热应激对从江香猪十二指肠黏膜结构、HIF-1及其相关蛋白表达的影响

旨在研究热应激(heat stress,HS)对从江香猪十二指肠黏膜屏障结构的影响,同时跟踪检测低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)的表达特征及调控机制。试验选取24头育肥期从江香猪,随机分为6组,除对照组(Con),其余5组进行不同时间热应激处理(6、12、24、48、72 h),试验过程中检测从江香猪直肠温度和呼吸频率,试验结束时采集各组从江香猪十二指肠。苏木精-伊红染色(HE)和阿利新蓝-过碘酸雪夫反应(AB-PAS)观察各组十二指肠组织结构和杯状细胞数量变化;TUNEL染色检测十二指肠细胞凋亡率;实时荧光定量(qRTPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学分别检测紧密连接相关蛋白、HIF-1及其上游调控因子HSP90和PHD-2的表达变化。结果显示,与对照组相比,热应激可使从江香猪直肠温度和呼吸频率明显升高,肠绒毛高度下降,隐窝深度增加,绒腺比降低,闭合蛋白(Occludin)和紧密连接蛋白1(ZO-1)表达水平呈时间依赖性下降,杯状细胞数量增多。TUNEL检测结果显示,HS处理72 h后,十二指肠上皮细胞凋亡率显著上升(P<0.001)。免疫组织化学、qRT-PCR和Western blot对HIF-1α、HSP90和PHD-2的表达进行检测,结果显示,相较于对照组,HS处理72 h后十二指肠黏膜上皮HIF-1αmRNA和蛋白表达量随HS时间延长而增加;HSP90阳性细胞在对照组和热应激组中均集中于黏膜上皮,其表达趋势与HIF-1α一致;PHD-2表达特征与HSP90相反,其表达强度在HS组中明显减弱,且随HS时间增加,PHD-2 mRNA和蛋白水平均呈时间依赖性下降。以上结果说明,HS可引起十二指肠上皮细胞凋亡,损伤十二指肠黏膜屏障;HIF-1的表达升高与十二指肠细胞凋亡密切相关,且可能同时受HSP90和PHD-2调控。

新生儿维生素K1、K2表达水平及其临床意义研究

研究新生儿体内维生素K1(Vitamin K,VK1)、VK2的表达水平,可以了解新生儿VK代谢状况,寻找导致VK缺乏或异常的原因, 为后续的临床干预和治疗提供依据。方法 收集2021年1月至2023年3月的442例新生儿资料, 所有新生儿出生后6 h内肌肉注射VK1 l mg1次,72个小时后采集新生儿静脉血并检测维生素K1和K2的表达水平。将新生儿分为生VK1异常组/正常组和VK2 MK-4、VK2MK-7异常组/正常组共6组,对比性别、胎龄、出生体重、喂养方式和新生儿溶血、黄疸两类不良事件的发生率。结果 新生儿VK1表达水平与出生体重和胎龄显著相关(P<0.05),出生体重低/早产儿更易出现VK1水平异常,此外VK1表达水平过高情况较为普遍,提示临床需要进一步考虑不同剂量和注射时间的影响。VK2中MK-4和MK-7水平表达异常表现为水平过低,MK-4过低与纯母乳喂养有关(P<0.05)。新生儿溶血与黄疸与VK表达水平不具有显著相关性(P>0.05)。结论 新生儿VK1表达水平与出生体重和胎龄显著相关,VK2喂养方式有关,临床应进一步优化VK补充方案,预防迟发型维生素K缺乏引起的出血性疾病。

