HHIP基因慢rs1828591、rs12504628与新疆维吾尔族性阻塞性肺疾病的相关性

目的:探讨HHIP基因单核苷酸多态性与新疆维吾尔族慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性之间的关系。方法:以233例维吾尔族COPD患者为病例组,292例维吾尔族健康体检者为对照组,提取外周血标本DNA,运用i MLDR分型技术检测HHIP基因rs1828591、rs12504628位点多态性。结果:在对照组和COPD患者中rs1828591、rs12504628位点的基因型、等位基因频率分布及2种单体型分布无明显差异(P>0.05)。rs1828591、rs12504628位点基因型与肺功能FEV1%预计值比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:rs1828591、rs12504628位点可能不是新疆维吾尔族COPD易感基因位点,rs1828591、rs12504628位点基因型与肺功能FEV1%预计值有关。

HHIP基因多态性与新疆蒙古族慢性阻塞性肺疾病易感性的关系研究

目的探讨HHIP基因多态性与新疆蒙古族慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性之间的关系。方法选取2016年1月—2017年6月新疆巴音郭楞蒙古自治州医院和新疆博尔塔拉蒙古自治州医院诊断为COPD的蒙古族患者259例(病例组),选取同期体检中心的体检健康的蒙古族志愿者245例(对照组)。测定研究对象的第1秒用力呼气末容积占预计值百分比(FEV_1%)、用力肺活量(FVC)及FEV_1/FVC。提取患者外周血DNA,运用SNaPshot分型技术检测HHIP基因rs1489758、rs1492820位点多态性。结果病例组与对照组HHIP基因rs1489758、rs1492820位点基因型、等位基因分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组HHIP基因rs1489758、rs1492820位点不同基因型患者的FEV_1%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HHIP基因rs1489758位点基因型GT[OR=0.582,95%CI(0.396,0.854)]、等位基因T[OR=0.639,95%CI(0.463,0.884)]和rs1492820位点基因型GG[OR=1.975,95%CI(1.153,3.384)]、等位基因G[OR=1.388,95%CI(1.076,1.790)]是发生COPD的影响因素(P<0.05)。结论 HHIP基因rs1489758、rs1492820位点多态性可能与新疆蒙古族人群COPD的发生有关。

人胰腺癌细胞株HHIP基因甲基化状态检测和分析

目的:探讨人胰腺癌细胞株HHIP表达与其甲基化的关系,为胰腺癌发生机制的研究提供新的信息。方法:以人胰腺癌细胞株BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1和PaTu8988s为研究对象,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫细胞化学染色(S-P)法检测去甲基化制剂——DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后各胰腺癌细胞株HHIPmRNA/蛋白表达的变化,用甲基化特异性PCR(MSP)结合测序检测HHIP基因CpG岛甲基化状态。结果:5-Aza-CdR处理前,胰腺癌细胞株BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1和PaTu8988s无HHIPmRNA/蛋白表达;经5-Aza-CdR处理后,HHIPmRNA/蛋白重新表达。MSP结合测序显示上述胰腺癌细胞株HHIP基因CpG岛存在高甲基化。结论:人胰腺癌细胞株HHIP表达抑制与其基因CpG岛高甲基化相关。HHIP基因CpG岛高甲基化可能在胰腺癌的发生、发展中起一定作用。

分析难治性COPD患者的HHIP基因序列图谱特点和易感性的相关性

目的分析难治性COPD患者的HHIP基因序列图谱特点和易感性的相关性。方法选取2017年1月~2019年1月我院收治的难治性COPD患者100例为观察组,另选择同一时期来我院正常体检的健康人100例作为对照组,采用Taqman分型技术检测两组HHIP基因rs13118928和rs13141461位点多态性。结果难治性COPD基因分型有显著相关性(P<0.05),C等位基因是易感性的主要影响因素;Taqman探针基因分型检验结果和难治性COPD患者易感性有显著相关性(P<0.05)。结论 HHIP基因rs13118928和rs13141461位点多态性可能与难治性COPD的发生有关,C等位基因与易感性呈正相关,Taqman探针基因分型检验结果对治疗活动具有指导性作用。

