不同极性石斛生物碱的提取分离及对人晶状体上皮细胞增殖的影响

【目的】观察不同极性石斛生物碱对人晶状体上皮细胞(HLEC)的保护作用。【方法】石斛粉末经乙醇提取、降膜浓缩、酸化、盐析、萃取后,水洗、回收提取分离不同极性生物碱。HLEC用含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液培养,石斛生物碱的保护作用实验分为10组:正常对照组,模型组,水溶性生物碱、脂溶性生物碱、低极性生物碱、弱极性生物碱高、低剂量组,剂量均分别为25.0、12.5μg/L;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同极性生物碱对HLEC增殖的影响。【结果】通过单因素实验,获得了影响不同极性石斛生物碱提取率的关键因素,均为体积分数80%乙醇提取3次,提取3 h时提取率最高;模型组HLEC增殖被H2O2明显抑制,低剂量脂溶性生物碱组细胞抑制率显著降低,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)。【结论】较低剂量的脂溶性生物碱能更好地抑制H2O2对晶状体上皮细胞的氧化损伤。

蒲公英不同提取物对大肠杆菌体外抑菌活性的作用

【目的】考察蒲公英对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的体外抑制作用及其对E.coli蛋白质表达的影响。【方法】蒲公英药材粉末用水煎煮以及用不同极性溶剂(正己烷、乙酸乙酯、蒸馏水)依次进行提取,制成8种供试液。采用微量稀释法测定8种供试液对E.coli DH5α的抑菌活性,绘制E.coli在水煎液作用下的生长曲线;采用薄层色谱法(TLC)分析8种供试液的化学组成,通过十二烷基磺酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法和双向电泳(2-DE)法分析蒲公英对E.coli蛋白质表达的影响。【结果】蒲公英水煎液对E.coli有较强的抑菌活性,其最小抑菌浓度(MIC)为1.95 mg/m L;蒲公英乙酸乙酯相3对E.coli的MIC为0.13 mg/m L,相当于含19.23 mg/m L生药;正己烷、乙酸乙酯提取部位对E.coli没有明显的抑菌活性。TLC分析显示:正己烷和乙酸乙酯1不含绿原酸;乙酸乙酯相2、3部位斑点多且均明显。与空白组比较,蒲公英作用后E.coli生长受到抑制。SDS-PAGE和2-DE分析结果表明:蒲公英会影响E.coli的蛋白表达,其中2-DE分析结果显示乙酸乙酯相3的2×MIC作用大肠杆菌21 h后检测到的蛋白质点比空白对照图谱少92个,其中大肠杆菌可溶性蛋白表达量下调2倍的蛋白点有24个,上调2倍蛋白质点有19个,蒲公英乙酸乙酯相3作用于大肠杆菌后,大肠杆菌可溶性蛋白(p H3-10)表达量明显下调,蒲公英对大肠杆菌蛋白质表达具有抑制作用。【结论】蒲公英对E.coli的抑菌作用显著,绿原酸等水溶性成分的抑菌活性成分主要集中在水溶性部位,可通过影响细菌蛋白质的表达达到抑菌效果。

民族药小叶金花草的化学成分研究

目的:研究民族药小叶金花草(野鸡尾Onychium japonicum(Thunb.)Kze.的干燥全草)中的化学成分,为小叶金花草的质量标准提高提供理论依据。方法:采用硅胶、中压C18柱和半制备液相色谱等多种色谱分离方法,对小叶金花草的70%乙醇水提取物进行分离纯化,通过其理化性质、质谱和核磁共振等谱学技术鉴定化合物的结构。结果:从小叶金花草70%乙醇水提取物中分离得到10个化合物,经鉴定,分别为金粉蕨辛-2′-O-葡萄糖苷、(2S,3R)-蕨苷C、槲皮素-3-O-β-葡萄糖基-(1→2)-α-鼠李糖基-7-O-α-鼠李糖苷、清明花瓦氏苷、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-4′-O-β-D-葡萄糖苷、蕨苷M、野蔷薇苷A、巫山山柰酚、蕨素B、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖基-2″-(6-对香豆酰基)-β-D-葡萄糖苷。结论:除蕨苷M外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到,为该药材的质量标准提高奠定了基础。