玻璃酸钠通过干扰HGF/c-Met介导的MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖

目的 分析玻璃酸钠影响肝细胞生长因子(HGF)受体(c-Met)介导的人胃癌(GC)AGS细胞增殖及其作用机制。方法 应用不同浓度的玻璃酸钠作用于AGS细胞。应用HGF激活c-Met。细胞增殖与毒性检测试剂盒(CVTK)测定细胞增殖;Western印迹测定c-Met酪氨酸(Tyr)1234位点磷酸化(p-c-Met-Y1234)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-MEK)、磷酸化细胞外调节激酶(p-ERK)1/2、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)相对蛋白表达。结果 HGF明显促进AGS细胞增殖,并诱导细胞内p-c-Met(Y1234)、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-PI3K、p-AKT明显高表达(P<0.05);不同浓度玻璃酸钠作用细胞后,由HGF引起的细胞增殖明显受到抑制,p-c-Met(Y1234)、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-PI3K、p-AKT表达水平显著降低(P<0.05)。结论 璃酸钠通过抑制人AGS细胞的c-Met酪氨酸磷酸化,调控HGF/c-Met介导的MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路,进而抑制人AGS细胞的增殖。

miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭

目的:探究miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法:收集承德医学院附属医院2018年1月至10月收治的22例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,乳腺癌细胞系(MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-453)和正常乳腺上皮细胞MCF10A来自承德医学院基础研究所,然后采用q PCR检测组织和细胞系中miR-130a-3p的表达情况;将实验分为对照组、miR-130a-3p mimics组、miR-130a-3p inhibitor组、PHA665752(MET小分子抑制剂)转染组及共转PHA665752+miR-130a-3p inhibitor组,然后采用CCK-8法和Transwell实验分别检测MCF-7细胞增殖活力、侵袭和迁移能力;WB实验检测MCF-7细胞EMT和HGF/MET信号通路相关蛋白的表达情况;此外,采用双荧光素酶报告基因检测miR-130a-3p与MET之间的靶向关系。结果:miR-130a-3p在乳腺癌组织和细胞系中呈低表达;过表达miR-130a-3p可抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;而抑制miR-130a-3p出现相反的结果。双荧光素酶报告基因结果证实miR-130a-3p靶向下调MET的表达水平,且miR-130a-3p负调控HGF/MET信号通路的表达;进一步实验证明,miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移和EMT。结论:miR-130a-3p通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7细胞EMT过程,进而抑制MCF-7细胞侵袭转移。

华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长及HGF/c-Met信号通路的影响

目的:观察华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长的影响,并探讨华蟾素对HGF/c-Met信号通路的影响。方法:利用小鼠肝癌细胞实体瘤模型,设立3个处理组,即荷瘤模型组、5-Fu组和华蟾素组。分别在不同时间切除肿瘤,计量肿瘤的体积,进而观察华蟾素对小鼠肿瘤生长的影响。采用3种不同的处理方法分别处理肝癌细胞,通过Western blot检测细胞中HGF和c-Met蛋白的表达情况;ELISA检测荷瘤小鼠血清中HGF表达。结果:5-Fu组和华蟾素组小鼠肿瘤生长缓慢,肿瘤体积均明显低于荷瘤模型组(P<0.05);5-Fu和华蟾素处理的肝癌细胞HGF和c-Met蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与荷瘤模型组比较,5-Fu组和华蟾素组小鼠血清HGF的表达水平分别降低75%和65%(P<0.05)。结论:华蟾素可以抑制HGF/c-Met通路蛋白的表达,抑制荷瘤小鼠肝癌的生长。

HGF/c-met信号通路对乳腺癌上皮-间充质转化的影响研究

目的检测乳腺组织中肝细胞生长因子(HGF)、c-met、上皮钙黏素(E-cadherin)、β-联蛋白(β-catenin)、Vimentin、Snail等上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达量,探讨HGF/c-met信号通路与乳腺癌EMT的关系。方法选取80例乳腺癌患者和80例纤维腺瘤患者的手术标本进行研究,分别作为乳腺癌组及纤维腺瘤组,另选取乳腺癌组患者对应的正常组织(肿瘤边缘>5 cm区域)作为正常乳腺组(80例)。采用免疫组化法检测并比较3组标本中HGF、c-met、E-cadherin、β-catenin、Vimentin、Snail表达量,再比较c-met含量与患者临床特征及EMT相关蛋白表达量的关系。结果乳腺癌组组织中HGF、c-met、Vimentin、Snail表达量均高于纤维腺瘤组及正常乳腺组,E-cadherin、β-catenin表达量均低于纤维腺瘤组及正常乳腺组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);正常乳腺组HGF表达量高于纤维腺瘤组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者发生淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、组织学分级为低分化的比例均高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者E-cadherin和β-catenin表达量均明显低于c-met低表达患者,Vimentin和Snail表达量均明显高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论HGF/c-met信号通路可能通过下调上皮黏附分子、上调间充质分子标志物的表达,促进乳腺癌细胞EMT。

