HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2在稽留流产患者绒毛组织中的表达

目的探讨低氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体(VEGFR-1、VEGFR-2)在稽留流产(MA)绒毛组织中的表达及临床意义,探究MA发生中低氧对脑血管生成的影响。方法免疫组化SP法检测35例MA患者(研究组)以及32例正常早孕行人工流产者(对照组)绒毛组织的HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2的表达水平,并对结果进行统计分析。结果研究组与对照组绒毛组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2均有表达。研究组中HIF-1α表达高于对照组(P<0.05),VEGF、VEGFR-2表达明显低于对照组(P<0.05)。对照组中HIF-1α与VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2表达呈正相关性(P<0.05),研究组中HIF-1α与VEGF、VEGFR-2表达呈负相关性(P<0.05),与VEGFR-1表达无相关性。结论 HIF-1α在MA绒毛组织中表达上升,通过调节VEGF、VEGFR-2基因的转录,胎盘绒毛血管的生成减少,可能是MA发生的重要原因。

复方芪参提取物对糖尿病足溃疡模型大鼠创面愈合及HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路的影响

目的:探讨复方芪参提取物对糖尿病足溃疡模型大鼠创面愈合及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)通路的影响。方法:建立糖尿病足溃疡大鼠模型,将造模成功48只大鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.2g/kg)、复方芪参提取物低剂量组(4g/kg)、复方芪参提取物高剂量组(8g/kg),每组12只;12只正常大鼠以相同方法建立溃疡创面伤口作为对照组。造模成功后第1天,二甲双胍组、复方芪参提取物低剂量组、复方芪参提取物高剂量组分别灌胃0.2g/kg二甲双胍、4g/kg、8g/kg复方芪参提取物,对照组和模型组灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续灌胃4周。给药周期结束后,测定大鼠溃疡创面愈合率,观察糖尿病足大鼠和正常大鼠溃疡创面组织病理改变,测定糖尿病足大鼠和正常大鼠溃疡创面组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA和蛋白水平。结果:对照组创面组织结构正常,可见大量成纤维细胞及毛细血管;模型组创面组织大量炎症细胞浸润,成纤维细胞及毛细血管数目明显减少;二甲双胍和复方芪参提取物干预后,创面组织成纤维细胞及毛细血管增加,炎症细胞浸润减少。与对照组比较,模型组大鼠创面愈合率、溃疡创面组织HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05);与模型组比较,二甲双胍组、复方芪参提取物低、高剂量组大鼠创面愈合率、溃疡创面组织HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);复方芪参提取物高剂量组大鼠创面愈合率、溃疡创面组织HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA和蛋白水平高于复方芪参提取物低剂量组(P<0.05);与二甲双胍组比较,复方芪参提取物低剂量组大鼠上述指标降低(P<0.05);复方芪参提取物高剂量组与二甲双胍组大鼠上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方芪参提取物可促进糖尿病足溃疡模型大鼠创面愈合,其机制可能与复方芪参提取物促进大鼠糖尿病足溃疡创面组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR2 mRNA和蛋白表达,进而激活HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路有关。

HIF-1α、MMP-2和VEGF在脑胶质瘤中的表达及相关性分析

0引言HIF-1α是缺氧条件下的一种转录因子,MMP-2是降解细胞外基质和基底膜的重要因子,VEGF有促进肿瘤血管生长的作用,三者在胶质瘤的发展和浸润中起重要作用。本研究检测HIF-1α、MMP-2和VEGF蛋白在不同脑组织中的表达情况以及与临床病理之间的关系,以探讨它们在胶质瘤发生、

HIF-1基因RNA干扰对肝癌HepG2细胞VEGF表达的抑制

缺氧诱导因子-1(HIF-1)是细胞缺氧反应网络的关键调节转录因子,而HIF-1α是决定HIF-1活性的亚单位。HIF-1能在缺氧条件下促进血管内皮生长因子(VEGF)依赖性的肿瘤血管形成。本研究构建了针对HIF-1α的pSUPER-EGFP siRNA表达载体,抑制HepG2细胞HIF-1α的表达。RT-PCR和Western blot蛋白印迹检测结果显示,RNA干扰能明显抑制HIF-1α的表达;在缺氧培养条件下,HepG2细胞中VEGF有较高的表达,当HIF-1α基因表达被有效抑制,VEGF mRNA和蛋白质的表达随之大幅下降。本研究结果表明,HIF-1α是血管生成因子VEGF表达的调节因子,通过RNA干扰导致的HIF-1α基因抑制,能下调VEGF的表达,提示HIF-1α基因可作为抗抑制VEGF依赖性的肿瘤血管生成的一个靶点。

