HBX基因重组腺病毒载体的构建

目的 :构建携HBX基因的腺病毒载体 ,为进一步研究HBX基因的功能 ,为阐明HBV感染导致肝癌的机制研究建立基础。方法 :采用PCR技术从HBV全基因组DNA中扩增HBX基因 ;将HBX基因亚克隆至质粒 pHAHA ,构建质粒 pHAHA-HBX ,酶切pHAHA -HBX质粒 ,将HAHA -HBX片段克隆到腺病毒载体 pAd -Track -CMV中 ,得到 pAdTrack -CMV -HBX ,同时与 pAdEasy - 1共转染 2 93细胞 ,确定转染效率。检测培养上清病毒中HBX的存在。结果 :将PCR扩增HBX片段成功克隆到腺病毒载体中 ,并经序列分析证实 ;建立了产病毒细胞株 ,证实重组病毒中含有HBX基因。结论