舌鳞癌微环境中HGF/C-Met信号通路对CD1a^+DC的抑制作用

目的:通过对肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、C-Met、CD1a在舌鳞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)、舌癌前病变及舌正常组织中表达的研究,探讨在舌鳞癌中HGF/C-Met信号通路对CD1a阳性树突状细胞(dendritic cells,DC)的影响。方法:随机选取30例舌鳞癌、10例舌癌前病变及10例舌正常组织的石蜡标本,应用免疫组织化学SP法检测舌鳞癌、舌癌前病变及舌正常组织中HGF、C-Met及DC标志物CD1a的表达并分析其相互关系。采用SPSS 13.0软件包对数据进行秩转换的非参数检验以及Spearman等级相关分析。结果:HGF、CMet和CD1a在舌鳞癌中的表达水平较舌癌前病变和舌正常组织高(P均<0.01);在舌鳞癌中,C-Met的表达水平与CD1a的表达水平呈负相关(rs=-3.769)。结论 :舌鳞癌患者局部微环境中存在一定的免疫反应,HGF/C-Met信号通路可抑制DC对舌鳞癌组织的浸润。

HGF/c-Met信号转导通路在结直肠癌肝转移中的作用

肝转移发生是导致结直肠癌患者预后不良的最重要的原因。近年来,结直肠癌肝转移治疗的治疗效果获得了令人鼓舞的进展。HGF/c-Met信号转导通路在人体内正常细胞向恶性细胞转化、细胞运动、侵袭转移、上皮间质转化和组织再生等过程中发挥重要的作用。目前,通过对HGF/c-Met信号通路系统在结直肠癌肝转移中的作用机制的深入研究,发现HGF/c-Met信号转导通路系统在结直肠癌肝转移发生发展过程中发挥着重要的作用,并为研发有效的HGF/c-Met抑制剂提供了新的依据,一系列HGF/c-Met信号通路抑制剂的相继出现,为结直肠癌肝转移患者的治疗提供了新的思路。

HGF/c-Met信号通路在克唑替尼诱导不同肺癌细胞株凋亡中的作用

目的:观察克唑替尼(crizotinib)诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF/c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测克唑替尼对H1993(c-Met扩增的肺腺癌细胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞)和A549细胞的活力抑制情况;采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率;采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平,同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果:MTT结果表明克唑替尼作用72 h后,H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长,细胞凋亡率呈时间依赖性增加(P<0.05)。Western blot检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中,p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论:初步证实HGF/c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。

MACC-1通过HGF/c-Met信号通路调节上皮间质转化及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)通过调控HGF/c-Met信号通路对上皮间质转化(EMT)的调节作用,以及对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法构建针对MACC1、c-Met的shRNA质粒载体(MACC1-shRNA、c-Met-shRNA)和阴性对照质粒(shNC),脂质体法转染人胃癌MKN28细胞株。采用Western blotting及Real-Time PCR技术检测转染前后MACC1、c-Met、EMT相关标志物(E-cadherin、N-cadherin)蛋白和mRNA表达变化。通过伤口愈合实验、Transwell侵袭实验检测MKN28细胞迁移和侵袭能力的变化。结果与空白对照组相比,MACC1-shRNA组MACC1、c-Met蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.01),E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均显著上调(P<0.01),N-cadherin蛋白及mRNA表达水平则显著下调(P<0.01);c-Met-shRNA组MACC1蛋白和mRNA表达无明显变化(P>0.05),EMT相关标志物表达水平与MACC1-shRNA组的变化一致。伤口愈合实验和Transwell侵袭实验结果显示:与空白对照组相比,MACC1-shRNA组和c-Met-shRNA组MKN28细胞的迁移及侵袭能力均明显被抑制(P<0.01)。结论 MACC1可能通过调控HGF/c-Met信号通路调节EMT过程,增强胃癌细胞的迁移和侵袭能力。