血清中VEGF,VEGFR_1与VEGFR_2在肺癌中的表达及其相互关系

目的本研究为探讨肺癌患者血清及组织中VEGF,VEGFR1,VEGFR2的表达在肺癌发生发展中的变化,为肺癌的诊断、发病机制提供生物学指标。方法选择山西省肿瘤医院胸外科2008年1月到2008年10月收治的初治原发性肺癌患者65例作为病例组,术后均经组织病理学证实。按照频数匹配的方法选择本院健康体检中20例正常人作为健康对照组。采集外周静脉血,用ELISA法检测病例组外周血中VEGF,VEGFR1,VEGFR2含量,并与健康对照组比较。采用SPSS12.0软件包进行统计学分析VEGF,VEGFR1和VEGFR2与患者病理类型、临床分期、性别、年龄之间的关联性及其三者之间的相关性。结果①肺癌患者血清VEGF、VEGFR2表达与健康对照组比较差异有显著性(均P<0.01);VEGFR1表达在两组之间比较差异无显著性(P>0.05);②血清VEGF、VEGFR1、VEGFR2表达在性别,年龄及临床分期之间比较差异均无显著性(均P>0.05)。结论①肺癌血清中VEGF,VEGFR2的表达在腺癌,鳞癌及小细胞癌患者中明显高于正常对照,而VEGFR1的表达与对照组比较无显著性差异;②患者肺癌血清中VEGF,VEGFR1,VEGFR2的表达在性别,年龄,临床分期中差异均无显著性。

乳腺浸润性导管癌Ephrin-A1、VEGF、VEGFR2表达对血管生成的影响

目的检测乳腺浸润性导管癌Ephrin-A1配体(Ephrin-A1)、血管内皮生长因子(VEGF)和VEGF受体(VEGFR)2的表达,分析其临床意义及相关性。方法 68例确诊为乳腺浸润性导管癌患者术后的蜡块组织作为观察组,21例乳腺腺病患者术后的蜡块组织作为对照组,采用免疫组化方法检测两组中Ephrin-A1、VEGF和VEGFR2的表达。结果两组中Ephrin-A1、VEGF和VEGFR2的阳性率差异显著(P<0.05),观察组中Ephrin-A1、VEGF和VEGFR2的表达与肿瘤的最大径密切相关,观察组中Ephrin-A1的表达与肿瘤的增殖指数密切相关,VEGF和VEGFR2的表达与肿瘤的脉管累犯密切相关。线性相关分析显示观察组中Ephrin-A1和VEGF、VEGF和VEGFR2的表达均具有正相关性(均P<0.05)。结论乳腺浸润性导管癌中Ephrin-A1、VEGF和VEGFR2高表达是病变的促进因素,三者具有协同作用,对间质血管生成有一定影响。

