基于裸鼠模型研究HI-TOPK-032对卵巢癌细胞增殖能力的调控作用

目的探讨T-LAK细胞源蛋白激酶/PDZ连接激酶(T-LAK cell-originated protein kinase/PDZ-binding-kinase,TOPK/PBK)在卵巢癌中的表达情况以及TOPK/PBK抑制剂HI-TOPK-032对卵巢癌细胞增殖的影响。方法利用基于基因表达水平值的交互式分析(gene expression profiling interactive analysis,GEPIA)数据库分析TOPK/PBK在卵巢癌与正常卵巢组织中的表达差异。噻唑蓝法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)细胞活力和增殖检测实验及平板克隆实验分析HI-TOPK-032对OVCAR3及SKOV3细胞增殖能力的影响,构建卵巢癌裸鼠皮下瘤模型验证HI-TOPK-032对卵巢癌瘤体生长能力的影响。结果与正常卵巢组织相比,卵巢癌中TOPK/PBK的表达显著升高(P<0.05)。同时,小分子抑制剂HI-TOPK-032可抑制TOPK/PBK表达,致OVCAR3及SKOV3细胞的增殖能力明显下降(P<0.0001),裸鼠皮下成瘤实验也表明HI-TOPK-032处理组瘤体质量[(0.670±0.450)g vs(1.514±0.358)g]和体积[(0.418±0.171)cm^(3) vs(0.973±0.262)cm^(3)]均显著小于对照组。结论TOPK/PBK在卵巢癌中高表达,TOPK/PBK抑制剂HI-TOPK-032可抑制卵巢癌细胞增殖。这一发现提示TOPK/PBK可能成为卵巢癌的一个新的治疗靶点。

TOPK抑制剂HI-TOPK-032对胰腺神经内分泌肿瘤BON-1细胞体外恶性表型的影响

目的杀伤性T细胞来源的蛋白激酶(T-lymphokine activated killer cell-originated protein kinase,TOPK)高表达与肿瘤增殖、凋亡、侵袭和转移密切相关。本研究旨在探讨使用TOPK抑制剂HI-TOPK-032对胰腺神经内分泌肿瘤细胞BON-1体外恶性表型的抑制作用。方法通过蛋白免疫印迹实验检测人正常胰腺导管上皮细胞和不同胰腺肿瘤细胞系中TOPK的蛋白表达水平;CCK-8实验检测HI-TOPK-032对BON-1细胞增殖的影响;克隆形成实验检测HI-TOPK-032对BON-1细胞体外克隆形成的影响;Transwell实验检测HI-TOPK-032对BON-1细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞仪检测HI-TOPK-032对BON-1细胞周期的影响;Annexin V检测HI-TOPK-032对BON-1细胞凋亡和坏死的影响。结果与正常胰腺导管上皮细胞相比,胰腺神经内分泌肿瘤细胞BON-1中TOPK蛋白表达显著上调;在体外实验中,与对照组相比,在含1、2.5、5μmol/L浓度的HI-TOPK-032培养基中,BON-1细胞增殖能力依次减弱(22.2±8.2)%、(90.4±1.0)%、(89.7±0.9)%(P<0.001),克隆形成依次减少(19.1±2.1)%、(42.5±5.7)%、(87.0±5.6)%(P<0.001),迁移能力依次减弱(9.3±5.6)%、(70.5±4.0)%、(87.5±3.5)%(P<0.01),侵袭能力依次减弱(23.0±4.2)%、(60.7±5.4)%、(93.6±3.0)%(P<0.01);在含2.5、5μmol/L浓度HI-TOPK-032培养基中,G0/G1期的BON-1细胞比例分别增加(12.2±2.0)%、(18.3±1.4)%(P<0.001),在5μmol/L浓度时,S期的细胞比例减少(18.4±6.1)%(P<0.01),在2.5、5μmol/L浓度时,G2/M期的细胞比例分别减少(17.6±8.6)%、(16.4±4.5)%(P<0.001);HI-TOPK-032促进BON-1细胞凋亡和坏死,凋亡依次增加(60.6±30.9)%、(79.5±27.5)%、(165.8±34.9)%(P<0.05),5μmol/L浓度时,坏死显著增加,增加(385.8±67.3)%(P<0.001)。结论TOPK靶向抑制剂HI-TOPK-032显著抑制BON-1细胞的体外恶性表型,抑制效果呈剂量依赖式。HI-TOPK-032能调控BON-1细胞周期,促进凋亡和坏死。TOPK抑制剂HI-TOPK-032可能在胰腺神经内分泌肿瘤的靶向治疗中发挥重要作用。