HHIP基因多态性与新疆哈萨克族慢性阻塞性肺疾病易感性的关系研究

目的探讨HHIP基因rs13118928、rs1828591位点单核苷酸多态性(SNPs)与新疆哈萨克族慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法选取2014年10月—2016年5月在伊犁州友谊医院、新华医院、石河子大学医学院第一附属医院呼吸科住院及门诊就诊的COPD患者214例为病例组。另选取同期在这几家医院进行体检的健康者350例为对照组。统一使用美国Medgraphics公司的肺功能仪进行用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气末容积(FEV1)测定,并记录FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC。所有受试者抽取外周静脉血标本,提取标本DNA,运用im LDRTM多重SNP分型技术检测HHIP基因各位点的多态性。结果两组rs13118928位点基因型及等位基因分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组rs1828591位点基因型及等位基因分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。病例组rs13118928位点不同基因型患者FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。病例组rs1828591位点不同基因型患者FEV1占预计值百分比、FEV1/FVC比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组HHIP基因rs13118928、rs1828591两位点单体型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HHIP基因rs13118928、rs1828591位点SNPs与新疆哈萨克族COPD易感性无明显关系。

HHIP基因启动子区甲基化在食管癌细胞系中的研究

目的探索人食管癌细胞系Hedgehog信号通路相关基因的表达状况、HHIP基因启动子区甲基化状态与HHIP表达的关系。方法采用RT-PCR方法检测5个食管癌细胞系Hedgehog信号通路SHH、PTCH1、SMO、HHIP和Gli的表达情况。用基于甲基化敏感酶和甲基化依赖酶酶切、并结合荧光定量PCR方法分析食管癌细胞系HHIP基因启动子区甲基化状态,并检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管癌细胞系HHIP mRNA表达的变化。结果 SHH、PTCH1、SMO和Gli mRNA在5个食管癌细胞系中都有较高表达。HHIP在Kyse450细胞系的表达较高,约为其余4个细胞系表达量的3～5倍。与之相应,Kyse450细胞HHIP基因CpG岛为非甲基化状态,其余4个细胞系CpG岛都发生了高甲基化。采用5-Aza-CdR去除甲基化后,HHIP基因表达较处理前增加了10～20倍。结论 Hedge-hog信号通路的异常激活可能参与了食管癌的发生、发展过程,食管癌细胞系HHIP基因的表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关。

非小细胞肺癌Hedgehog信号通路关键调节因子HHIP基因甲基化状态检测的研究

目的采用甲基化基因检测技术对肺癌组织HHIP基因启动子区CpG岛甲基化状态进行分析。方法采用甲基化特异性聚合酶链式反应和亚硫酸盐测序聚合酶链式反应技术,对在上海中医药大学附属第七人民医院接受手术治疗的非小细胞肺癌患者的肿瘤组织及距离肿瘤5cm的癌旁组织进行HHIP启动子区甲基化分析,并使用实时荧光定量聚合酶链式反应检测HHIP基因及Hedgehog信号通路PTCH、GLI1、SHH基因的mRNA表达。结果肿瘤组织HHIP基因启动子区CpG位点部分甲基化,甲基化程度为(3.36±2.35)%,而癌旁组织HHIP基因启动子区CpG位点少数甲基化,甲基化程度为(0.85±0.27)%,差异有统计学意义(t=-3.349,P=0.008)。肿瘤组织的HHIPmRNA相对表达量明显低于癌旁组织(Z=-4.038,P<0.001),其下游PTCH、GLI1、SHH基因的mRNA相对表达量明显高于癌旁组织(Z值均为-4.038,P值均<0.001)。结论在非小细胞肺癌中,抑癌基因HHIP启动子呈甲基化状态并出现表达沉默或下调,可作为肺癌的早期预测指标。