恩度联合放疗治疗老年晚期鼻咽癌患者疗效及其对VEGF与VEGFR-2及TSP-1的影响

目的观察重组人血管内皮抑制素注射液(恩度)联合放疗治疗老年晚期鼻咽癌患者的临床疗效及其对患者血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)和血小板反应蛋白-1(TSP-1)的影响。方法选取2016年1月-2018年6月佛山市第一人民医院收治的80例老年晚期(Ⅲ、Ⅳ)鼻咽癌患者为研究对象,随机分为两组,对照组40例采用放、化疗,观察组40例采用放疗联合重组人血管内皮抑制素注射液治疗,观察两组患者的临床疗效,并运用酶联免疫吸附测定法(ELISA)法检测所有患者血清中VEGF、VEGFR-2和TSP-1的表达水平,比较治疗前后的各指标的变化。结果对照组与观察组完全缓解(CR)与部分缓解(PR)患者比较差异无统计学意义(P>0.05);两组总有效率均为100%,差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者恶心呕吐、Ⅲ~Ⅳ黏膜炎、白细胞及血小板下降发生率均明显低于对照组(P均<0.05);治疗后,两组患者血清VEGF及VEGFR-2水平明显降低,TSP-1水平明显增高,与治疗前比较均有统计学意义(P均<0.05);组间比较发现,治疗后观察组患者血清中VEGF及VEGFR-2水平明显低于对照组、TSP-1明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。观察组治疗前Ⅲ、Ⅳ期患者血清中VEGF、VEGFR-2及TSP-1水平均存在明显差异(P均<0.05);治疗后Ⅳ期患者血清中VEGF及VEGFR-2水平下降幅度、TSP-1水平增高幅度明显大于Ⅲ期患者;观察组患者血清中VEGF与VEGFR-2呈正相关(r=0.642,P=0.002),VEGF、VEGFR-2与TSP-1呈负相关(r=-0. 389,P<0.001;r=-0. 652,P<0.001)。结论重组人血管内皮抑制素联合放疗可获得与常规同步放化疗相同的近期疗效,降低不良反应发生率,改善血清中VEGF、VEGFR-2及TSP-1的表达水平,尤其对Ⅳ期患者的疗效更为明显。

HIF-1α、COX-2、VEGF与胶质瘤

目的探讨胶质瘤H IF-1α、COX-2、VEGF表达的临床意义。方法应用免疫组化方法检测71例星形胶质细胞瘤中PTEN,H IF-1,αVEGF蛋白表达情况。结果H IF-1α、COX-2、VEGF蛋白总阳性率分别为57.7%,49.3%,64.8%,在不同恶性级别的胶质瘤中均具有差异性(P<0.05)。与肿瘤的恶性程度相关。H IF-1α、COX-2与VEGF表达正相关。结论COX-2、H IF-1α和VEGF在肿瘤的进展过程中起作用,COX-2和H IF-1α是VEGF表达调控因子。H IF-1α可能是肿瘤形成过程中的早期分子事件,可作为监测肿瘤恶性进展的一个生物标志。

TRAP阳性细胞及HIF-1α、VEGF、FGF-2表达在老年股骨头坏死修复反应中的分布及其意义

目的探讨股骨头坏死的修复反应机制。方法检测51例老年患者(≥60岁)人工关节置换术后股骨头标本的TRAP阳性细胞及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管生成因子(VEGF)、纤维生成因子-2(FGF-2)表达的分布。结果耐酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)阳性细胞主要存在于全部股骨头坏死修复区的过渡带,并随着放射学分期的进展,沿着修复区的过渡带向中心分布。HIF-1α表达在靠近坏死区的纤维坏死带和过渡带的内皮细胞;VEGF表达在修复区的水肿带;FGF-2则表达在整个修复区的血管壁和骨髓细胞。结论在晚期股骨头坏死的坏死区无HIF-1α、VEGF、FGF-2的表达,而参与修复区的血管生成反应;TRAP阳性细胞则出现在骨塌陷后的新生骨周围,并沿着新生血管向中心分布。

雷帕霉素对缺氧条件下Hep-2细胞增殖及VEGF、HIF-1α表达的影响

目的:探讨雷帕霉素对缺氧条件下人喉癌Hep-2细胞增殖及VEGF、HIF-1α表达的影响。方法:在缺氧条件下,采用MTT法检测0、5、10、20 nmol/L雷帕霉素处理12、24、36、48、60、72 h后Hep-2细胞的增殖活性,ELISA检测0、5、10、20 nmol/L雷帕霉素处理24 h细胞培养上清液VEGF蛋白含量的变化,Western blot检测0、5、10、20nmol/L雷帕霉素处理16 h细胞HIF-1α蛋白表达的变化。结果:缺氧条件下雷帕霉素对Hep-2细胞仍具有明显的增殖抑制作用,且呈浓度和时间依赖性(F浓度=253.132,F时间=213.945,P<0.05)。缺氧条件下雷帕霉素可抑制Hep-2细胞VEGF的分泌及HIF-1α蛋白的表达(F=7.045、16.218,P<0.05)。结论:雷帕霉素可抑制缺氧条件下Hep-2细胞的增殖,其机制可能与抑制Hep-2细胞VEGF的分泌及HIF-1α蛋白的表达有关。

胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对HIF-1α、HIF-2α及VEGF表达的影响

目的研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞株BGC-823中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将不同浓度的H.pylori悬液与BGC-823细胞共培养24h后收集细胞,应用MTT法检测细胞存活率,RT-PCR和Western blotting技术检测HIF-1α、HIF-2α及VEGF的表达。对照组加稀释用培养液。结果与对照组比较,H.pylori可显著促进BGC-823细胞的增殖(P<0.05)并能显著提高细胞HIF-1α、HIF-2α及VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 H.pylori感染能够刺激BGC-823细胞VEGF的表达,其机制可能是通过HIF-1α、HIF-2α途径介导。这可能是其诱导胃癌血管生成和促进胃癌侵袭转移的机制之一。

应用组织芯片技术检测HIF-1α、NOS_2、VEGF在胃肠道间质瘤中的表达及临床意义

目的:检测HIF-1α、NOS2、VEGF在胃肠道间质瘤(GIST)中的表达及其与临床病理行为的关系。方法:收集124例GIST标本,用组织芯片和免疫组织化学法检测HIF-1α、NOS2、VEGF表达。结果:在124例GIST中,HIF-1α阳性表达79例(63.7%);NOS2阳性表达80例(64.5%);VEGF阳性表达72例(58.1%),其表达与GIST侵袭转移、NIH分级、黏膜受侵有相关性(P<0.05),三者之间呈正相关(P<0.05)。结论:HIF-1α、NOS2、VEGF在GIST组织中高表达,这为揭示GIST的发生发展提供了新的理论依据,并为GIST有效治疗提供新思路。应用组织芯片大规模高效检测临床样本是可行的,具有快速、准确、方便、经济的特点。

JAK2/STAT3信号通路对A549细胞株中HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达的影响

目的:研究人肺腺癌细胞A549细胞中JAK2/STAT3信号通路对HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达的影响。方法:AG490处理在氧含量正常及缺氧条件下(Co Cl2200μmol/L)48h后Western blot法测定A549细胞中HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达变化(分组为对照组、AG490 50μmol/L、AG490 100μmol/L、Co Cl2、Co Cl2+AG49050μmol/L和Co Cl2+AG490 100μmol/L组)。IL-6(3.85nmol/L)处理A549细胞24h后,检测细胞中STAT3、p-STAT3、HIF-1ɑ、VEGF蛋白表达变化(分组为对照组,IL-6组)。结果:JAK2特异性抑制剂AG490作用48h后,相对于对照组AG490能够下调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性;随浓度的升高,抑制作用更明显。缺氧条件下(Co Cl2200μmol/L)能够上调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达。AG490也能够下调Co Cl2诱导的HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达,且呈浓度依赖性,随浓度的升高,抑制作用更显著。IL-6能够上调HIF-1ɑ、VEGF的蛋白表达。结论:在人肺腺癌细胞A549细胞中,缺氧可上调HIF-1α和VEGF蛋白表达。JAK2/STAT3信号通路对HIF-1α和VEGF蛋白的表达具有调节作用。

重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖和HIF-1α、VEGF表达的影响

目的研究重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞增殖及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用MTT法检测重楼皂苷Ⅰ对细胞增殖的影响,实时定量PCR(RT-PCR)法检测低氧条件下重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞HIF-1αmRNA、VEGF mRNA表达的影响。采用Western blot法检测低氧条件下,重楼皂苷Ⅰ对Hep-2细胞VEGF、HIF-1α、信号传导与转录激活因子3(STAT-3),磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT-3)蛋白表达的影响。结果重楼皂苷Ⅰ对低氧喉癌Hep-2细胞的增殖有抑制作用;其中,1.5、3、6μg/ml浓度组重楼皂苷Ⅰ可下调低氧Hep-2细胞HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。同时,重楼皂苷Ⅰ抑制了STAT-3、p-STAT-3的表达。结论重楼皂苷Ⅰ能抑制低氧条件下喉癌Hep-2细胞增殖和HIF-1α、VEGF的表达,可能与其下调STAT-3表达及抑制STAT-3的磷酸化有关。

