行分析。结果:成功构建Henmt1基因突变小鼠模型;生育力测试结果提示Henmt1基因突变雄鼠不育;Henmt1基因突变导致雄性小鼠精子发生阻滞;突变小鼠睾丸中逆转座子元件LINE1表达上调。结论:Henmt1对雄性小鼠精子发生有重要调控作用。展开更多
[目的]探讨miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化修饰在乳腺癌细胞中的影响。[方法]纳入2019年9月-2021年9月收治的乳腺癌患者,收集其乳腺癌组织和癌旁组织。敲低或过表达miR-106b-5p后,检测乳腺癌细胞的增值水平。乳腺癌和癌旁组...[目的]探讨miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化修饰在乳腺癌细胞中的影响。[方法]纳入2019年9月-2021年9月收治的乳腺癌患者,收集其乳腺癌组织和癌旁组织。敲低或过表达miR-106b-5p后,检测乳腺癌细胞的增值水平。乳腺癌和癌旁组织中纯化的miR-106b-5p进行质谱分析以确定分子质量和LC-MS/MS确定核苷修饰。分析甲基转移酶HENMT1对miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化作用。[结果]敲低miR-106b-5p后,乳腺癌细胞的增值水平下降(P<0.05)。乳腺组织中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化显著高于癌旁中的水平(P<0.05)。敲低HENMT1后,乳腺癌细胞MCF7中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化水平下降(P<0.05)。敲低HENMT1后,miR-106b-5p的半衰期下降(P<0.05)。[结论]HENMT1能对miR-106b-5p进行3'-末端2'-O-甲基化修饰(65.32±16.40 vs 11.49±3.20)。3'-末端2'-O-甲基化能提升miR-106b-5p的半衰期(0.79±0.05 vs 0.98±0.07)并促进miR-106b-5p的促乳腺癌细胞增殖(1.70±0.08 vs 1.04±0.06)。展开更多
文摘目的:通过构建基因突变小鼠模型,研究小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)技术,构建Henmt1基因突变小鼠,通过计算机辅助精子分析、HE染色及免疫荧光检测等技术对小鼠表型进行分析。结果:成功构建Henmt1基因突变小鼠模型;生育力测试结果提示Henmt1基因突变雄鼠不育;Henmt1基因突变导致雄性小鼠精子发生阻滞;突变小鼠睾丸中逆转座子元件LINE1表达上调。结论:Henmt1对雄性小鼠精子发生有重要调控作用。
文摘[目的]探讨miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化修饰在乳腺癌细胞中的影响。[方法]纳入2019年9月-2021年9月收治的乳腺癌患者,收集其乳腺癌组织和癌旁组织。敲低或过表达miR-106b-5p后,检测乳腺癌细胞的增值水平。乳腺癌和癌旁组织中纯化的miR-106b-5p进行质谱分析以确定分子质量和LC-MS/MS确定核苷修饰。分析甲基转移酶HENMT1对miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化作用。[结果]敲低miR-106b-5p后,乳腺癌细胞的增值水平下降(P<0.05)。乳腺组织中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化显著高于癌旁中的水平(P<0.05)。敲低HENMT1后,乳腺癌细胞MCF7中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化水平下降(P<0.05)。敲低HENMT1后,miR-106b-5p的半衰期下降(P<0.05)。[结论]HENMT1能对miR-106b-5p进行3'-末端2'-O-甲基化修饰(65.32±16.40 vs 11.49±3.20)。3'-末端2'-O-甲基化能提升miR-106b-5p的半衰期(0.79±0.05 vs 0.98±0.07)并促进miR-106b-5p的促乳腺癌细胞增殖(1.70±0.08 vs 1.04±0.06)。