Hh信号通路分子TPX2对口腔鳞癌增殖的作用探讨

目的探讨与分析Hedgehog(Hh)信号通路分子TPX2对口腔鳞癌增殖的作用。方法选取2022年1月—2023年7月呼伦贝尔职业技术学院口腔教研室培养的6株CAL-27人口腔鳞癌细胞株为研究对象,将转染Lv-pc3.0 vector的3株CAL-27人口腔鳞癌细胞株作为对照组,将转染Lv-pc3.0-shTPX2的3株CAL-27人口腔鳞癌细胞株作为Lv-shTPX2组,对比两组CAL-27人口腔鳞癌细胞株细胞周期、细胞增殖与目的基因、蛋白表达情况。结果转染后24、48 h,Lv-shTPX2组的TPX2 mRNA[(5.44±0.17)、(5.18±0.47)]与蛋白相对表达水平[(2.01±0.23)、(1.33±0.16)]低于对照组的TPX2 mRNA[(24.59±0.33)、(24.58±2.76)]与蛋白相对表达水平[(10.47±0.16)、(7.48±0.33)],差异有统计学意义(t=89.352,12.002,52.299,29.045,P均<0.05);Lv-shTPX2组的细胞增殖指数更低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染48 h后,Lv-shTPX2组的G_(2)+M期细胞相对比例高于对照组,S期细胞相对比例低于对照组,GLI2、FOXM1蛋白相对表达水平低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论抑制Hh信号通路分子TPX2的表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖,也可抑制GLI2、FOXM1蛋白表达,还可调节细胞周期状况,可为治疗口腔鳞状细胞癌提供新的途径。

锻造齿轮用钢20MnCrS5HH开发生产实践

山东寿光巨能特钢设计开发了保淬透性结构钢20MnCrS5HH钢种。通过工艺优化改善,精准成分设计、调整,经过炼钢、轧钢工艺进一步优化,该钢种经过渗碳热处理后,强度、韧性较高且淬透性好,具有良好的切削加工性能,综合力学性能优异,完全满足了客户订单的需求。客户经调质处理后,加工成大截面零部件或采用渗碳后加工成小齿轮,达到了工件设计性能的最佳值。

海洋细菌Pseudoalteromonas flavipulchra HH407产低温碱性蛋白酶的发酵条件和酶学性质研究

对一株分离自连云港海域的海洋细菌(Pseudoalteromonas flavipulchra HH407)菌株产蛋白酶的条件及酶学性质进行研究。结果表明,在发酵温度为20℃、培养基pH值为8.0、NaCl质量浓度为20g/L、接种量2.5%和装液量20%时产酶较高。甘露醇、果糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、鱼粉和酵母粉有利于蛋白酶的产生。该酶的最适作用温度为35℃,0℃时相对酶活力达21.7%。45℃条件下保温60min后酶活力仍能保持80%以上。酶的最适作用pH值为10.0,pH值为7.0～11.0范围为时,酶活力相对比较高。酶在pH8.0～11.0范围内稳定,最稳定的pH值为10.0,属于低温碱性蛋白酶,Mn2+、Cu2+、Ca2+对其具有较强的激活作用,Hg2+较强地抑制其酶活力。苯甲基磺酰氟(PMSF)能完全抑制该蛋白酶,EDTA无影响表明该酶属于丝氨酸蛋白酶。

HH胶囊抗乙肝病毒的体外(2.2.15细胞)实验研究

目的研究HH胶囊体外抗2.2.15细胞乙肝病毒作用。方法 HepG2.2.15是最常用的乙肝病毒感染的体外实验模型,用不同浓度的HH胶囊干预2.2.15细胞,用CCK-8检测药物细胞毒性,酶联免疫法检测乙肝病毒表面抗原(HB-sAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg),荧光定量聚合酶链反应法检测乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)。结果 HH胶囊可以不同程度降低细胞外HBsAg、HBeAg、HBV DNA及细胞内HBV DNA,此作用具有时间和药物浓度依赖性。结论 HH胶囊具有良好的抗HBV作用。