桂枝茯苓丸对子宫肌瘤患者血清VEGF、COX-2及HIF-1α表达水平的影响

目的分析桂枝茯苓丸对子宫肌瘤患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶2(COX-2)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平的影响。方法选取2017年4月—2019年4月该院收治的子宫颈瘤患者196例,随机分为观察组、对照组各98例,对照组予以米非司酮治疗,观察组在此基础上应用桂枝茯苓丸治疗,比较两组临床疗效及治疗前后子宫肌瘤体积、血清性激素[卵泡刺激素(FSH)、雌激素(E2)、孕酮(P)、黄体生成素(LH)]、血液流变学指标[血浆黏度(PV)、全血黏度低切(LS)、全血黏度高切(HS)、血小板聚集率(ARBC)]、VEGF、COX-2、HIF-1α水平、不良反应发生率。结果观察组治疗有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗1、2、3个月观察组子宫肌瘤体积小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组E2、P、LH水平明显低于对照组(P<0.05),两组FSH水平比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后PV、LS、HS、ARBC低于对照组(P<0.05);观察组治疗后血清VEGF、COX-2及HIF-1α水平低于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论桂枝茯苓丸用于子宫肌瘤患者中,可明显提高临床疗效,改善患者子宫肌瘤体积、性激素水平、血液流变学指标,可能与下调VEGF、COX-2、HIF-1α的表达有关,且安全性可靠,值得在临床推广实践。

恩度联合吉西他滨对肝癌HepG2细胞的抑制作用及对HIF-1α、VEGF表达的影响

目的:探讨恩度(ES)、吉西他滨(GEM)单药及联合作用在体外对人肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,以及加药前后HIF-1α、VEGF表达的变化。方法:MTT比色法观察不同浓度恩度、吉西他滨及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用。采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞凋亡率的影响。免疫组织化学技术检测上述药物单独或联合应用时HIF-1α、VEGF的表达差异。结果:恩度单药对HepG2细胞无明显增殖抑制及诱导细胞凋亡作用;吉西他滨单药及联合恩度对HepG2细胞有明显抑制作用,且均呈明显的剂量依赖关系,均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用(P<0.05)。加药组与空白组相比、联合用药组与单药组相比,HIF-1α、VEGF的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:吉西他滨单药以及与恩度联合能够抑制人肝癌HepG2细胞并诱导凋亡。两药联合有协同作用。其机制可能与HIF-1α、VEGF有关。

宫颈癌组织和外周血HIF-1a、PDGF、VEGF和Ang-2表达与MVD的关系

目的 探讨宫颈癌患者组织和外周血中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血小板衍生生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)水平变化以及与微血管密度(MVD)的关系。方法 选取2013年11月至2017年10月期间在我院接受治疗的宫颈癌124例和良性宫颈病变患者61例,收集其术前外周血和术后病理标本。采用免疫组化染色和ELISA法检测两组患者组织和外周血HIF-1a、PDGF、VEGF和Ang-2的表达以及与MVD关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析MVD的诊断效力。结果 宫颈癌患者组织中HIF-1a、PDGF、VEGF和Ang-2高表达率分别为78.23%、71.77%、79.84%、73.39%,外周血中的表达水平分别为(544.82±119.36)ng/ml、(748.19±315.24)pg/ml、(1189.45±313.62)pg/ml、(539.65±218.57)pg/ml,均高于宫颈良性病变患者(P<0.05)。HIF-1α、PDGF、VEGF、Ang-2蛋白高表达者MVD值分别为43.09±9.35、42.49±8.27、38.56±9.54、44.63±9.09,明显高于低表达者(P<0.05)。ROC曲线结果显示,MVD预测宫颈癌的敏感度为77.3%,特异度为60.0%,最佳截断值为20.58。MVD>21宫颈癌患者中血清HIF-1α、PDGF、VEGF、Ang-2水平分别为(723.11±252.74)ng/ml、(997.28±376.12)pg/ml、(1349.23±353.87)pg/ml、(735.65±226.78)pg/ml,均高于MVD≤21宫颈癌患者的(156.24±199.38)ng/ml、(423.25±284.69)ng/ml、(841.21±298.46)ng/ml和(330.01±194.77)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌组织和外周血中HIF-1α、PDGF、VEGF、Ang-2水平可作为预测其侵袭和转移的参考指标。