ADS032对急性缺血性脑卒中小鼠的神经保护作用

目的探讨ADS032对小鼠急性缺血性脑卒中后神经功能的作用及机制。方法将100只雄性C57BL/6小鼠随机划分为5组:假手术组、模型组及低、中、高剂量ADS032组,每组20只。线栓法构建右侧大脑中动脉栓塞模型模拟缺血性脑卒中,脑缺血后立即腹腔注射ADS032(50、100、200 mg/kg)治疗3 d(1次/d),依据Longa评分评估小鼠神经功能,使用TTC染色评估脑梗死体积,免疫荧光染色法检测梗死侧小胶质细胞含量的变化,利用实时荧光定量PCR检测梗死侧脑组织抗炎因子白细胞介素(IL)-4、IL-10以及促炎因子IL-18、IL-1β的表达,利用免疫印迹法检测NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)以及IL-18、IL-1β的表达。结果与假手术组相比,模型组小鼠脑梗死明显(P<0.05),神经功能缺损加重(P<0.05),梗死侧脑组织小胶质细胞数量明显增加(P<0.05),NLRP3、ASC、IL-18、IL-1β水平明显升高(P<0.05),IL-4、IL-10水平明显下降(P<0.05)。与模型组相比,ADS032明显减小脑梗死体积(P<0.05),明显改善神经功能缺损(P<0.05),明显减少梗死侧脑组织小胶质细胞数量(P<0.05),明显减轻神经炎症反应、增加抗炎因子水平(P<0.05),并且呈剂量依赖性。结论ADS032对小鼠急性缺血性脑卒中具有显著的神经保护作用,其机制可能与抑制炎症反应有关。

用GWR-C032超导重力仪观测资料实施对LCR-ET20重力仪格值的精密测定

利用我国武汉国际重力潮汐基准站GWR C032超导重力仪与LCR ET20重力仪的同址观测资料,采用多线性回归方法(Multi linearRegressionTechnique)实施了对ET20重力仪格值的精密测定,获得的格值为42.2932±0.0080×10-8m·s-2/V。为了说明获得格值的有效性,我们用获得的格值对ET20重力仪观测数据进行标定,然后进行调和分析,将分析结果与同期C032超导重力仪观测资料分析结果相比较。数值结果表明:利用ET20重力仪可获得与超导重力仪相近的潮汐参数;经海潮改正后由LCRET20重力仪获得的振幅因子与理论值之差,与由GWRC032超导重力仪获得的振幅因子与理论值之差十分接近,说明获得的标定因子可靠性。

大中五年张议潭入奏相关问题辨析——以杏雨书屋藏羽032-1《驿程记》为中心

本文赞同前辈学者提出的杏雨书屋藏敦煌文书羽032-1《驿程记》是大中五年张议潭使团前往京城长安的行程记录的观点,并补充了几点论据。随后主要据《驿程记》探讨了有关该次入奏活动的几个有争议的问题,认为该使团到朝时间和归义军正式设立时间可分别确定为大中五年十月、十一月,对近年有学者提出的P.3750书状中的入奏押衙王敬翼属张议潭使团的说法则提出了异议。

032基因缺失猪痘病毒载体的构建及鉴定

目的：构建毒力减弱的猪痘病毒载体。方法：以猪痘病毒野生毒株NT1501株为亲本毒株,通过同源重组方法,构建缺失032毒力基因的猪痘病毒SPV△032。检测SPV△032在不同种属来源细胞系中的培养滴度,并通过动物试验来检测其毒力。结果：猪痘病毒SPV△032株与野生NT1501株在PK15和ST等猪源细胞中的培养滴度差异不显著,均可达到5.0×106TCID50左右。猪痘病毒SPV△032株在Vero、MDBK等其他物种来源的细胞系中不能进行复制,连续传代2-3代以后,细胞培养物中检测不到猪痘病毒基因,与野生NT1501株培养结果一致。动物试验结果表明,用高浓度SPV△032接种实验猪,接种部位皮肤未出现任何症状,比野生NT1501株的毒力显著降低。接种SPV△032实验猪的细胞免疫和体液免疫反应水平均显著高于野生NT1501株（P〈0.05）。接种SPV△032的实验猪不会通过粪便等途径向环境中排毒。结论：本研究构建了032基因缺失猪痘病毒SPV△032,该病毒的毒力与野生NT1501株相比显著下降,可以作为弱毒猪痘病毒载体,用于兽用疫苗研发。