HH胶囊体外抗乙型肝炎病毒的作用及其机制

目的:研究HH胶囊体外抗乙型肝炎病毒的作用及其对抗病毒蛋白2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-Oligoadenylate Synthetase,2'5'-OAS)、RAN依赖蛋白激酶(RAN-dependent protein kinase,PKR)的影响.方法:HepG2.2.15是目前最常用的乙型肝炎病毒感染的体外实验模型,将细胞随机分为空白对照组、阳性对照组(3TC)、不同浓度的HH胶囊组.用CCK-8检测药物细胞毒性,酶联免疫法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);荧光定量聚合酶链反应法检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA);用Westernblot、荧光定量PCR方法分别检测细胞内抗病毒蛋白2'5'-OAS、PKR及其mRNA水平.结果:HH胶囊的TC50是2.11g/L、312.00mg/L、156.00mg/L、78.00mg/L、39.00mg/LHH胶囊均可以降低细胞外HBeAg(0.285±0.007,0.462±0.008,0.565±0.009,0.733±0.008vs1.334±0.007)和HbsAg(0.834±0.008,1.021±0.011,1.347±0.017,1.548±0.015vs2.593±0.008)水平,312.00mg/L、156.00mg/LHH胶囊均可以减低细胞内乙型肝炎病毒DNA[(3.423±0.110)×109copies/L,(3.640±0.082)×109copies/Lvs(6.857±0.060)×109copies/L]、细胞外乙型肝炎病毒DNA(6547±87、7710±62vs24300±200),312.00mg/LHH胶囊可以增加细胞内OASmRNA(0.885±0.038vs0.688±0.068)、PKRmRNA(0.139±0.06vs0.058±0.005)表达及其OAS、PKR蛋白水平.结论:HH胶囊具有良好的抗乙型肝炎病毒作用,推测可能与增加细胞内OAS、PKR及其mRNA水平有关.

海南粗榧新碱衍生物HH07A经大鼠肝微粒体的代谢转化研究

用大鼠肝微粒体体外代谢法对ＨＨ０７Ａ进行了代谢转化研究。用ＨＰＬＣ结合二极管阵列检测器对体外代谢体系进行了分析，判断在体外代谢体系中ＨＨ０７Ａ有二个代谢产物，并用减压柱色谱、薄层色谱及高效液相色谱法分离制备了其中一个代谢物的纯品，经核磁共振、质谱、红外、紫外光谱确定了结构。

109HH人工腱的超微结构研究

为探讨戊二醛合剂（ＭＧ）对人发的作用机理和筛选最佳浓度，对正常人发和经过４种不同浓度ＭＧ处理后的人发进行了超微结构研究。结果表明经４种不同药物浓度作用后的人发，表面和内部结构均有不同程度的改变，毛小皮翘起，鳞片间松驰、断裂，微丝软化和解聚并与基质融合。临床对人工腱的要求不仅在体内能够腱化，而且还要有一定强度，经比较４种浓度的ＭＧ中以５－１０％浓度为好，它使微丝解聚轻微，可保持较高强度，应当是首选浓度。

Gli在HH信号通路中作用机制及在肿瘤治疗中的应用前景

HH(Hedgehog)信号通路首先发现于果蝇胚胎体节发育调节中,后来陆续在脊椎动物(包括人类)中分离出果蝇HH信号通路中的相关基因。研究发现,HH信号通路不仅调控胚胎时期各胚层组织发育,而且与肿瘤生成密切相关。Gli作为脊椎动物HH信号通路中的锌指核转录因子,与HH信号通路中下游基因的特定序列结合,直接调控HH信号通路目的基因的转录表达,在HH信号通路调控中起核心作用。本文就Gli的在HH信号中的作用机制及可能应用于肿瘤治疗的前景等作简要概述。

北京地区荷斯坦母牛群体HH1遗传缺陷基因抽样调研

HH1(holstein haplotype1)是近年来在荷斯坦牛群中发现的一种遗传缺陷,其致病机理是牛5号染色体APAF1(apoptotic peptidase activating factor 1)基因上的C/T突变,导致编码谷氨酰胺的密码子突变为终止密码子,纯合时个体致死,大多数表现为妊娠早期流产。本研究运用竞争性等位基因特异性PCR(KASP)方法,共随机检测了北京地区158头荷斯坦母牛,发现HH1携带者20头,携带率为12.66%,提示HH1在我国荷斯坦母牛群体中存在一定的比例,牛场有必要定期对HH1携带者进行筛查并合理选种选配。

乳腺癌中shh、ptch和smo蛋白过表达的临床病理学意义

目的研究Hedgehog信号通路中shh、ptch和smo蛋白过表达在乳腺浸润性导管癌及导管内原位癌中的临床病理学意义。方法采用免疫组化EnVision法检测111例浸润性导管癌、40例导管内原位癌和21例正常乳腺导管上皮组织芯片中shh、ptch和smo蛋白的表达情况,并分析其相关性。结果 shh、ptch和smo蛋白在正常导管上皮中表达呈阴性或弱阳性,但在浸润性导管癌(shh74.8%,ptch68.5%,smo65.8%)和导管内原位癌(shh100%,ptch100%,smo90%)中阳性表达率明显增高,差异有统计学意义(P均<0.001)。乳腺导管癌中shh蛋白的表达率在Ki-67和c-erbB-2阳性组明显高于阴性组(P均<0.05);而且与淋巴结转移相关(P<0.05)。此外,shh、ptch和smo蛋白表达与乳腺癌患者的年龄、ER、PR、p53蛋白的表达及组织学分级和临床分期等特征均无显著性。Spearman相关分析显示,在乳腺癌组织中shh的表达分别与ptch(r=0.55,P<0.01)、smo(r=0.58,P<0.01)的表达呈正相关;而且ptch的表达又与smo的表达呈正相关(r=0.495,P<0.01)。结论 shh、ptch和smo蛋白表达检测可以作为乳腺癌的辅助诊断指标,而且shh对判定乳腺癌的预后有一定作用。

