骨髓间充质干细胞Hey1基因表达水平荧光定量RT-PCR方法的建立

目的:建立骨髓间充质干细胞中Notch信号通路靶基因Hey1表达水平的荧光定量RT-PCR方法。方法:培养骨髓间充质干细胞(C_2C_(12)),提取总RNA,验证内参基因β-actin和目的基因Hey1的扩增效率,优化PCR条件,分析扩增曲线、融解曲线,凝胶电泳验证定量PCR产物。结果:内参基因β-actin和目的基因Hey1扩增效率一致(扩增曲线斜率差<0.1),提示可以使用比较Ct法对Hey1进行相对定量分析;扩增曲线、融解曲线及凝胶电泳结果提示PCR产物特异性好。结论:本研究所建立的用于Hey1基因表达分析的定量RT-PCR检测方法,准确可靠,可用于Bmp9和Notch信号通路的研究。

HEY基因家族对心血管发育影响的研究进展

HEY基因为Hairy相关基因家族的亚基因家族,由HEY1、HEY2、HEYL3个结构相似的基因构成,其编码蛋白质属碱性螺旋-环-螺旋(bHLH)转录因子。近年来研究显示,HEY基因家族参与心脏瓣膜形成,参与心肌及大血管发育,还可通过介导Notch信号系统影响心脏发育,并且HEY2基因突变在人类的先天性心脏病中也可能起到重要作用。本文就HEY家族与心血管发育及先天性心脏病的关系做一综述。

Hey基因在心血管发育中的作用

人类的 H ey 基 因 编码 与果 蝇 hairy、 E nhancer-of-split相 似 的螺 旋 -环 -螺旋 亚 家族 转录 因 子 .到目 前为 止,N otch 信 号 途径 中已 明 确的 靶 基因 还不 多,它 们 就是 其中 的一 类 .因 此 ,它 们 是与 发 育过 程有 关的 基 因,这 些过 程 包括 横 向抑 制、组 织诱 导等 .人类 的遗 传 性突 变例 如 皮层 下梗 塞 的大 脑常 染 色体 显性 动 脉病 、A lag-ille 综合 症以 及小 鼠 模型 ,都 显示 出 N otch 信 号在 心 血管 发育 与 维持 过程 中 起着 重 要的 作用 .以 小 鼠和 斑马 鱼为 模型 进 行的 实 验也 表明 ,在 心 血管 形 成过 程中 ,H ey 基 因 在这 两个 物种 中 的同 源 基因 是 N otch 信 号中 最明 显的 转换 因 子 .

转录因子Hey1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测Hey1与Notch1在非小细胞肺癌组织中的表达,探讨Hey1在非小细胞肺癌中的表达与Notch1的表达、各临床病理特征之间的关系。方法制作组织芯片,采用免疫组织化学染色检测Notch1和Hey1在246例非小细胞肺癌组织及相应117例癌旁正常肺组织中的表达,应用SPSS 21.0进行统计分析。结果 Notch1在肺鳞癌、肺腺癌和癌旁正常肺组织的阳性率分别为78.8%,28.9%和30.8%,Hey1在肺鳞癌、肺腺癌和癌旁正常肺组织中的阳性率分别为79.7%,23.4%和33.3%;肺鳞癌患者Notch1阳性表达与TNM分期和淋巴结转移情况呈正相关;肺鳞癌患者Hey1阳性表达与TNM分期呈正相关,与肿瘤分化程度呈负相关;Spearman相关分析显示,肺鳞癌和肺腺癌组织中Notch1表达与Hey1表达具有显著的正相关关系。结论 Hey1和Notch1与肺鳞癌的恶性程度密切相关,可能是肺鳞癌发生、发展的重要参与因子。