特基拉芽孢杆菌WRN032对稻瘟病菌的生物防治潜力

植物病原真菌是农作物病害的主要致病菌,导致作物减产,严重阻碍农业发展.病原真菌种类繁多,作用机制复杂,防治难度大,传统化学防治手段无法满足当今发展需求,而生物防治是一种安全、绿色、高效的防控手段.以来源于土壤和植物根茎的多种细菌为研究对象,以菌种的抑菌活性为指标,采用牛津杯法,筛选出一株具有生物防治潜力的细菌WRN032,对黑腐皮壳菌(Rhizoctonia solani)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)和稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的生长均具有不同程度的拮抗作用,其中对稻瘟病菌的抑制作用较强.使用石油醚、正丁醇和乙酸乙酯依次对菌株WRN032的发酵液进行萃取,发现其乙酸乙酯提取物对稻瘟病菌有强拮抗作用.结合生理生化鉴定及16S rDNA序列分析对其菌种进行鉴定,结果表明该细菌为特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis).对特基拉芽孢杆菌WRN032代谢产物中的活性物质进行稳定性试验,表明其在高温、强酸性、中性和弱碱性条件下均具有良好的稳定性,且对紫外光不敏感.采用柱层析法和半制备层析法对特基拉芽孢杆菌WRN032发酵液中的活性物质进行分离纯化,其纯化物对稻瘟病菌的相对抑制率与相同浓度的75%三环唑可湿性粉剂相近.当浓度为100.0μg/mL时,相对抑制率为51.2%,与75%三环唑可湿性粉剂(56.4%)基本相同.研究表明,特基拉芽孢杆菌WRN032具有作为农业生物防治剂的潜力.

SNS-032诱导弥漫性大B淋巴瘤OCI-LY-19细胞株凋亡及其作用机制的研究

目的:研究SNS-032对弥漫性大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:应用MTS法观察不同浓度的SNS-032对OCI-LY-19细胞活力的影响;用PI单染法观察SNS-032对OCI-LY-19细胞诱导死亡的影响;Annexin V/PI双染流式细胞术分析不同浓度SNS-032对OCI-LY-19细胞凋亡的影响;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白和细胞增殖相关蛋白的表达情况。结果:SNS-032明显抑制OCI-LY-19细胞活力,半数抑制浓度为0.358μmol/L;随SNS-032作用时间延长与浓度升高,凋亡细胞数逐渐增多;SNS-032可以时间与剂量依赖性地引起凋亡相关蛋白聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)的切割,caspase-3前体(procaspase-3)、caspase-9前体(procaspase-9)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)与髓样细胞白血病1(Mcl-1)的表达下降,而cleavedcaspase-3和cleaved caspase-9表达明显增加;与细胞增殖相关的蛋白丝/苏氨酸激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、信号转导子及转录激活子5(STAT5)、磷酸化STAT5(p-STAT5)、细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化ERK(p-ERK)表达下降,而ERK总蛋白无明显变化。结论:SNS-032能抑制弥漫性大B淋巴瘤细胞株OCI-LY-19的生长,诱导其凋亡,可能的机制是抑制了相关抗凋亡蛋白的表达,激活了caspase级联反应,同时抑制了与细胞增殖相关的JAKs/STATs、MEK/ERK和PI3K-Akt信号转导通路的表达与活化。

SNS-032对紫杉醇耐药乳腺癌细胞生长的抑制作用研究

目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂SNS-032对人紫杉醇耐药MCF-7/TAX乳腺癌细胞生长的作用。方法采用MTT试验检测MCF-7/TAX细胞对紫杉醇的耐药情况以及SNS-032对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞生长的影响;采用Annexin V-FITC/PI双染试验检测SNS-032对MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的诱导作用。结果 MCF-7/TAX细胞对紫杉醇耐药指数达19.39;而SNS-032能显著抑制MCF-7/TAX耐药细胞的增殖,且具有明显的浓度依赖性,对其作用48 h的IC50为164.5 nmol/L,MCF-7/TAX对SNS-032的耐药指数仅为0.89。SNS-032作用后,Annexin V染色阳性的MCF-7/TAX细胞比例较对照明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SNS-032能激活MCF-7/TAX耐药细胞凋亡的发生,从而对紫杉醇耐药MCF-7/TAX细胞的生长发挥高效抑制作用。

