eEF1A1通过HGF/c-MET通路调控肝癌细胞的迁移和侵袭能力

目的探讨真核翻译延长因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1α1,eEF1A1)对肝癌细胞的侵袭、迁移和HGF/c-MET通路的影响及作用机制。方法采用qRT-PCR和Western bolt检测肝癌细胞和组织中eEF1A1表达。构建eEF1A1敲除载体转染HLF和Alex肝癌细胞,CCK-8和Transwell实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。KM plotter分析患者的总体预后。通过eEF1A1基因敲除的转录组测序,Western bolt检测HGF、c-MET和p-c-MET蛋白的表达。裸鼠皮下成瘤实验检测eEF1A1对肝癌肿瘤的影响。结果eEF1A1在肝癌细胞和组织中显著升高,敲低eEF1A1能抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭。eEF1A1高表达与肝癌的不良预后相关。此外,敲除eEF1A1显著降低HGF和p-c-MET蛋白水平,抑制肝癌肿瘤的生长,但c-MET蛋白水平无显著差异。结论eEF1A1通过抑制HGF/c-MET信号通路抑制肝癌细胞迁移和侵袭。

HGF/c-Met通路对肿瘤细胞的调控及与舌癌的相关性研究进展

HGF/c-Met通路的过度激活对肿瘤细胞调控机制具有重要作用,可促进肿瘤发生、发展的全过程。近年来,针对HGF/c-Met通路的基础和临床研究已经成为肿瘤研究的热点之一。本文对HGF/c-Met通路促进肿瘤发生发展的相关机制及其与舌癌相关性的研究进展做一综述。

HGF/c-MET通路在癌症中的研究进展

近年来,HGF/c-MET信号通路正成为学术界研究的热点,HGF/c-MET通路在肿瘤的发生发展中扮演着非常重要的角色,并参与肿瘤的侵袭和转移。该通路的标志特征是HGF与其配体c-MET蛋白的结合引起一系列信号传导的酶促反应[1],并由c-MET下游停泊蛋白-生长因子受体结合蛋白2（GRB2）及接头蛋白1（GAB1）[2]的激活和该信号通路与其他信号通路间的交联而起作用[1,3]。

黄芪建中汤对脾胃虚寒证胃溃疡大鼠炎症因子及HGF/c-Met信号通路的影响

目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒证胃溃疡大鼠炎症因子及HGF/c-Met信号通路的影响。方法将60只大鼠随机分为4组,即正常组、模型组、黄芪建中汤组[黄芪建中汤6.8 g/(kg·d)]、奥美拉唑组[奥美拉唑肠溶胶囊4.2 mg/(kg·d)],每组15只大鼠。正常组除外,其他组采用耗气破气法结合饥饱失常法进行大鼠脾胃虚寒证模型造模,再采用冰醋酸法建立大鼠胃溃疡模型。比较各组大鼠体质量、溃疡指数;HE染色观察大鼠胃组织病理学变化;采用酶联免疫吸附法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫组化法检测胃组织中肝细胞生长因子(HGF)、肝细胞生长因子受体(c-Met)表达;荧光定量PCR检测胃组织HGF、c-Met m RNA水平。结果与正常组相比,模型组大鼠体质量降低,溃疡指数升高,IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高,HGF升高,HGF、c-Met m RNA升高(P<0.05);与模型组相比,黄芪建中汤组和奥美拉唑组大鼠体质量升高,溃疡指数降低,IL-6、IL-1β、TNF-α降低,HGF升高,HGF、c-Met mRNA升高(P<0.05)。结论黄芪建中汤可以通过抑制炎症因子、调节HGF/c-Met通路的表达促进胃黏膜修复。

玻璃酸钠通过干扰HGF/c-Met介导的MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞增殖

目的 分析玻璃酸钠影响肝细胞生长因子(HGF)受体(c-Met)介导的人胃癌(GC)AGS细胞增殖及其作用机制。方法 应用不同浓度的玻璃酸钠作用于AGS细胞。应用HGF激活c-Met。细胞增殖与毒性检测试剂盒(CVTK)测定细胞增殖;Western印迹测定c-Met酪氨酸(Tyr)1234位点磷酸化(p-c-Met-Y1234)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶(p-MEK)、磷酸化细胞外调节激酶(p-ERK)1/2、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)相对蛋白表达。结果 HGF明显促进AGS细胞增殖,并诱导细胞内p-c-Met(Y1234)、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-PI3K、p-AKT明显高表达(P<0.05);不同浓度玻璃酸钠作用细胞后,由HGF引起的细胞增殖明显受到抑制,p-c-Met(Y1234)、p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-PI3K、p-AKT表达水平显著降低(P<0.05)。结论 璃酸钠通过抑制人AGS细胞的c-Met酪氨酸磷酸化,调控HGF/c-Met介导的MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路,进而抑制人AGS细胞的增殖。