HHIP基因rs13118928单核苷酸多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的荟萃分析

目的探讨Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)基因rs13118928位点单核苷酸多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关联。方法系统检索PubMed、EMBASE、Web of Science、中国知网和万方五个电子数据库。检索时间为建库到2018年1月5日,根据制定的纳入标准筛选出相关研究文章,提取数据后利用RevMan5.3软件进行统计分析,计算出各种遗传模型下的比值比(OR)和95%的可信区间(95%CI)。结果本项研究共纳入7篇文献,包括5157个COPD患者和9768个健康对照者。荟萃分析结果显示HHIP基因rs13118928多态性在五种遗传模型下均与COPD有显著相关性:Avs.G,OR=1.14,95%CI,1.08~1.20,P<0.001;AAvs.GG,OR=1.36,95%CI,1.20~1.55,P<0.001;AGvs.GG,OR=1.27,95%CI,1.03~1.58,P=0.030;AA+AGvs.GG,OR=1.31,95%CI,1.10~1.57,P=0.003;AAvs.AG+GG,OR=1.12,95%CI,1.04~1.21,P=0.002。亚组分析结果显示在亚洲人种和高加索人种中,rs13118928多态性在Avs.G和AAvs.GG遗传模型下与COPD的发生有显著相关性。结论HHIP基因rs13118928单核苷酸多态性与COPD的发生有显著相关性。A等位基因和AA基因型携带者对COPD有较高的易感性。

HHIP基因多态性与汉族哮喘合并慢阻肺易感性的关系研究

目的探讨HHIP基因多态性与汉族哮喘合并慢性阻塞性肺疾病(ACOS)易感性之间的关系。方法选取2016年10月~2018年10月于哈尔滨医科大学附属第二医院确诊为ACOS的汉族患者384例(病例组)及健康志愿者342例(对照组)。测定研究对象的FEV1%及FEV1/FVC。运用SNPs质谱分析技术检测HHIP基因rs1032295、rs1512288位点多态性。结果病例组与对照组HHIP基因rs1032295、rs1512288位点基因型、等位基因分布比较,差异有统计学意义(P<0.05)。rs1032295位点基因型GT、等位基因T和rs1512288位点基因型TC、基因型CC、等位基因C是发生ACOS的影响因素(P<0.05)。病例组HHIP基因rs1032295位点不同基因型患者FEV1%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HHIP基因rs1032295、rs1512288位点多态性可能与汉族人群ACOS的发生有相关性。

HHIP基因去甲基化对HCC827肺腺癌细胞Hedgehog信号通路及增殖影响

[目的]探讨HHIP基因去甲基化后对HCC827肺腺癌细胞Hedgehog信号通路及其增殖的影响。[方法]应用细胞转染技术获得HHIP高表达的HCC827细胞,并将HCC827细胞分为空白对照组、过表达转染组及5-氮杂-2′脱氧胞苷(5-Aza-2′-de-oxycytidine,5-AzaCd R)处理组。采用甲基化特异性聚合酶链式反应和亚硫酸盐测序PCR检测5-Aza-CdR处理前后HCC827细胞HHIP基因启动子区甲基化状况,应用Real-time qPCR及Western-blot方法检测各组细胞的Hedgehog信号通路相关基因及细胞周期素D2(CCND2)mRNA及蛋白表达水平,CCK8分析细胞增殖的变化。[结果] HHIP基因去甲基化或过表达质粒转染后,HHIP基因表达明显上调,其Hedgehog信号通路相关基因PTCH、SHH基因表达均明显下调,CCND 2表达上调(P均<0.01),HCC827增殖能力出现降低(P<0.01)。[结论]高甲基化抑癌基因HHIP基因去甲基化后,可抑制HCC827腺癌细胞Hedgehog信号通路的活化并抑制其增殖,这可能与其Hedgehog信号通路负性调节因子HHIP基因恢复表达相关。