胃癌患者淋巴结转移、病情进展与Tspan-1表达水平的相关性

目的观察胃癌患者淋巴结转移、病情进展与四旋蛋白1重组蛋白(Tspan-1)表达水平的相关性,以便为临床治疗提供参考价值。方法选取福建省莆田市第一医院在2018年1月至2021年6收治的150例胃癌根治术患者作为研究对象,根据术后病理情况分为淋巴结转移组(LN组,n=120例)与无淋巴结转移组(NLN组,n=30例),采用问卷调查法收集两组一般资料,并对其进行logistic多因素分析和Pearson相关性分析,评估影响胃癌根治术后患者淋巴转移的相关危险因素及相关性情况。结果150例患者中共120例患者出现淋巴结转移,经调查可知,LN组严重疾病病情进展发生率高于NLN组(P<0.05);比较两组患者一般资料,NLN组肿瘤浸润深度、是否存在溃疡、肿瘤直径、肿瘤分型及年龄因素与LN组比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者癌组织中Tspan-1蛋白表达水平均低于癌旁组织,且LN组癌组织中Tspan-1蛋白表达水平高于NLN组(P<0.05);logistic回归分析结果显示,肿瘤分型为未分化型、肿瘤浸润深度至浆膜层、存在溃疡与Tspan-1高表达均为胃癌患者淋巴结转移的独立危险因素(P<0.05);且经Pearson相关性分析可知,淋巴结转移、疾病进展分别与Tspan-1表达水平呈正相关(r>0,P<0.05)。结论导致胃癌根治术后患者淋巴结转移的主要影响因素为Tspan-1高表达水平,且还与患者术后病情进展风险高度相关。

IGF-1、IGFBP-3在非小细胞肺癌中的表达水平分析

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达意义。方法选取2020年1月至2023年12月本院收治的30例NSCLC患者为观察组,另选同期30例行体检的健康人群为对照组,均行IGF-1、GFBP-3检测,收集NSCLC患者病理类型、TNM分期、淋巴结转移情况等,分析IGF-1、IGFBP-3在NSCLC中的表达意义。结果观察组血清IGF-1水平高于对照组、IGFBP-3水平均低于对照组(P<0.05);不同年龄、性别、病理类型的NSCLC患者血清IGF-1、IGFBP-3水平相比,无显著差异(P>0.05),Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的NSCLC患者血清IGF-1水平较Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的NSCLC患者高(P<0.05),而Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的NSCLC患者血清IGFBP-3水平较Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的NSCLC患者低(P<0.05);血清IGF-1对NSCLC的ROC曲线下面积(AUC)、特异度、敏感度分别为0.762、82.36%、80.19%,血清IGFBP-3对NSCLC的AUC、特异度、敏感度分别为0.789、85.62%、83.96%。结论血清IGF-1在NSCLC患者中呈高表达,血清IGFBP-3在NSCLC患者中呈低表达,两项指标水平与NSCLC患者TNM分期、淋巴结转移有密切关系,且对NSCLC有一定诊断价值。

缺氧环境对PC12细胞损伤及HIF-1 mRNA表达水平的影响

目的探讨缺氧环境对PC12细胞的损伤作用及其初步机制。方法建立PC12细胞缺氧模型;倒置相差显微镜观察细胞形态;MTT法检测正常及缺氧环境对PC12细胞的增殖;PC12细胞缺氧培养0,2,4,8,12,24和48 h后测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH);用Real-time RT-PCR检测HIF-1 mRNA的表达水平。结果缺氧培养24 h,48 h后PC12细胞增殖受到抑制(P<0.05,P<0.01);PC12细胞缺氧培养2、4、8 h后培养液中的LDH活性从2～8 h逐渐增高,8 h达到最高值(P<0.01),8 h后逐渐下降;PC12缺氧培养0～4 h HIF-1 mRNA的表达水平逐渐增高,4 h达到最高,4～48 h逐渐降低。结论缺氧环境可引起PC12细胞损伤,缺氧8 h损伤最严重。缺氧导致HIF-1基因表达水平提高,4 h时达到峰值。