HEY基因家族在哺乳动物心血管发育中的作用

哺乳动物的HEY基因家族与果蝇Hairy基因具有相似的螺旋-环-螺旋结构,二者均为转录因子,是目前发现的Notch信号通路中为数不多的靶基因之一。本文旨在通过对HEY基因家族结构与功能的特点分析,阐释它们在心血管发育中的重要作用,从而为揭开HEY基因家族对心血管发育的作用机制及分子调控机制提供理论基础。

Hey1基因过表达对小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响

目的:观察Hey1基因过表达对小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的影响。方法:用Lipofectamine 2000将Hey1表达质粒转染RAW264.7细胞系;10μg/mL Blasticidin筛选稳定转染的细胞克隆,RT-PCR检测Hey1基因表达水平;用RANKL诱导RAW264.7细胞向破骨细胞分化,抗酒石酸磷酸酶(TRAP)染色后进行破骨细胞计数。结果:Blasticidin筛选出的细胞株Hey1 mRNA表达水平显著高于正常RAW264.7细胞;在50 ng/mL RANKL诱导条件下,Hey1过表达的RAW264.7细胞分化形成的破骨细胞数显著低于正常RAW264.7细胞(P<0.05)。结论:Hey1具有抑制小鼠单核细胞RAW264.7向破骨细胞分化的作用。

果蝇Hey蛋白的原核表达与多克隆抗体制备

Hey基因属于碱性螺旋-环-螺旋（basic helix-loop-helix,bH LH）转录因子超家族,具有bH LH结构域、Orange结构域和C末端的YRPW保守四肽。哺乳动物的Hey基因通常作为Notch信号通路的靶基因,参与心血管系统形成、神经发生、骨骼和骨骼肌发育等。

HEY2与SFRP4在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨HEY2和SFRP4在子宫内膜癌(UCEC)中的表达及临床意义。方法通过GEO数据库获取子宫内膜癌表达芯片GSE106191,采用R语言“limma”包进行差异分析,利用GEPIA数据库分析HEY2和SFRP4基因在UCEC中的表达水平,对差异基因进行相关性分析及功能富集分析,利用UALCAN数据库分析子宫内膜癌中的不同临床分期中的表达情况。通过STRING数据库(https://cn.string-db.org/)对低表达基因进行互作分析,并用Cytoscape分析基因间的相关性,选取本院收治的UCEC组织40例作为子宫内膜癌组,同期行子宫切除术的正常子宫内膜组织标本15例为对照组。免疫组化法测定HEY2和SFRP4蛋白的表达,比较两组的表达差异,并采用GEPIA数据库对HEY2和SFRP4在UCEC患者中进行预后分析。结果GEO数据库筛选差异基因,其中HEY2和SFRP4在UCEC中低表达,免疫组化结果与其一致,部分差异基因之间存在显著正相关,且差异基因主要富集在muscle organ development以及乳腺癌等肿瘤相关通路中。HEY2和SFRP4在UCEC不同临床分期与正常组相比具有显著差异,且SFRP4在UCEC患者中低表达组总生存率低。结论UCEC组织中HEY2与SFRP4表达下调,且与预后有关,SFRP4可能作为UCEC有价值的预后标志物。

Hey,考神君

考神君一直以为,自己的青春和周围所有人一样,就是老老实实学习,然后争取中考拿个好成绩。直到……第十八卷突如其来炎褚栩心满意足地移动鼠标,关掉贴吧的页面,苏子莫那副气得张口结舌的模样,连同贴吧回复里那句＂跟男神表白＂一起汹涌于他的脑海。炎褚栩发现自己莫名其妙地心情大好。他双手覆脸,心想：情绪好乱,不能这样,得刷刷题冷静一下。他转身朝书架上看去,忽觉哪里不对,心里一凉,忙＂噔噔噔＂地冲下楼。＂哎哟小祖宗,你这是要拆楼梯哦。＂正端着汤从厨房走出来的母亲宠溺又嗔怪地白了他一眼。

Hey,Just Read for Fun

Apple Moves In on Your Wallet [1]With the iPod,iTunes,iPhone,iPad, and iMac,Apple is the most powerful tech company in the world.It’s also the No.1 music retailer in the U.S.and among