生防菌Hhs.015对苹果枝条皮层内生细菌区系的影响

【目的】用生防菌Hhs.015发酵液处理苹果发病枝条,研究其对树体微生态的影响。【方法】采用改良CTAB法提取样本中的总DNA,对细菌群落的16S r DNA的V4+V5区进行高通量测序,研究发病枝条涂抹Hhs.015菌悬液30 d后树皮内细菌区系组成变化,分析其相对丰度以及多样性指标。【结果】在属水平上,生防菌处理样本与对照样本中的细菌种类显现出明显差异,生防菌处理组Gluconobacter丰度明显升高,放线菌门菌株丰度高于对照组,Burkholderia和Luteibacter等可能与致病相关的菌属丰度大幅下降。刮去外皮后取样,糖丝菌属(Saccharothrix)丰度仍处于较高水平。【结论】Hhs.015能够在苹果树皮内定殖,并影响苹果枝条皮层细菌区系。

HH方治疗HBV转基因小鼠抗病毒作用及其对TLR3／TLR4的影响

目的:观察HH方治疗乙肝病毒(HBV)转基因小鼠抗HBV的疗效及其作用机制。方法:HBV转基因小鼠随机分4组,模型组小鼠给予同体积生理盐水,苦参素组小鼠给予同体积含0.15 g/(kg·d)苦参素混悬液,高、低剂量HH方组小鼠分别给予同体积含7、2 g/(kg·d)HH混悬液。5周后,ELISA法检测血清及肝组织乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag),常规HE染色观察肝组织病理变化,定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、Toll样受体(TLR)3/4 mRNA,Western blot法检测TLR3/4蛋白表达。结果 :高剂量HH方[7 g/(kg·d)]可以减轻肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,对肝组织炎细胞浸润未见明显缓解。高剂量HH方可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBs Ag、HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P<0.05),与苦参素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量HH方可以显著增强肝组织TLR3、TLR4的mRNA及蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量HH方有一定抗HBV作用,推测与增强TLR3、TLR4表达进而影响干扰素分泌有关。

HH胶囊的HPLC指纹图谱研究

目的建立HH胶囊的HPLC指纹图谱分析方法,拟定其指纹特征图谱指标成分群。方法高效液相色谱法测定,采用大连依利特ODS-BP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长230 nm;柱温30℃;流速1.0 m L/min;流动相:A相为0.1%磷酸溶液,B相为乙腈,进行二元梯度洗脱。结果最终标定14个特征峰构成HH胶囊的指纹图谱。通过与标准品对照,确定其中1号峰为没食子酸、8号峰为柯里拉京、9号峰为虎杖苷、10号峰为鞣花酸、13号峰为甘草酸、14号峰为齐墩果酸。结论 HPLC法准确、可靠,可为HH胶囊提供质量评价及鉴别依据,并为其物质基础研究提供了一定参考。

肌肉中的HH模型钠离子通道反电势的Hopf分岔分析

以肌肉中的Hodgkin-Huxley模型为研究对象,研究病理实验中有显著变化的钠离子通道反电势参数对Hodgkin-Huxley模型的影响并分析其Hopf分岔。采用高维方程的代数判据进行Hodgkin-Huxley模型单参数动态分岔分析,简化了分析过程,并用研究结果解释相应的生理过程,试图从生物系统动态过程异变的角度探讨生理疾病的成因。

中国荷斯坦牛HH4遗传缺陷单倍型分子筛查

HH4(Holstein Haplotype 4)是在荷斯坦牛群中发现的一种隐性遗传缺陷单倍型,由1号染色体上GART基因g.1277227A>C单碱基错义突变引起,隐性基因纯合时引起胚胎早期流产,严重威胁着奶牛养殖者的经济效益。本研究利用飞行时间质谱技术对北京地区332头荷斯坦公牛样品和1 151头母牛样品进行了检测分析,结果表明,在所检测的荷斯坦牛群体中,未发现HH4携带者个体,即均为正常个体。提示HH4单倍型对我国荷斯坦牛群影响较小,在奶牛场的选种选配中可以不予考虑,但在遗传物质引进的时候应重点关注,避免引入有害基因。