SLC29A1在泛癌中的表达及其临床意义

目的 分析溶质载体家族1号基因(solute carrier family 29 member 1, SLC29A1, ENT1)在泛癌中的表达及其临床意义。方法 利用数据库分析SLC29A1在泛癌中的表达水平及其与肿瘤患者生存期、免疫浸润、免疫检查点、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性、趋化因子及趋化因子受体的关系,并分析SLC29A1在泛癌中的突变特征及SLC29A1与泛癌生物学行为的关系。结果 SLC29A1在急性成淋巴细胞性白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、胶质母细胞瘤(glioblastoma,GMBLGG)、脑低级别胶质瘤(lower-grade glioma, LGG)等13种肿瘤中呈显著高表达;而在子宫内膜癌(uterine corpus endometrial carcinoma, UCEC)、宫颈鳞癌和腺癌(cervical squamous cell carcinoma and endocervical adenocarcinoma, CESC)、肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma, LUSC)等18种肿瘤中呈显著低表达。且SLC29A1表达水平与肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma, ACC)患者预后呈正相关,而与LGG患者预后呈负相关。SLC29A1在前列腺癌(prostate adenocarcinoma, PRAD)中的表达水平越高,免疫细胞浸润程度越高,基质评分、免疫评分和基质免疫评分越高。SLC29A1在PRAD中与大多数免疫检查点相关基因呈正相关,而在胸腺癌(thymoma, THYM)中与ENTPD1、TLR4等免疫激活因子呈负相关。SLC29A1在间皮瘤(mesothelioma,MESO)中与趋化因子CX3CL1呈显著正相关,而在多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)中与趋化因子受体CXCR2呈显著正相关。SLC29A1在GBMLGG、LGG中与肿瘤突变负荷显著正相关,而在胃腺癌(stomach adenocarcinoma, STAD)中与肿瘤突变负荷和微卫星不稳定性显著负相关。SLC29A1在食管腺癌患者突变频率最高,且在大多数肿瘤中SLC29A1均与DNA损伤呈正相关。结论 SLC29A1与多种肿瘤的预后、免疫浸润、免疫检查点、肿瘤突变负荷、微卫星不稳定性及肿瘤生物学行为等密切相关,提示其可能成为富有前景的肿瘤治疗靶点。

Tmem16a、E-cadherin、SIRT1在眼睑基底细胞癌中的表达及其临床意义

目的分析跨膜蛋白16a(Tmem16a)、钙黏蛋白E(E-cadherin)、沉默信息调节因子1(SIRT1)在眼睑基底细胞癌中表达水平及其临床意义。方法将70例经病理检查证实为眼睑基底细胞癌患者手术切除的癌组织纳入研究组,其癌周正常组织纳入对照组。术后随访36个月观察复发情况。比较癌组织及癌周正常组织中Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平,不同性别、年龄、不同病理特征患者癌组织中Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平,癌组织中Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平与复发的关系。结果癌组织中Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平高于癌周正常组织(P<0.05)。相比年龄≤60岁的眼睑基底细胞癌患者,年龄≥60岁的患者癌组织中Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平更高(P<0.05)。肿瘤体积≥3 cm^(3)、脉管侵犯、分化的眼睑基底细胞癌患者癌组织Tmem16a、E-cadherin、SIRT1表达水平更高(P<0.05)。癌组织中Tmem16a阳性表达眼睑基底细胞癌患者复发率为44.44%(16/36),高于阴性表达患者[20.59%(7/34)],P<0.05;癌组织中E-cadherin阳性表达眼睑基底细胞癌患者复发率为56.67%(17/30),高于阴性表达患者[15.00%(6/40)],P<0.05;癌组织中SIRT1阳性表达眼睑基底细胞癌患者复发率为40.00%(22/55),高于阴性表达患者[6.67%(1/15)],P<0.05。结论眼睑基底细胞癌患者癌组织Tmem16a、E-cadherin、SIRT1阳性表达水平更高,其表达与其病理特征、年龄、复发情况密切相关,可为评估病情进展和预后提供参考。