HGF/c-Met信号通路与胃癌相关研究进展

胃癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,主要治疗方式为手术、化疗和放疗,但是临床效果却不尽如人意。目前针对胃癌靶向治疗仍不理想,单一的靶向治疗易导致耐药及肿瘤复发,多靶点联合用药将是胃癌分子靶向治疗的一个发展趋势。本文介绍了肝细胞生长因子(HGF)/肝细胞生长因子受体(c-Met)信号转导通路参与胃癌的发生、发展和侵袭转移,是极具潜力的胃癌治疗靶点。目前研究中涌现出大量靶向该通路的药物并在临床研究中取得成果,但由于种族及胃癌亚型不同,仍然面临许多挑战。更深入的研究HGF/c-Met信号转导通路的作用机制,多渠道筛选独特分子亚型的胃癌患者用以进行针对性的靶向临床试验等可为胃癌治疗提供新的思路。

HGF/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬在肝硬化癌变进程中的作用

背景肝癌干细胞样细胞(hepatocarcinoma stem cell-like cells,CSCs)具有较强的自我更新和肿瘤发生能力,在肝硬化进展至肝癌的进程发挥关键作用.我们将肝脏Axin2+CD90+细胞鉴定为肝硬化的CSCs,并观察了HGF/Met/JN信号通路介导的细胞自噬在肝硬化进展至肝癌期间的作用.目的明确肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬在肝硬化癌变进程中的作用.方法从肝血管瘤患者中共收集8例非肝硬化手术标本;2007-09,在本院收集了18例酒精相关,30例慢性乙型肝炎相关肝硬化活检样本.这些患者随访至2015-12.来自患者的3例外科肝癌样本与酒精相关的肝硬化,通过手术收集来自乙型肝炎相关肝硬化患者的8个肝癌样本.8 wk龄雄性SD大鼠每周两次腹膜内注射50 mg/kg二乙基亚硝胺持续8 wk建立肝硬化模型.Western-blotting检测人和大鼠进行的组织自噬状态、HGF的水平及HGF/Met/JNK信号途径分子的变化.采用c-Met抑制剂EMD1214063治疗肝硬化大鼠并评估细胞增殖和凋亡,同时评估HGF/Met/JNK信号途径分子的变化.结果相较于正常肝组织对照,肝硬化患者的自噬水平显著升高(全部P<0.05),而自噬水平的下降与肝硬化进展为肝癌有关;同时,这些肝硬化异常自噬样本中HGF的产生显著增加.肝硬化肝脏根据自噬状态和HGF表达首先分层后发现p-Met、t-Met及p-JNK水平在自噬增强的Axin2阳性细胞中显著升高(全部P<0.05).治疗8 wk和11 wk后细胞增殖显著减少(全部P<0.05),而TUNEL染色的结果显示细胞的c-Met抑制剂EMD1214063对肝细胞的凋亡并无明显影响.在第8周和第11周使用来自对照和EMD1214063处理组的全肝裂解物的Western印迹分析显示p-Met、p-JNK及HGF在11 wk的大鼠中显著降低,而t-Met、p-JNK及HGF在8 wk的大鼠中显著降低.结论HGF/Met/JNK信号通路介导的细胞自噬参与到肝硬化癌变进程中,并且c-Met抑制剂能够在肝硬化进程中发挥治疗作用.

肝细胞癌中HGF/c-MET信号通路的研究进展

世界范围内肝细胞癌（HCC）的发病率和病死率都很高。尽管包括外科手术、肝脏移植和经动脉栓塞化疗在内的多种治疗方法都在不断进步,但是大部分出现了复发和晚期的患者预后仍然很差。酪氨酸蛋白酶抑制剂索菲拉尼是系统治疗晚期HCC的一个里程碑,但其延长患者生存期的作用却十分有限。后续的研究显示c-MET信号通路在促进肿瘤的生长、血管生成和转移方面有重要作用。

肝细胞生长因子/酪氨酸蛋白激酶MET 信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性分析

目的探讨分析肝细胞生长因子(HGF)/酪氨酸蛋白激酶MET(c-met)信号通路与乳腺癌侵袭转移的相关性。方法选择2018年3月至2019年3月承德医学院附属医院临床术后经病理证实的乳腺癌标本75例、乳腺纤维腺瘤标本60例以及癌旁正常乳腺组织标本50例。采用SP免疫组化法以及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组织标本HGF、c-met、β连环素(β-catenin)蛋白表达和mRNA表达情况。结果HGF[82.67%(62/75)比48.33%(29/60)比14.00%(7/50)]、c-met[86.67%(65/75)比55.00%(33/60)比20.00%(10/50)]、β-catenin[78.67%(59/75)比41.67%(25/60)比6.00%(3/50)]在乳腺癌组织、乳腺纤维腺瘤组织以及癌旁正常乳腺组织中的表达均差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中HGF、c-met mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),其中乳腺癌相对表达量最高、乳腺纤维腺瘤相对表达量次之;而乳腺癌、乳腺纤维腺瘤以及癌旁正常乳腺组织中β-catenin mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。HGF表达阳性率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小、ER表达、HER-2表达有关(P<0.05)。c-met蛋白表达阳性率与病人肿瘤TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin蛋白表达异常率与病人TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小密切相关(P<0.05)。结论乳腺癌组织中HGF、c-met蛋白高表达而β-catenin蛋白异常表达,且HGF/c-met信号通路及β-catenin蛋白与乳腺癌侵袭转移密切相关。