Alder Hey伤员拣别分类中疼痛评分的有效性

目的:对将一种新的疼痛评定手段AlderHey伤员拣别分类中疼痛评分(AHTPS)应用于遭受意外或急诊(A&E)患儿以进行拣别分类的可靠性和有效性进行评估。方法:由于现有工具无法满足需要,且在伤员拣别分类时应用自评评分的可靠性较低,故而研究出一种新的行为观察性疼痛评定标准。本研究对1所较大儿科A&

Hey,考神君

第十五卷 开战吧,数学 烦恼这件事儿,每个人都逃不了。 比如说此时,炎褚祤望着被各式糖果色信封塞得满满当当的抽屉,耳朵里塞满了安小藤夸张的大笑;比如说每天,苏子莫望着成沓的数学卷,抽泣道：＂青春,为何你一点都不精彩？＂

Hey!Say!JUMP 难以割舍的飞翔

Hey!Say!JUMP刚刚在9月21日发行了新单曲《MagicPower》，有梦就要做，有天空就要去翱翔，平成魔力正在不可阻挡的蔓延！9款魅力四射、趣事连连的男生谁是你的心头好？

小红书测试新产品“hey”

目前打开小红书APP后,点击左上角圆圈可以发现小红书正在测试短视频新产品'hey'。从目前的设计看起来,用户通过APP可以实现3秒钟快速发布短视频打卡生活的体验,具有'学习打卡、健身打卡、心情打卡、减肥打卡、早餐打卡、自拍打卡、败家打卡'等场景,配以动态贴纸.

Hey,Big Spenders

AT the turn of the century well-off Nigerians struggled to shop in style Most had to jostle in local markets to buy food or travel to the United Kingdom. the United States or Middle East to replenish their wardrobes. Then in 2005 the Palms Shopping Mall opened its doors in Lagos＇ affluent Lekki Peninsula in the commercial capital＇s southeast.

基于Midkine/Notch2/Hey1信号通路探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病大鼠的抗炎作用

目的:探讨二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中肝素结合因子(Midkine)/跨膜受体蛋白(Notch2)/Hey1信号通路中的影响及其抗炎的分子机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg^(-1)·d^(-1))和γ-分泌酶抑制剂组(Notch1通路抑制剂,DAPT),每组10只。以烟熏联合脂多糖(LPS)法制备COPD大鼠模型。二陈汤加味各干预组灌胃(ig)给药;DAPT组ig DAPT(0.02 g·kg^(-1));正常组及模型组ig等体积生理盐水。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中Midkine、中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)、大鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)、大鼠CXC趋化因子5(CXCL5)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)和核转录因子-κB(NF-κB)p65的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达;免疫组化(IHC)检测大鼠肺组织中Midkine、Notch2和Hey1蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5、NE和NF-κB p65含量均显著升高(P<0.01);肺组织Midkine、Notch2和Hey1 mRNA和蛋白表达均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,二陈汤加味中、高剂量组和DAPT组BALF中Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5和NF-κB p65含量均显著减少(P<0.01);Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能是通过下调Midkine、Notch2和Hey1 mRNA表达,抑制Midkine、CINC-1、MDC、CXCL5释放有关。

