76例肝炎患者庚型肝炎HGV-RNA的检测

庚型肝炎病毒(HGV)是1995年美国Simmon和Kim等[1,2]应用分子生物学技术发现的一种新型肝炎病毒,主要经血及肠道外途径传播.目前对其致病性认识尚不一致,本文应用RT-PCR法对76例肝炎患者进行了庚型肝炎HGV-RNA检测,现将结果报告如下.

不同肝炎患者血清HGV-RNA的检测与分析

为了解庚型肝炎病毒(HGV)在不同临床类型肝炎患者中的感染状况,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对208例肝炎患者血清进行HGV-RNA检测,结果发现HGV-RNA阳性27例,阳性率为12.98％。其中以非甲-戊型肝炎中阳性率最高,慢性丙型肝炎及慢性乙型混合丙型肝炎中次之。在不同临床类型的肝炎患者中,以慢性肝炎患者中的感染率最高,急性肝炎患者中的感染率最低。结果表明,HGV感染普遍存在于临床肝病患者中,HGV与其它肝炎病毒重叠感染较HGV单独感染要多。

RT—套式PCR法检测病毒性肝炎患者血清中HGV-RNA

目的：为了解四川泸州地区庚型肝炎病毒（HGV）流行情况，方法：根据发表的HGV序列非编码区（NCR）设计两对引物，用RT-套式PCR方法，结果：对102例各型肝炎病人血清进行检测，发现39例HGV-RNA阳性，阳性率为38.23％。其中3例（7.69％）HGV-RNA阳性者为非A-E型肝炎，33例（84.61％）为HBV与HGV共同感染，另外3例（7.69％）为HCV和HGV共同感染。结论：提示泸州地区是HGV高流行区。PCR所得产物进行序列测序，结果表明，“泸州株”HGV非编码区与“中国株”同源性达89.4％，与“重庆株”同源性达94.3％，提示“泸州株”和“重庆株”可能为相同亚型。

酶消化热裂解法处理血清样本进行RT-PCR检测的研究

目的探讨相对简便和不易污染的直接热变性处理血清样本进行RT－PCR检测的敏感性和重复性不理想的原因，并对其进行改良。方法对比分析直接热变性上清液中的pH值和蛋白抑制因子对RT－PCR体系的pH值和PCR扩增效果的影响。评价改良方法的性能。结果10份正常血清直接热变性上清的pH值平均为8．96±1．34。与RT－PCRⅠ液和改良RT-PCRⅠ液混合后的pH值分别为8．55±0．53和8．32±0.07。直接热变性上清液对PCR的抑制作用这100－1000倍。这种抑制作用可被加入300μg/mL蛋白酶K消化而完全消除。消化热变性法的敏感性和重复性与传统的抽提法接近，且不易污染。结论pH值波动和蛋白性抑制因子的存在是直接热变性法重复性和敏感性差的重要原因。消化热变性法不仅敏感性高，重复性能与抽提法相媲美，而且简便性和防污染能力更为优越。

肝病患者庚型肝炎病毒感染的临床分析

目的探讨肝病患者庚型肝炎病毒感染情况及致病性。方法应用RT-PCR方法检测312例肝病患者HGV-RNA及甲～戊型肝炎血清学标志。以HGV-RNA阳性为HGV感染判断标准,分析各型肝病患者HGV感染情况。结果312例患者HGV-RNA阳性64例,阳性率为20.51%;单纯HGV感染12例,阳性率为3.85%。结论急性肝炎,乙、丙型慢性肝炎,肝硬化,重型肝炎患者均可检出HGV-RNA。HGV多与乙、丙型肝炎病毒混合或重叠感染,亦可单纯感染引起肝脏炎症,说明HGV可能是肝病患者的致病因素之一。

NA—E肝炎患者血清中抗—HGV与HGV—RNA的检测

对18例已知五种肝炎病毒标志阴性(NA—E)的临床肝炎患者血清进行抗—HGV及HGV—RNA检测,报告如下: 1 材料和方法 1.1 标本来源 收集我院1996年5—10月肝炎患者血清,经ELISA法检测,确认NA—E肝炎18例。