宫颈癌组织MNX1-AS1、FR-α水平与病理特征的关系及其诊断意义

目的 探讨宫颈癌组织MNX1反义RNA 1(MNX1-AS1)、叶酸受体-α蛋白(FR-α)水平与病理特征的关系及其诊断意义。方法 选取2018年1月至2018年10月在本院进行手术治疗的85例宫颈癌患者为研究对象,纳入观察组,另选我院收治的50例宫颈炎患者为对照组。采集观察组患者的癌组织、癌旁组织及对照组宫颈组织标本,三组标本以免疫组化法检测MNX1-AS1、FR-α的表达率和表达水平并进行组间比较,分析宫颈癌组织MNX1-AS1、FR-α表达与病理特征及预后的关系。结果 观察组宫颈癌组织及癌旁组织的MNX1-AS1、FR-α阳性表达率高于对照组,且宫颈癌组织阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。观察组宫颈癌组织、癌旁组织的MNX1-AS1、FR-α表达水平高于对照组,且宫颈癌癌组织MNX1-AS1、FR-α水平高于癌旁组织(P<0.05)。MNX1-AS1、FR-α表达与宫颈癌患者的年龄病理分型、肿瘤直径、分化程度无关,而与宫颈癌肿瘤的FIGO分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。对观察组患者进行为期3年的随访观察,MNX1-AS1、FR-α阳性组的3年生存率低于阴性组(P<0.05)。结论 宫颈癌患者中MNX1-AS1、FR-α呈现高表达,并能对宫颈癌组织的浸润、转移、分期发挥协同作用,与宫颈癌的发生、发展及预后密切关联,对宫颈癌有重要的诊断意义。

HIF-1α的表达水平与前列腺癌术后进展风险的关系研究

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达水平与前列腺癌术后进展风险的关系。方法 90例前列腺疾病住院患者,根据前列腺组织性质不同分为A组(经尿道前列腺电切术留取的石蜡包埋良性前列腺增生组织)和B组(经前列腺癌根治术留取的石蜡包埋前列腺癌组织),每组45例。采用免疫组织化学染色方法测定两组的HIF-1α蛋白表达水平。比较A组、B组HIF-1α蛋白阳性检出率;比较不同术后临床病理特征前列腺癌患者HIF-1α表达情况。结果 HIF-1α在前列腺术后组织中均有表达, B组HIF-1α蛋白阳性检出率为77.78%,明显高于A组的13.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Gleason分级低分化患者HIF-1α阳性率95.00%高于高、中级分化患者的64.00%, TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者HIF-1α阳性率88.89%高于Ⅰ~Ⅱ期患者的61.11%,淋巴结转移患者HIF-1α阳性率100.00%高于无淋巴结转移患者的65.52%,癌穿透被膜患者HIF-1α阳性率94.44%高于无癌穿透被膜患者的66.67%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论前列腺癌术后HIF-1α在前列腺癌组织中表达增强,其可能参与疾病的发生及发展过程, HIF-1α表达增强可能与前列腺癌术后患者病情恶化有关,提示患者预后不佳。

长链非编码RNA 00941、微小RNA-145表达及转化生长因子β1/Smad通路相关因子在胃癌组织中的表达及意义

目的:探究长链非编码RNA00941(Linc00941)、微小RNA-145(miR-145)表达及转化生长因子β1/Smad(TGF-β1/Smad)通路相关因子在胃癌组织中的表达与意义。方法:选取收治的51例胃癌患者,手术治疗后经病理学检查确诊。收集其胃癌组织及其癌旁组织,比较其中Linc00941、miR-145及TGF-β1/Smad通路相关因子表达差异;提取患者的胃癌组织细胞进行组织培养,并对其进行Linc00941、miR-145基因的转染、沉默,分析其对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:与癌旁组织比较较,胃癌组织患者的Linc00941及其信使核糖核酸(mRNA)相对表达水平升高,miR-145及其mRNA相对表达水平降低(均P<0.05)。胃癌组织中的TGF-β1、转化生长因子β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)及Smad2/3均较癌旁组织显著降低(均P<0.05)。NC组、Linc00941转染组及Linc00941沉默组三组间吸光值(A值)及凋亡率两两比较均存在统计学差异(均P<0.05),Linc00941沉默组在培养24、48、72 h时的A值低于NC组,凋亡率高于NC组;Linc00941转染组各时间的A值高于NC组,凋亡率低于NC组(均P<0.05)。与NC组比较较,Linc00941沉默组的细胞迁移数目及细胞侵袭数目均降低,Linc00941转染组均升高,组间两两比较差异存在统计学意义(均P<0.05)。与NC组比较较,miR-145转染组培养24、48、72 h的A值均降低,凋亡率升高;miR-145沉默组的A值升高,细胞凋亡率降低(均P<0.05)。与NC组比较较,miR-145转染组的细胞迁移数目及细胞侵袭数目均降低,miR-145沉默组均升高,组间两两比较差异存在统计学意义(均P<0.05)。结论:在胃癌组织中,Linc00941及其mRNA相对表达水平升高,miR-145及其mRNA相对表达水平降低,TGF-β1/Smad通路相关因子TGF-β1、TGF-βRⅡ及Smad2/3表达降低,且Linc00941、miR-145表达影响胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