Hey1表达对BMP-9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨分化及增殖影响

目的探讨Notch信号通路重要靶点Hey1表达水平改变对BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化与增殖的影响。方法构建过表达Hey1慢病毒LV-Hey1、抑制Hey1表达慢病毒LV-sh Hey1,分别感染C3H10T1/2细胞干预Hey1表达水平,以LV-Blank(空质粒)感染C3H10T1/2细胞作为对照;以荧光显微镜对慢病毒感染效果、实时荧光定量PCR以及Western blot对Hey1表达水平进行验证,筛选不同Hey1表达水平的稳定细胞系。用含BMP-9的条件培养基诱导不同Hey1表达水平的C3H10T1/2细胞(分别为BMP-9+C3H10T1/2组、BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组、BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组),以正常培养基培养的细胞作为对照(C3H10T1/2组、C3H10T1/2-Blank组)。培养后48 h,实时荧光定量PCR及Western blot测定成骨分化相关转录因子Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平;4、5、6、7 d行MTT检测及4、5、10 d行流式细胞仪测定细胞增殖能力;4、7 d时ELISA测定细胞ALP表达水平并行染色观察。结果成功建立不同Hey1表达水平稳定细胞系。成骨方面,各时间点与BMP-9+C3H10T1/2组比较,BMP-9诱导下Hey1过表达的BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组细胞Runx2、骨桥蛋白、骨钙素m RNA及蛋白表达水平以及成骨分化标志物ALP含量均显著增加(P<0.05),抑制Hey1表达的BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组细胞以上指标均显著降低(P<0.05)。对细胞增殖活力影响方面,与BMP-9+C3H10T1/2组比较,BMP-9+C3H10T1/2-Hey1组MTT检测吸光度(A)值及细胞G2+S期百分比均提高(P<0.05);而抑制Hey1表达BMP-9+C3H10T1/2-sh Hey1组以上指标均降低(P<0.05)。结论 Hey1表达是BMP-9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化重要环节,同时影响细胞早期增殖。

养心汤对Hey诱导内皮损伤大鼠血管舒张功能的影响

目的观察养心汤对Hey诱导内皮损伤大鼠血管舒张功能的影响方法雄性SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、养心汤组、叶酸组,每组10只空白组给予普通饲料,其余4组给予含3%蛋氨酸饲料喂养12周,复制高同型半胱氨酸血症血管内皮损伤模型第13周全部大鼠给予常规普通饲料喂养同时进行干预,模型组和空白组大鼠给予常规等容积蒸饱水灌胃,养心汤组给予养心汤浸膏2.34g/(kg•d)灌胃,叶酸组给予叶酸1.8mg/(kg•d)灌胃,连续给药4周;第16周末,大鼠麻醉称重取材,ELISA法检测血清NO、ET-1水平;离体血管环检测大鼠胸主动脉血管舒张功能:结果与模型组比较,养心汤能够增加血清NO,降低ET-1含量;改善内皮依赖性血管舒张功能,结论养心汤能够降低ET-1、上调NO水平,增加内皮依赖性血管舒张功能,保护血管内皮。

HEY转录因子的研究进展

Hey属于bHLH(碱性螺旋-环-螺旋)转录因子,具有bHLH和Orange两个结构域。Hey蛋白是Notch信号通路的直接靶基因,在发育决定中起着很重要的作用,例如神经系统、骨骼、骨骼肌、血管、心脏等的发育。研究Hey的发育调控的机制,可以帮助我们更好地理解它们的生物学功能及其在临床诊断和治疗中的重要作用。

Hey1基因参与调控BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化

目的:观察发状分裂相关增强子Hey1在骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞(MSCs)C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:包装Hey1、BMP9以及GFP的过表达慢病毒,并分别作用于C3H10T1/2细胞,RT-PCR和Western blot检测Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒是否包装成功,碱性磷酸酶(ALP)检测早期成骨指标ALP的变化,茜素红S染色检测晚期成骨指标钙盐沉积,MTT检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞增值的影响,流式细胞术检测Hey1对BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期的影响。结果:Hey1、BMP9以及GFP的慢病毒包装成功;在成骨分化早期,过表达Hey1基因可促进BMP9调控的C3H10T1/2细胞的成骨分化与增殖;在成骨分化晚期,过表达Hey1基因可促进BMP9诱导的C3H10T1/2细胞的成骨分化,并将BMP9调控的C3H10T1/2细胞周期阻滞在G1期。结论:Hey1基因可参与调控BMP9诱导的小鼠C3H10T1/2细胞的早晚期成骨分化,并对细胞的增殖与周期有一定的影响。