肺癌细胞中HGF/c-Met信号通路的异常调控及其靶向药物研究进展

c-MET是原癌基因c-MET编码的蛋白产物,是肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)受体,具有络氨酸激酶活性。c-Met的异常表达与肺癌的发生发展有着密切的关系。HGF与其c-Met受体结合后,活化c-Met酪氨酸激酶活性,能促进多种肿瘤细胞包括肺癌细胞的增殖、新生血管生成及肿瘤侵袭和迁移。针对HGF/c-Met信号转导通路的靶向治疗是目前肺癌治疗的新热点。本文将就HGF/c-Met信号转导通路在肺癌中异常调控及其靶向药物在肺癌中的研究进展进行综述。

HGF/c-met传导通路在子宫内膜癌发生发展中的作用及意义

目的检测HGF/c-met传导通路对Survivin、XIAP表达的影响,探讨HGF/c-met通路在子宫内膜癌发生发展中的作用机制。方法培养ER表达水平不同的子宫内膜癌细胞系HEC-1B(ER低表达)和Ishikawa(ER高表达),通过MTT法检测不同浓度HGF对两种细胞增殖率的影响;AnnexinV-FITC法检测不同浓度HGF对细胞凋亡率的影响。Westem Blot检测Survivin及XIAP蛋白的表达水平。结果 HGF可促进子宫内膜癌细胞的增殖,在80 n咖L内具有剂量依赖性,在72 h内具有时间依赖性(P<0.05);当HIGF浓度为40 ng/mI时,HEC-1B细胞24 h增值率达到(87.0±0.02)%,为最适诱导浓度。Survivin、XIAP mRNA及蛋白的表达随着HGF浓度的增高而上调,上调作用具有剂量效应关系。HGF在ER低表达的HEC-1B细胞中作用明显高于Ishikawa细胞,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 HGF/c-met传导通路的激活可促进子宫内膜细胞增殖,抑制细胞凋亡,HGF/c-met可能是调控子宫内膜癌发生发展的分子靶点。

华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长及HGF/c-Met信号通路的影响

目的:观察华蟾素对荷瘤小鼠肝癌生长的影响,并探讨华蟾素对HGF/c-Met信号通路的影响。方法:利用小鼠肝癌细胞实体瘤模型,设立3个处理组,即荷瘤模型组、5-Fu组和华蟾素组。分别在不同时间切除肿瘤,计量肿瘤的体积,进而观察华蟾素对小鼠肿瘤生长的影响。采用3种不同的处理方法分别处理肝癌细胞,通过Western blot检测细胞中HGF和c-Met蛋白的表达情况;ELISA检测荷瘤小鼠血清中HGF表达。结果:5-Fu组和华蟾素组小鼠肿瘤生长缓慢,肿瘤体积均明显低于荷瘤模型组(P<0.05);5-Fu和华蟾素处理的肝癌细胞HGF和c-Met蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与荷瘤模型组比较,5-Fu组和华蟾素组小鼠血清HGF的表达水平分别降低75%和65%(P<0.05)。结论:华蟾素可以抑制HGF/c-Met通路蛋白的表达,抑制荷瘤小鼠肝癌的生长。

HGF/c-met信号通路对乳腺癌上皮-间充质转化的影响研究

目的检测乳腺组织中肝细胞生长因子(HGF)、c-met、上皮钙黏素(E-cadherin)、β-联蛋白(β-catenin)、Vimentin、Snail等上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达量,探讨HGF/c-met信号通路与乳腺癌EMT的关系。方法选取80例乳腺癌患者和80例纤维腺瘤患者的手术标本进行研究,分别作为乳腺癌组及纤维腺瘤组,另选取乳腺癌组患者对应的正常组织(肿瘤边缘>5 cm区域)作为正常乳腺组(80例)。采用免疫组化法检测并比较3组标本中HGF、c-met、E-cadherin、β-catenin、Vimentin、Snail表达量,再比较c-met含量与患者临床特征及EMT相关蛋白表达量的关系。结果乳腺癌组组织中HGF、c-met、Vimentin、Snail表达量均高于纤维腺瘤组及正常乳腺组,E-cadherin、β-catenin表达量均低于纤维腺瘤组及正常乳腺组,差异均有统计学意义(P﹤0.05);正常乳腺组HGF表达量高于纤维腺瘤组,差异有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者发生淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、组织学分级为低分化的比例均高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。c-met高表达患者E-cadherin和β-catenin表达量均明显低于c-met低表达患者,Vimentin和Snail表达量均明显高于c-met低表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论HGF/c-met信号通路可能通过下调上皮黏附分子、上调间充质分子标志物的表达,促进乳腺癌细胞EMT。