p(3HB-co-3HH)对哺乳类动物骨髓干细胞生物学行为的影响

目的 :通过观察 3 羟基丁酸、3 羟基己酸嵌段共聚 [poly(3 hydroxybutyrate co 3 hydroxyhexanoate) ,p(3HB co 3HH) ]对犬骨髓干细胞生物学行为的影响 ,探索 p(3HB co 3HH)作为组织工程支架材料在哺乳类动物体内应用的可行性。方法 :应用p(3HB co 3HH)在DMEM培养液中的浸出液 (0 1g/ml)培养犬骨髓干细胞 ,绘制细胞生长曲线 ,MTT测定及用FCM对细胞周期时相进行分析 ,并在 p(3HB co 3HH)薄膜上培养骨髓干细胞 ,观察细胞形态。结果 :在细胞培养的第 2～ 5d ,细胞增殖明显 ;MTT测定相对增殖率 10 2 % ,细胞毒性 0级 ;FCM检测结果显示p(3HB co 3HH)浸出液培养组增殖期细胞为 2 2 18% ,对照组为 16 12 %。骨髓干细胞在 p(3HB co 3HH)薄膜上培养 48h后观察呈簇状粘附生长。结论 :p(3HB co 3HH)浸出液对犬骨髓干细胞无毒性 ,细胞在 p(3HB co 3HH)表面生长良好 。

费氏中华根瘤菌菌株HH103研究概述

大豆既可以与快生型根瘤菌又可以与慢生型根瘤菌共生固氮。在以往的研究中,已有很多从不同地区的大豆根部分离出来的快生型根瘤菌,这些快生型根瘤菌大多数属于费氏中华根瘤菌属。模式菌株费氏中华根瘤菌菌株HH103现被用于基因序列的研究。该研究从根瘤和根瘤菌的分类依据和主要类型入手,介绍了HH103的主要研究现状,并且讨论其研究方向。

Hh信号通路在大肠癌发生发展作用机制及临床表达意义分析

目的分析Hh信号通路在大肠癌发生发展作用机制及临床表达意义。方法选取大肠癌患者共120例;大肠腺瘤共100例;大肠正常的黏膜标本选取同期在消化内镜下的活检样本,共100例;应用免疫组化检测Hh的信号通路内Glil与Su Fu蛋白表达情况,并分析它们与患者临床参数间的关系。结果大肠癌的组织标本内Su Fu阳性表达率显著低于大肠腺瘤和正常大肠黏膜组织,差异有统计学意义(P <0. 05);肿瘤分化程度、性别、病理类型和年龄与Su Fu表达无相关性(P> 0. 05),发病部位、临床分期和浸润深度与Su Fu表达显著相关(P <0. 05);正常大肠黏膜内Glil阳性表达率显著低于大肠腺瘤与大肠癌,差异有统计学意义(P <0. 05),大肠腺瘤内Glil表达率略低于大肠癌,但差异无统计学意义(P> 0. 05);肿瘤分化程度、性别、病理类型、年龄、发病部位和临床分期与Su Fu表达无相关性(P> 0. 05),浸润深度与Glil表达显著相关(P <0. 05)。结论大肠癌疾病进展中有Hh的信号通路异常的活化参与,患者的浸润深度和临床分期与Hh的信号通路异常的活化可能有联系。

HH2型土壤湿度计测定土壤含水量的标定研究

就HH2型土壤湿度计在黄土高原沟壑区黑垆土表层的应用进行了标定研究,分析了HH2测量的准确性,各容重标定曲线的精度和灵敏度。结果表明:在各种容重条件下用HH2测量土壤水分,输出电压的变异系数小于6%,仪器的准确性较高。线性标定方程斜率a随容重的增大而增加,常数b则相反。容重标定曲线对HH2的可调参数a0、a1影响较小。当土壤水分含量为18%～19%时,不同容重的标定曲线的差别最低。

分子外流源L1211中近红外HH天体的发现(英文)

报告分子外流源Ｌ１２１１ 中新发现的１２ 个近红外ＨＨ 天体．在Ｌ１２１１ 的～４’区域，取得了ＪＨＫ’宽带和Ｈ２ ｖ ＝ １０ Ｓ（１） 发射线窄带的近红外图像．分析表明，新探测到的许多红外源与浓密分子云物理成协，其中有２０ 多个源表现出典型的Ｔ Ｔａｕｒｉ 星、Ｈｅｒｂｉｇ Ａｅ／Ｂｅ星和原恒星的红外超．Ｌ１２１１ 中的ＩＲＡＳ点源没有被观测到，可能是更深地埋于分子云中．对红外观测和分子线观测消光估计的比较显示，小于２μｍ 的近红外观测还不足以揭示深埋于分子云的整个年轻星团．根据近红外ＨＨ 天体的形态分布和红外源性质，能进一步证认这些ＨＨ 天体的激发源．其结果表明，Ｌ１２１１