银杏叶提取物调节TGF-β1/HGF信号通路对单侧输尿管梗阻小鼠肾纤维化的影响

目的:探究银杏叶提取物(GBE)调节转化生长因子β1(TGF-β1)/肝细胞生长因子(HGF)信号通路对单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾纤维化的影响。方法:采用单侧输尿管结扎术法构建UUO小鼠模型,造模成功后将小鼠随机分为模型组、厄沙贝坦组(20 mg/kg)、GBE低、中、高剂量组(25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg),每组10只;另取10只小鼠为假手术组(仅分离左侧输尿管但不结扎)。检测肾功能指标:β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏组织病理变化;马森(Masson)染色观察肾脏组织纤维化情况;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1表达;Western blot检测肾脏组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、α-SMA、TGF-β1、细胞信号转导分子2(Smad2)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、HGF蛋白表达。结果:相比于假手术组,模型组小鼠肾脏组织肾小管腔扩张或萎缩,炎症细胞浸润,胶原纤维沉积明显,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显升高,HGF蛋白表达明显下降(P<0.05);相较于模型组,厄沙贝坦组和GBE低、中、高剂量组小鼠肾组织病理损伤减轻,胶原沉积纤维减少,NAG、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6、肾纤维化水平、Col-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1、p-Smad2/Smad2表达明显降低,HGF蛋白表达明显升高(P<0.05),其中厄沙贝坦组和EG高剂量组改善最为显著。结论:GBE能减轻肾功能损伤,抑制炎症反应,改善UUO小鼠的肾纤维化,其作用机制可能与调节TGF-β1/HGF信号通路平衡有关。

MACC1、HGF/c-Met和EMT在促进恶性肿瘤侵袭转移机制中的相关性研究

结肠癌转移相关基因1（metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1）是一个在多种恶性肿瘤中调控肿瘤生长和转移的重要基因.MACC1通过调控肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）/间质向上皮转化因子（mesenchymal-epithelial transition factor,c-Met）信号通路诱导上皮向间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）,促进肿瘤细胞的迁移、浸润和转移.因此,本文将MACC1、HGF/c-Met和EMT三者结合在一起,探索三者与肿瘤侵袭转移的相关性.

MACC1与肿瘤的研究进展

恶性肿瘤的发生严重威胁着人类的健康及生存,对于其发病机制及转移机制仍然不是十分清楚。结肠癌转移关联基因1 (Metastasis-Associated in Colon Cancer 1,MACC1)是2009年发现的与结肠癌的发生密切相关的基因,不仅诱导肿瘤的发生、转移,且与肿瘤患者的预后及生存率明显相关,这主要与MACC1调节HGF/c-Met信号通路有关。在未来,MACC1有望成为肿瘤基因治疗的新靶点。本篇结合国内外的文献,就MACC1在肿瘤发生发展及转移过程的研究进展作一综述。

HGF／c-Met信号传导通路对肿瘤细胞放射敏感性影响的研究进展

近十余年来，信号传导通路在调控肿瘤细胞放射敏感性方面的研究已经成为肿瘤放射生物学的研究热点之一，且相关研究成果已经应用于临床，如局部晚期头颈部磷癌放疗同期联合应用EGFR抑制剂西妥昔单抗能提高其LC率和OS率［1］。目前，HGF／c？Met信号传导通路在调控肿瘤细胞放射敏感性过程中所起作用的研究也日益受到人们关注。为此，本文拟就HGF／c？Met的结构和生物学功能及其在调控肿瘤细胞放射敏感性过程中所起的重要作用作一综述。

miR-26a可通过HGF-cMet信号通路来抑制肿瘤血管生成

复旦大学钦伦秀教授课题组证实一种名为MicroRNA-26a（miR-26a）的miRNA通过靶向HGF-cMet信号通路，抑制了肝癌的血管发生．相关研究论文已被《Hepatology》接受并在线发布．

结肠癌转移相关因子1在恶性肿瘤的研究

结肠癌转移相关基因1(Metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)是在对结肠癌的研究中新现并证实的基因,许多学者今年来做了大量关于MACC1与多种恶性肿瘤的研究,取得一定成果,受到很多关注,故本文就此进行综述。