肝炎患者中庚型肝炎病毒的检测及其意义

目的：了解肝炎患者检测庚型肝炎病毒的意义。方法：应用逆转录套式PCR法检测121例各型肝炎患者的血清HGVRNA。结果：HGV可单独存在或与HBV、HCV合并感染，丙型肝炎患者中HGVRNA的检出率较高，为15．6％。结论：HGV的致病性较HBV、HCV为轻，而其与HBV或HCV合并感染时不加重患者的病情。

庚型肝炎病毒核酸及抗体的联合检测分析

为探讨HGV RNA及抗 HGV在庚型肝炎诊断中的临床意义。采用RT nested PCR技术检测HGV RNA ,采用ELISA技术检测抗 HGV。结果 :1 84例肝炎中HGV RNA阳性率为 2 1 .2 % ( 39/1 84 ) ,抗 HGV阳性者HGV RNA阳性率为 70 .6% ( 2 4 /34 ) ,抗 HGV阴性者HGV RNA阳性率为 1 0 .0 % ( 1 5/1 50 ) ,抗 HGV阳性率为 1 8.5% ( 34 /1 84 ) ,HGV RNA阳性者抗 HGV阳性率为 61 .5% ( 2 4 /39) ,HGV RNA阴性者抗 HGV阳性率为 6.9% ( 1 0 /1 4 5)。作者认为 :HGV RNA及抗 HGV的检测均具敏感性和特异性 ,联合检测可提高HGV感染的检出率。

山东地区HGV—RNA检测及部分核酸序列测定

目的 了解山东地区慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）患者中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的状况，并测定其结构基因ＣＥ１区部分核苷酸序列。方法 用逆转录套式聚合酶链反应法（ＲＴ－ｎＰｃＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ，并对部分阳性血清扩增的产物采用ＰＣＲ技术片段直接克隆法测定。结果 从１１６例慢性丙型肝炎患者血清中检出ＨＧＶＲＮＡ阳性３１例（２６．７％）。

肝炎患者中庚型肝炎病毒感染的PCR检测

应用逆转录套式ＰＣＲ法检测了４８例丙型肝炎、２６例乙型肝炎及１２例甲乙丙丁戊型肝炎病毒感染标志均阴性的肝炎患者血清中的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）ＲＮＡ。结果表明，我国肝炎患者中存在ＨＧＶ感染；ＨＧＶ可单独感染或与其他肝炎病毒混合感染。丙型肝炎患者中，ＨＧＶＲＮＡ的检出率为１０．４％，乙型肝炎患者中的检出率为３．８％，而在甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性的肝炎患者中的检出率为３３．３％，ＨＧＶ与其他肝炎病毒的混合感染可加重肝脏的损害。在我国，ＨＧＶ感染是甲乙丙丁戊型肝炎标志均阴性肝炎的重要病因之一。

庚型肝炎病毒基因组RNA转录体恒河猴肝内注射感染的初步研究

GBV-C/HGV RNA transcripts were transcribed in vitro from a single GBV-C/HGV full-length cDNA clone pHGVqz, and injected directly into the liver of Macaca mulatta to test their infectivity. Serum samples from the experimental Macaca mulatta were collected weekly after injection to detect ALT, anti-GBV-C/HGV and GBV-C/HGV RNA. At week 6 post injection, the liver tissues of the infected Macaca mulatta were dissected through operation for histological examination. The results showed that ALT level of the Macaca mulatta remained normal and anti-GBV-C/HGV kept negative after infection. GBV-C/HGV RNA was detected positve from week 1 through week 14 post injection. The liver biopsy showed light viral-hepatitis like histological changes. From the preliminary results, we concluded that the in vitro transcripts of GBV-C/HGV may be infectious. Further studies are under way to confirm the conclusion.