IL-4、VCAM-1、VEGF与VEGFR2在MDCK细胞中的表达分布

目的:研究IL-4、VCAM-1、VEGF和VEGFR2四种蛋白在MDCK细胞中的表达与分布,探讨四种蛋白与MDCK细胞成瘤性的相关性。方法:采用免疫组化SP(streptavidin-perosidase)法观察四种蛋白在MDCK细胞中的表达分布特点。结果:IL-4、VCAM-1、VEGF与VEGFR2四种蛋白在MDCK细胞中均有表达。结论:IL-4定位于MDCK细胞胞浆中,在胞核及胞质中表达,呈弥漫性分布;VCAM-1、VEGF与VEGFR2三种蛋白定位于MDCK细胞胞膜上,在胞膜及胞质中表达。IL-4、VCAM-1、VEGF和VEGFR2蛋白均为细胞因子并参与细胞成瘤进程,可能与MDCK细胞成瘤性存在相关联系。

Tetramethylpyrazine and paeoniflorin combination(TMP-PF)inhibits angiogenesis in atherosclerosis via miR-126/VEGF/VEGFR2 signaling pathway

Angiogenesis in atherosclerosis(AS)promotes plaque destabilization.miR-126 has a significant role in angiogenesis.Tetramethylpyrazine(TMP)and paeoniflorin(PF)have anti-atherosclerotic effects.However,the miR-126-related mechanisms of TMP and PF combination(TMP-PF)on angiogenesis in AS have not been understood.To explore the mechanism of TMP-PF on angiogenesis in AS targeting miR-126.Human umbilical vein endothelial cells(HUVECs)were assigned into the control,model,TMP-PF,TMP-PF+miR-126 inhibitor,and simvastatin groups.HUVECs were transfected with miR-126 inhibitor or negative control,incubated with oxidized low-density lipoprotein(ox-LDL)to establish AS model,and then treated with TMP-PF or simvastatin.Cell proliferation,migration,and tube formation assays are conducted,and the expression of angiogenesis-related factors were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)and Western blotting.The expression level of miR-126 was confirmed by polymerase chain reaction(PCR).0x-LDL promoted HUVECs proliferation,migration,and tube formation,downregulated miR-126 expression,and increased the expression of VEGF,VEGFR2,bFGF,and FGFR1.TMP-PF inhibited proliferation,migration,and tube formation,upregulated miR-126 expression and decreased the expression of VEGF,VEGFR2,bFGF,and FGFR1 in ox-LDL-induced HUVECs.However,the effects of TMP-PF on angiogenesis and the expression of miR-126,VEGF,VEGFR2,and FGFR1 were abolished by miR-126 inhibitor.TMP-PF suppressed angiogenesis in AS by regulating miR-126/VEGF/VEGFR2 pathway,which might elucidate the underlying mechanism of TMP-PF in alleviating AS.

毛兰素通过调节HIF-1α/VEGF/VEGFR2信号通路抑制恶性黑素瘤细胞血管生成

目的 探究毛兰素通过调节缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)/血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)信号通路对恶性黑素瘤细胞血管生成的影响。方法 不同浓度毛兰素处理B16F10细胞筛选合适的药物作用浓度。体外培养B16F10细胞、人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)并随机分为对照组、毛兰素低、高剂量组、空载组、毛兰素高剂量+HIF-1α过表达组,分组处理后,提取B16F10细胞条件培养基,酶联免疫吸附反应(ELISA)测定B16F10细胞培养基中VEGF水平;并用提取的B16F10细胞条件培养基按上述分组处理HUVECs,小管形成实验检验各组HUVECs细胞成管长度。建立B16F10移植瘤小鼠模型并按上述分组进行处理,免疫组化染色检测各组移植瘤微血管密度(CD31表达)及VEGF表达;免疫印迹检测各组B16F10细胞及其移植瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路蛋白表达。结果 与对照组相比,毛兰素低、高剂量组B16F10细胞培养基中VEGF水平、HUVECs细胞成管长度、移植瘤CD31及VEGF阳性细胞比例、B16F10细胞及其移植瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR2蛋白表达均降低(P <0.05);与毛兰素高剂量组相比,毛兰素高剂量+HIF-1α过表达组B16F10细胞培养基中VEGF水平、HUVECs细胞成管长度、移植瘤CD31及VEGF阳性细胞比例、B16F10细胞及其移植瘤小鼠肿瘤组织中HIF-1α、VEGF、VEGFR2蛋白表达升高(P<0.05)。结论 毛兰素通过下调HIF-1α/VEGF/VEGFR2通路而在体内外抑制恶性黑素瘤细胞血管生成。