L-乳酸高产突变菌株—米根霉NAF-032菌种培养条件的研究

本文运用单因素试验设计及正交试验设计理论确定高产Ｌ－乳酸突变菌株ＮＡＦ－０３２的最优种子培养基及培养条件。最优种子培养基（ｇ／１）：葡萄糖８０．０，氯化铵２．０，ＮａＨ２ＰＯ４ ０．３，ＫＨ２ＰＯ４ ０．３ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ ０．２５，ＺｎＳＯ４·７Ｈ２Ｏ ０．０５。最优种子培养条件：温度３４℃，转速 ２００ｒ／ｍｉｎ，装液量６０ｍｌ（２５０ｍｌ三角瓶），一次性添加ＣａＣＯ３１０．０ｇ／１用于调节ｐＨ值，种子培养时间２２ｈ。

谷子新品种陇谷032

陇谷032是甘肃省农业科学院作物研究所以金裹银为母本、陇谷10号为父本通过有性杂交选育的丰产谷子新品种,2022年完成非主要农作物品种登记。该品种综合性状优良,植株较高,穗大粒多,抗旱性强,抗倒伏,抗谷锈病、黑穗病和白发病,中抗谷瘟病和玉米螟,是一个丰产多抗的优良品种。2017年被中国作物学会粟类作物专业委员会评为二级优质米。陇谷032适宜在甘肃省中东部地区及河西走廊海拔1900m以下谷子主产区种植。

CDK抑制剂SNS-032联合AD55-Apoptin对肝癌细胞Huh-7的体外抗癌作用

通过CDK抑制剂SNS-032联合AD55-Apoptin处理肝癌Huh-7细胞,以探究两者联合作用的体外抗癌作用。采用MTT法分别检测SNS-032、AD55-Apoptin以及SNS-032与AD55-Apoptin联合对肝癌细胞株Huh-7生长的抑制作用;利用Hoechst33342染色观察所处理细胞的凋亡形态学变化,采用流式细胞术对凋亡进行量化,Western Blot检测凋亡相关蛋白表达情况。结果表明：10MOI的AD55-Apoptin联合100ng/mL的SNS-032处理96h后,Huh-7细胞的存活率仅为4%,而10 MOI的AD55-Apoptin和100ng/mL SNS-032分别单独处理后细胞存活率为60%和8%（P〈0.05）;Hoechst33342染色、流式检测及Western Blot结果表明,联合处理组细胞凋亡现象更明显。实验结果证明SNS-032联合AD55-Apoptin能有效的抑制肝癌细胞Huh-7生长,并诱导其凋亡。

湖北省自育烤烟新品系HB032、HB061和HB112的氮肥效应

2013年，对湖北省自育烤烟新品系HB032、HB061和HB112，在清江流域设点试验，探讨了不同氮肥施用量对其农艺性状、经济性状和品质性状的影响。结果表明，HB032和HB112随着氮肥施用量的增加，其产量、产值和品质也随之提高，到氮肥施用量为97．5kg／hm^2表现最好，随后降低。而HB061随着氮肥施用量的增加，其产量、产值和上等烟比例提高，到氮肥施用量为105．0kge／hm^2表现最好，但吸食品质以氮肥施用量以90．0～97．5kg／hm^2表现最好。综合来看，3个品系的氮肥施用量均以97．5kz／hm^2为宜。

关于金属氧化物避雷器标准GB11032-2000的几点讨论

测试避雷器或电阻片的直流参考电压在承受大电流或方波冲击试验前后的变化率比测试其残压变化率更能判断该避雷器或电阻片受冲击后的电性能退化程度;建议修改GB11032-2000中的直流参考电压、残压要求;建议提高和完善对低压避雷器的特性要求。

UA032领域专利检索策略

本文以UA032领域的实际案例为基础,重点归纳、介绍了三类案件——上位、抽象类案件、公知现有技术类案件、简单技术方案类案件的案件特征以及检索策略,具体涉及这三类案件在关键词以及数据库选取等方面的一些小技巧。

