HGF/cMet系统与肝癌细胞侵袭转移关系的实验研究

目的:探讨HGF/cMet基因表达与肝癌细胞侵袭转移能力的关系。方法:采用荧光定量PCR和WesternBlot检测5株肝癌细胞系MHCC-1、HepG2、Huh7、SMCC-7721、Hep3B和永生化肝细胞株L02以及26份肝组织中cMetmRNA和蛋白质表达水平,同时采用免疫组化法检测26份肝组织中cMet蛋白质的表达。结果:6株肝癌细胞cMetmRNA分别为7.9×106,3.4×106,2.1×106,6.5×105,3.8×105和5.8×103(copies/ml),5株肝癌细胞系cMetmRNA显著高于L02细胞系(P<0.01),其中以转移能力较强的MHCC-1细胞系的cMetmRNA表达量最高;肝癌组织、癌旁组织及周围正常组织的cMetRNA分别为2.28×107、6.80×105、5.68×105,肝癌组织的cMet基因表达明显高于癌旁及周围正常组织(P<0.01);在肝癌组织中,T1、T2、T3/T4期及NO、N1/N2的cMetmRNA分别为4.88×104、6.98×105、1.72×106、4.67×105、8.73×105,cMet的表达与肿瘤的大小及其侵袭能力明显正相关;WesternBlot和免疫组化也显示不同肝细胞系蛋白质表达水平与cMetmRNA表达一致。结论:HGF/cMet系统参与了肝癌的形成,并且在肝癌细胞的侵袭和转移的过程中起重要作用。

肝癌间质细胞中HGF/cMET系统的表达对肝癌细胞恶性生物学功能的影响

目的探索肝癌间质细胞与正常肝细胞共培养对肝癌恶性生物学功能的影响,探讨其相互作用所涉及的信号通路,明确肝癌微环境中间质细胞在肿瘤进展中的作用。方法人肝癌间质细胞或人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)与肝正常细胞系L-02共培养,检测肝正常细胞中抑癌基因PTEN及癌基因K-RAS的表达及肝正常细胞的增殖变化;Real-time PCR和Western blot检测下游相关信号通路的变化。结果肝癌间质细胞与正常肝细胞L-02共培养使得抑癌基因PTEN的转录水平下调1.15倍,翻译水平下调10倍多(P<0.05),而原癌基因K-RAS的转录水平上调1.4倍,翻译水平上调9倍以上(P<0.05);共培养后的肝细胞增殖能力较对照组增加2倍以上;ELISA实验结果显示,共培养后的培养液中含有较对照组3倍以上的HGF(P<0.05,1 085±108 vs.387±23);同时实验组细胞表达的cMET也较对照组细胞高出4倍以上(P<0.05);外源性HGF一致性促进了肝细胞的增殖能力和活力(P<0.05)。结论肝癌间质细胞可能通过分泌HGF激活HGF/cMET信号通路,促进正常肝细胞的增殖。这为探索肿瘤微环境对肿瘤发生、发展的分子机制及肝癌治疗提供新的途径。

HGF/c-Met信号通路调控生殖细胞发生的研究进展

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)为间质来源多效性生长因子,与肝细胞生长因子受体(HGF?receptor,也称c?Met)相结合,形成具有广泛生物学功能的HGF/c?Met信号通路,可促进细胞有丝分裂、生长、成熟、运动、组织形成过程以及诱导血管生成。以往研究表明HGF广泛表达于哺乳动物的睾丸和卵巢组织中,HGF/c?Met信号通路可参与调控卵泡发生和精子发生。本综述主要对近年HGF/c?Met信号通路对卵泡发生、精子发生的调控作用的研究进展进行概括。