人参多糖的分离纯化及其对UVB致皮肤损伤的保护作用

以药食同源中药材人参为原材料,通过超声辅助热水法提取人参多糖(Ginseng polysaccharides,GPS),经酶解法去除淀粉和蛋白质,再经DEAE-52纤维素柱层析分离纯化得到精制人参多糖(GPS-1)。通过高效凝胶渗透色谱、红外光谱和核磁共振波谱测定了GPS-1的相对分子质量、单糖构成和结构特征,另外研究了GPS-1对人皮肤成纤维细胞(Human skin fibroblasts,HFF-1)存活率和HFF-1中活性氧(Reactive oxygen,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathion peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、金属蛋白酶1(Metalloproteinase 1,MMP-1)和金属蛋白酶9(Metalloproteinase 9,MMP-9)的影响。结果表明,GPS-1为均一性多糖,多糖纯度为95.13%,重均分子量为2.104 kDa,由α-D-葡萄糖、α-D-半乳糖醛酸、α-D-阿拉伯糖、α-D-岩藻糖、α-D-核糖、β-D-甘露糖和β-D-阿拉伯糖构成。GPS-1可保护UVB照射下的HFF-1细胞活性,质量浓度为200μg/mL的GPS-1溶液即可显著抑制MMP-1和MMP-9的表达(P<0.01),显著提升SOD和GSH-Px的含量(P<0.01),显著降低ROS和MDA的含量(P<0.01),为人参多糖的分离纯化以及在开发抗衰老产品的应用提供了科学依据。

重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化及抗炎活性评价

试验旨在探究重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力,并采用IFN-γ诱导的人皮肤成纤维细胞(HFF-1)炎症模型评价其抗炎作用。首先,以谷胱甘肽(GSH)作为对照,评价不同质量浓度重组贻贝黏蛋白的体外抗氧化能力。此外,采用不同浓度的重组贻贝黏蛋白或不同浓度IFN-γ及IFN-γ(10 ng/mL)+重组贻贝黏蛋白(30μg/mL)处理HFF-1细胞,动态观察细胞增殖、肿瘤坏死因子(TNF-α)的释放以及重组贻贝黏蛋白对炎性细胞因子白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)和人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC)表达的影响。结果表明:重组贻贝黏蛋白具有较强的还原力,主要对1,1-二苯基-^(2-)三硝基苯肼自由基(·DPPH)和羟自由基(·OH)的清除起作用,而对超氧阴离子(·O^(2-))几乎不起作用。此外,重组贻贝黏蛋白显著促进细胞增殖,且重组贻贝黏蛋白的加入可在蛋白水平和mRNA水平显著抑制IFN-γ诱导的IL-6、IL-8和MDC的表达(P≤0.05)。总之,重组贻贝黏蛋白可一定程度上发挥抗氧化和抗炎作用,从而促进伤口愈合。这均与重组贻贝黏蛋白可清除·DPPH和·OH等自由基,具有较强的还原力以及对IFN-γ诱导的HFF-1细胞促炎介质有抑制作用有关。

探讨芦丁对急性软组织损伤的治疗作用

目的:本研究旨在探讨芦丁在急性软组织损伤治疗中的潜在作用。方法:分别使用人成纤维细胞(HFF-1)和成肌细胞(C2C12)通过划痕法和D-半乳糖法建立了体外损伤模型。实验分成三组:空白组,模型组(进行损伤造模),以及芦丁组(芦丁预处理)。我们采用ELISA检测了不同组细胞上清液中IL-1β、IL-6和PGE-2的表达水平。此外,我们还评估了芦丁的细胞毒性和对细胞增殖活性的影响。结果:芦丁在浓度为10,20 μmol/L时对HFF-1和C2C12细胞的增殖活性无明显影响,而80 μmol/L的浓度明显抑制了细胞增殖。ELISA检测结果显示,相对于模型组,芦丁组降低了损伤细胞中IL-1β、IL-6和PGE-2的表达水平。结论:本研究表明,芦丁对急性软组织损伤具有潜在的治疗作用。芦丁能够降低损伤细胞中炎症因子的表达水平,减轻炎症反应,促进软组织的修复。

三七不同部位提取物体外抗氧化功效研究

目的:研究三七不同部位提取物的抗氧化功效,为三七化妆品原料的开发提供实验依据。方法:采用超氧阴离子自由基清除活性实验及羟自由基清除活性实验检测三七根、茎、叶、花提取物对超氧阴离子自由基及羟自由基的清除活性,依据自由基清除率计算半抑制浓度(inhibitory concentration 50,IC50)。采用H;O;诱导人皮肤成纤维细胞(human foreskin fibroblasts, HFF-1)氧化损伤模型,以50 mg·L;的三七根、茎、叶、花提取物分别作用HFF-1细胞,培养24 h后观察细胞形态;MTT法测定细胞活力;微板法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的活力及还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量;酶联免疫吸附测定实验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白(type I collagen, ColⅠ)和ColⅢ的含量。结果:三七根、茎、叶、花提取物对超氧阴离子自由基及羟自由基均具有清除作用;与模型组比较,三七根、茎、叶、花提取物均能不同程度的提升细胞活力及SOD活力(P<0.01),提高GSH及ColⅠ、ColⅢ的水平(P<0.05),降低细胞内MDA的含量(P<0.05),改善氧化损伤模型细胞的形态学变化,且三七根提取物组作用效果最为显著。结论:三七根、茎、叶、花提取物均具有明显的抗氧化作用,其中三七根提取物的抗氧化功效最好。