舌鳞癌微环境中HGF/C-Met信号通路对CD1a^+DC的抑制作用

目的:通过对肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、C-Met、CD1a在舌鳞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)、舌癌前病变及舌正常组织中表达的研究,探讨在舌鳞癌中HGF/C-Met信号通路对CD1a阳性树突状细胞(dendritic cells,DC)的影响。方法:随机选取30例舌鳞癌、10例舌癌前病变及10例舌正常组织的石蜡标本,应用免疫组织化学SP法检测舌鳞癌、舌癌前病变及舌正常组织中HGF、C-Met及DC标志物CD1a的表达并分析其相互关系。采用SPSS 13.0软件包对数据进行秩转换的非参数检验以及Spearman等级相关分析。结果:HGF、CMet和CD1a在舌鳞癌中的表达水平较舌癌前病变和舌正常组织高(P均<0.01);在舌鳞癌中,C-Met的表达水平与CD1a的表达水平呈负相关(rs=-3.769)。结论 :舌鳞癌患者局部微环境中存在一定的免疫反应,HGF/C-Met信号通路可抑制DC对舌鳞癌组织的浸润。

HGF/c-Met信号通路及其调控基因MACC-1与结肠直肠癌转移的关系

结肠直肠癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，其发病率近年来有着迅猛增高的趋势。在欧美国家，2007年其发病率在恶性肿瘤中居第4位，2008年其发病率和死亡率均位列第3位；在我国其发病率也呈迅猛上升趋势，就全国范围而言，已居恶性肿瘤的第4位，而在高发城市像上海市已高居恶性肿瘤的第2位，并且发病率每年以3．9％的速度递增，成为威胁人类生命和健康不容忽视的疾病。

不同低氧训练模式对肌卫星细胞NO/HGF/c-Met激活通路的影响

目的:以骨骼肌卫星细胞NO/HGF/c-Met激活通路为切入点,研究不同低氧训练对骨骼肌蛋白质合成的影响。方法:50只雄性SD大鼠随机平均分为低住安静组(LC)、低住低练组(LL)、高住安静组(HC)、高住低练组(HL)及高住高训低练组(HHL),实验4周后检测股四头肌卫星细胞激活通路中HGF、c-Met、MAPK蛋白表达水平及NO的含量。结果:与其他各组相比,HHL组大鼠股四头肌蛋白质含量显著减少(P<0.05),而其NO水平显著高于LC和LL组(P<0.05),各组HGF及c-Met水平没有显著差异(P>0.05);另外,HHL组MAPK水平显著或极显著低于LC组、LL组及HC组(P<0.05,P<0.01),同时,HL组的MAPK水平也显著低于LL组(P<0.05)。结论:高住高练低训可导致骨骼肌蛋白的丢失,其机制与肌卫星细胞NO/HGF/c-Met激活通路中HGF分泌减少及MAPK活性下降有关。

HGF/c-Met信号转导通路在结直肠癌肝转移中的作用

肝转移发生是导致结直肠癌患者预后不良的最重要的原因。近年来,结直肠癌肝转移治疗的治疗效果获得了令人鼓舞的进展。HGF/c-Met信号转导通路在人体内正常细胞向恶性细胞转化、细胞运动、侵袭转移、上皮间质转化和组织再生等过程中发挥重要的作用。目前,通过对HGF/c-Met信号通路系统在结直肠癌肝转移中的作用机制的深入研究,发现HGF/c-Met信号转导通路系统在结直肠癌肝转移发生发展过程中发挥着重要的作用,并为研发有效的HGF/c-Met抑制剂提供了新的依据,一系列HGF/c-Met信号通路抑制剂的相继出现,为结直肠癌肝转移患者的治疗提供了新的思路。

HGF/SF-c-Met通路在肿瘤进展过程中的作用及其阻断的研究进展

HGF/SF-c-Met通路的过度激活在肿瘤转移过程中起着非常重要的作用,现已证实此通路的激活对肿瘤转移有着近乎全过程的促进作用。近年来,通过对HGF/SF-c-Met通路阻断来抑制肿瘤转移已经成为抗肿瘤研究的热点之一。本文综述有关HGF/SF-c-Met通路在肿瘤生长、侵袭和转移中的作用机制及对此通路抑制剂开发的研究进展。