细胞周期抑制剂SNS-032对小鼠造血干细胞生物活性的影响研究

本研究旨在探讨SNS-032(C17H24N4O2S2)对小鼠骨髓造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSC)细胞周期、凋亡、分化及自我更新的影响及其可能的相关机制。利用极限稀释实验检测SNS-032作用前后HSC自我更新的变化,用流式细胞术检测SNS-032作用前后小鼠骨髓细胞Lin-c-kit+Sca-1+及Lin-c-kit+Sca-1-表型细胞的细胞周期及凋亡的变化,用实时定量PCR检测SNS-032作用前后细胞周期相关基因、凋亡相关基因及HSC自我更新相关基因mRNA表达量的水平。结果显示,SNS-032处理后,小鼠骨髓细胞中HSC的自我更新能力没有明显变化;加SNS-032处理后,小鼠骨髓细胞Lin-c-kit+Sca-1+表型细胞的细胞周期无统计学意义的变化(P>0.05),小鼠骨髓Lin-c-kit+Sca-1-表型细胞的G1期细胞增多(P<0.05);小鼠骨髓细胞Lin-c-kit+Sca-1+表型细胞和Lin-c-kit+Sca-1-表型细胞的细胞凋亡增多,与对照相比均无显著性差异(P>0.05)。小鼠骨髓细胞经SNS-032处理后,HSC周期相关基因CDK1、CDK2、CDK7、p27的表达量均明显降低(P<0.05),而CDK4,CDK6,p21,p18,p19,p16的表达与对照组相比没有明显变化(P>0.05)。凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Puma和p53表达量与对照组相比没有明显区别(P>0.05),与干细胞自我更新相关的基因中Bim,Sall4,Notch1表达量升高,但与对照组相比没有显著性差异(P>0.05)。结论:SNS-032没有明显的抑制正常造血干细胞自我更新、分化作用,而且SNS-032没有明显的诱导正常造血干、祖细胞的凋亡作用。

YG032型胀破强度仪研制成功通过鉴定

由上海纺织科学研究院和部纺织科学研究院转让给常州二纺机的胀破强度仪研

柳钢2032mm热轧板带R0粗轧机牌坊的修复

介绍热轧板带厂针对一热轧R0粗轧机牌坊变形磨损情况实施的修复方案,测量、焊接、加工等修复过程,及其效果。

2-乙氧甲酰亚甲基-4-氰基-5,6-二苯哒嗪-3-酮对L1210细胞周期的影响

本文研究了哒嗪(DPP)衍生物PD032对L1210细胞周期移行的影响。结果表明,PD032(2～10μmol/L)作用24h,G_1期细胞明显减少,G_2+M期细胞增加5～10倍。同时观察到有丝分裂指数增加,细胞体积增大及多核现象。S期在高浓度(10μmol/L)PD032时有减少,这时[~3H]TdR参入DNA也有轻度抑制。洗去药物后24～48h,上述变化有不同程度的恢复。以上结果说明PD032是有丝分裂抑制剂。

新型CDK抑制剂联合ZD55-MnSOD溶瘤腺病毒体外抑制人结肠癌细胞增殖的研究

探究携带MnSOD的溶瘤腺病毒Ad-E1B55Kd-MnSOD(ZD55-MnSOD)联合小分子药物新型CDK抑制剂SNS-032对人结肠癌细胞株SW620、HCT116、HT-29生长的体外抑制效果,通过溶瘤病毒与药物联合,以期寻求较好的抗癌作用。实验采用MTT法检测5 MOI的ZD55-MnSOD与不同剂量的SNS-032(0、20、40、80、160ng/mL)联合处理人结肠癌细胞株,发现病毒与药物联合处理有促进肿瘤细胞凋亡的作用。ZD55-MnSOD(5 MOI)与SNS-032(80ng/mL)联合处理SW620、HT-29细胞,发现联合作用具有很大程度上的时间依赖性,Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡也显示ZD55-MnSOD与SNS-032联合处理组的细胞凋亡现象比二者单独使用均具有显著差异。该研究初步证实了ZD55-MnSOD与SNS-032联合具有互补作用,能有效地在体外抑制人结肠癌细胞的增殖。