新疆不同民族丙型肝炎患者并发HGV感染的研究

本文应用国产庚型肝炎病毒抗体（抗-HGV）酶联免疫试剂，检测了新疆地区152例不同民族中HCV感染者的抗-HGV，并用逆转录聚合酶键反应（RT－PCR）法检测HGV病毒核酸（HGV－RNA）。结果显示：抗-HGV阳性率22．4％（34／152）；HGV－RNA总阳性率44．7％（68／152）。各民族间以回族最高，依次为维吾尔族、蒙古族、哈萨克族、汉族，但经统计学处理，尚无显著差异。本研究结果证实，在新疆的主要民族和地区存在HGV的感染。

HGV RNA基因组感染HepG2细胞的研究

为了观察HGV RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HGV在HepG2细胞中的复制和表达。HepG2细胞在转染后24h便可在培养上清液中检测到HGV负链RNA,传代感染的细胞及培养上清液中可检测到HGV正、负链RNA。在90d内传代20余次,均能检测到HGV的复制。免疫组化和Western blot可检测到HGV E2蛋白在感染细胞中的表达。HGV感染细胞经冻存后复苏,仍能检测到 HGV RNA。故 HGV RNA基因组能够在HepG2细胞中复制和表达,此细胞模型有可能用于HGV的复制与感染防治的研究。

铜陵地区献血员等人群中庚型肝炎病毒感染状况的初步调查

为调查铜陵地区献血员等人群中庚型肝炎病毒的感染状况 ,采用PCR技术检测了献血员 ,慢性丙型肝炎及非甲～戊型肝炎患者的血清HGVRNA。结果表明 :献血员、慢性丙型肝炎及非甲～戊型肝炎患者血清HGVRNA的阳性率分别为 6 .4 7% (13/2 0 1)、2 1.4 3% (9/4 2 )及8.33% (1/12 )。铜陵地区存在较为严重的HGV感染 ;献血员中HGV感染率高于HCV ,所以 ,加强献血员HGV筛选意义重大。

乌鲁木齐地区部分高危人群庚型肝炎病毒感染状况的研究

目的 了解新疆乌鲁木齐地区部分高危人群中庚型肝炎病毒的感染状况。方法 首先运用酶标法(ELISA)检测不同人群中庚型肝炎病毒抗体(抗-HGV),然后对抗-HGV阳性血清运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HGV RNA。结果 在各类高危人群中,抗-HGV阳性率分别是:手术受血者为35.59％(21/59),静脉吸毒者为38％(19/50),非甲～戊型肝炎病人为18％(9/50);均显著高于对照人群(2％,1/50,P<0.05);职业供血员抗-HGV阳性率也较高(13.79％,8/58),但与对照人群无显著性差异(P>0.05);58份抗-HGV阳性血清有18份血清HGV RNA阳性,其中手术受血者血清1份,静脉吸毒者血清12份,职业供血员血清2份,非甲～戊型肝炎病人血清3份。结论 (1)本研究首次在乌鲁木齐地区部分高危人群中证实有较高的庚型肝炎病毒感染率;(2)再次证实该病毒主要通过注射、输血途径传播。

乙型肝炎患者血清中庚肝病毒核酸的检测

目的:了解乙型肝炎患者HGV感染情况,探讨HGV感染与HBV感染的关系。方法:应用巢氏PCR对1104例乙型肝炎患者进行了血清HGV-RNA检测,以251名正常人为对照。结果:共检出血清HGV-RNA阳性者34例,阳性率3.08%。乙型肝炎患者血清HGV-RNA阳性率(3.17%)与正常人群(2.79%)相比无显著差异(P>0.05)。慢性乙肝患者血清HGV-RNA阳性率(4.78%)显著高于急性乙肝患者(0.96%)(P<0.05)。结论:HGV感染可表现为病毒携带状态、亚临床型和不同临床类型,乙型肝炎患者并不比正常人群更易感染HGV,HGV与HBV重叠感染可能与病情发展和慢性化的形成有关。

HGV—RNA阳性与阴性慢性乙型肝炎的对比研究

目的 研究慢性乙型肝炎（ＣＨＢ）患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染的意义。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ法对８７例ＣＨＢ患者血清进行了ＨＧＶ－ＲＮＡ检测，并将ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴慢患者进行临床与病理学对比。结果 ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性１５例（１７．２４％）。ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性与阴性患者的肝功能等生化指标水平，肝脏病理损害的程度、ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率及对抗乙肝胎盘肽的疗效等生化指标水平，肝脏病理损害的程度。