扶正祛积汤对肺腺癌细胞HCC827埃克替尼耐药及对HGF/c-Met通路的影响

目的:观察扶正祛积汤对肺腺癌细胞HCC827埃克替尼耐药的作用,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养人非小细胞肺腺癌HCC827细胞、埃克替尼耐药株HCC827 IR细胞,检测HCC827、HCC827 IR对埃克替尼的耐药性。将埃克替尼处理的HCC827 IR细胞分为HCC827 IR+低剂量扶正祛积汤组(HCC827 IR+低剂量组)、HCC827 IR+中剂量扶正祛积汤组(HCC827 IR+中剂量组)、HCC827 IR+高剂量扶正祛积汤组(HCC827 IR+高剂量组),细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,蛋白免疫印迹(WB)法检测肝细胞生长因子(HGF)/c-Met相关蛋白表达情况。结果:与HCC827组比较,HCC827 IR组HGF、p-c-Met/c-Met、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)/PI3K、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)/Akt显著升高(P<0.05),细胞增殖抑制率及细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。与HCC827 IR组比较,HCC827 IR+低剂量组、HCC827 IR+中剂量组、HCC827 IR+高剂量组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率均增加(P<0.05),HGF、p-c-Met/c-Met、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均下降(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:扶正祛积汤可能通过抑制HGF/c-Met通路活化,抑制非小细胞肺腺癌耐药株HCC827 IR对埃克替尼的耐药性。

HGF/c-MET信号通路的抗肿瘤治疗进展

近年来,许多研究者在体外实验或者临床试验中发现肝细胞生长因子受体对许多肿瘤的发生和发展起到了关键的作用。HGF/c-MET信号通路的靶向治疗将会对这些肿瘤有效。本文对近几年来HGF/c-MET信号通路的研究进展,包括该信号通路的基本信息、在相关肿瘤中的作用、临床治疗进展和遇到的困难以及相关对策进行综述。

HGF/c-Met信号通路及其与口腔鳞癌关系研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)是目前所知生物活性最广泛的细胞因子。研究表明,肝细胞生长因子受体(hepatocyte growth factor receptor,c-Met)在多种肿瘤细胞中均有过度表达,在肿瘤发生发展中具有促增殖、侵袭和转移的生物学效应。近年HGF及其受体c-Met已成为基础及临床研究的新热点,本文就HGF/c-Met信号通路及其与口腔鳞癌关系的最新研究进展作一综述。

HGF/c-Met信号通路在克唑替尼诱导不同肺癌细胞株凋亡中的作用

目的:观察克唑替尼(crizotinib)诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF/c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测克唑替尼对H1993(c-Met扩增的肺腺癌细胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞)和A549细胞的活力抑制情况;采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率;采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平,同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果:MTT结果表明克唑替尼作用72 h后,H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长,细胞凋亡率呈时间依赖性增加(P<0.05)。Western blot检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中,p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论:初步证实HGF/c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。

HGF及其受体c-Met基因在损伤修复的马鹿茸组织中的表达特征

为了探求鹿茸损伤修复的分子机制,本试验收集了意外折断修复50 d和65 d后的鹿茸样品,利用qRT-PCR技术和免疫组织化学技术检测HGF和c-Met基因在损伤修复的鹿茸与健康鹿茸组织中的表达。结果表明,HGF及c-Met基因在损伤茸总组织中的相对表达量显著高于健康鹿茸,在茸皮、间充质、软骨和骨四个组织中,茸皮组织相对表达量最高,间充质组织的相对表达量最低;与健康鹿茸组织相比,损伤茸茸皮组织中HGF及c-Met基因的相对表达量极显著降低(P<0.01),而在损伤茸间充质组织中的相对表达量极显著增加(P<0.01),损伤茸与健康茸的软骨和骨组织相对表达量差异不显著(P>0.05)。在损伤修复过程中,HGF及c-Met基因随损伤修复进程的继续表达量也随之上升。因此,HGF及c-Met基因对马鹿茸组织损伤修复及再发育可能具有促进作用。

MACC-1通过HGF/c-Met信号通路调节上皮间质转化及其对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)通过调控HGF/c-Met信号通路对上皮间质转化(EMT)的调节作用,以及对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法构建针对MACC1、c-Met的shRNA质粒载体(MACC1-shRNA、c-Met-shRNA)和阴性对照质粒(shNC),脂质体法转染人胃癌MKN28细胞株。采用Western blotting及Real-Time PCR技术检测转染前后MACC1、c-Met、EMT相关标志物(E-cadherin、N-cadherin)蛋白和mRNA表达变化。通过伤口愈合实验、Transwell侵袭实验检测MKN28细胞迁移和侵袭能力的变化。结果与空白对照组相比,MACC1-shRNA组MACC1、c-Met蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.01),E-cadherin蛋白及mRNA表达水平均显著上调(P<0.01),N-cadherin蛋白及mRNA表达水平则显著下调(P<0.01);c-Met-shRNA组MACC1蛋白和mRNA表达无明显变化(P>0.05),EMT相关标志物表达水平与MACC1-shRNA组的变化一致。伤口愈合实验和Transwell侵袭实验结果显示:与空白对照组相比,MACC1-shRNA组和c-Met-shRNA组MKN28细胞的迁移及侵袭能力均明显被抑制(P<0.01)。结论 MACC1可能通过调控HGF/c-Met信号通路调节EMT过程,增强胃癌细胞的迁移和侵袭能力。