ERK1/2信号通路在3种骨肉瘤细胞中的作用和表达水平的研究

目的观察细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)激动剂表皮生长因子(EGF)和抑制剂PD98059对3种骨肉瘤细胞株U2OS、MG63、UMR106的增殖影响以及ERK1/2基因和蛋白在3种细胞株中的表达水平,筛选出ERK1/2基因和蛋白表达最高的骨肉瘤细胞株用于后续实验研究。方法采用细胞计数和CCK8法分别测定U2OS、MG63、UMR106细胞的生长情况,同时使用EGF和PD98059分别干预3种细胞株,观察其对3种骨肉瘤细胞增殖的影响;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测3种细胞株中ERK1/2基因的表达;采用Western-blot检测3种细胞株中ERK1/2蛋白、p-ERK1/2蛋白的表达情况。结果细胞计数和CCK8结果均显示,U2OS和UMR106在正常情况下培养48 h可达最佳生长状态,而MG63细胞的最佳生长状态时间为24 h;EGF在干预细胞24 h和48 h均能使U2OS、MG63、UMR106细胞增殖,而PD98059在干预细胞24 h和48 h均能使3种细胞的增殖受到抑制(P<0.05)。RT-qPCR结果显示在培养48 h后,U2OS细胞中的ERK1/2基因表达水平最高。Western-blot结果显示在培养48 h后,U2OS细胞中ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平最高,UMR106细胞次之,而MG63细胞中ERK1/2和p-ERK1/2的蛋白表达水平最低(P<0.05)。结论U2OS细胞株生长期长,增殖活力强,同时ERK1/2基因、蛋白以及p-ERK1/2蛋白的表达水平高,适合用于骨肉瘤ERK1/2信号通路的研究。

乳腺癌患者MTA1、USP28和Ezrin蛋白表达情况及临床意义

目的:探究乳腺癌患者癌组织肿瘤转移基因1(MTA1)、泛素特异性蛋白酶28(USP28)和埃兹蛋白(Ezrin)表达情况及临床意义。方法:选取2018年1月—2021年1月江苏大学附属武进医院收治的60例乳腺癌患者,取其乳腺癌组织与癌旁正常组织(距病灶≥3cm),比较癌组织与癌旁正常组织MTA1、USP28、Ezrin蛋白的表达情况,并分析乳腺癌组织MTA1、USP28、Ezrin蛋白表达情况与病理特征及预后的关系。结果:癌组织中MTA1、USP28、Ezrin表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅲ期乳腺癌患者MTA1、USP28、Ezrin阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴转移患者MTA1、USP28、Ezrin阳性率高于淋巴未转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。MTA1、USP28、Ezrin阳性表达病死率高于阴性表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌患者癌组织MTA1、USP28、Ezrin的阳性率高于癌旁组织,且其表达情况与肿瘤分期、淋巴转移及预后关系密切。三者均可能成为判断乳腺癌预后的敏感标志物。

胃腺癌中miR-550a-3p和TDP1 mRNA的表达水平及临床意义

目的:分析胃腺癌中微小RNA-550a-3p(miR-550a-3p)和酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1(TDP1)mRNA的表达水平及临床意义。方法:选取2020年1月至2022年10月在该院行手术治疗的54例胃腺癌患者进行前瞻性研究,留取术后胃腺癌组织和距肿物边缘>5 cm的正常胃黏膜组织,应用实时荧光定量PCR法检测胃腺癌组织和正常胃黏膜组织中miR-550-5p和TDP1 mRNA水平,比较胃腺癌组织与正常胃黏膜组织、不同病理特征胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平,分析miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病的相关性。结果:胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、淋巴结转移、分化程度、脉管侵犯的胃腺癌组织miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤最大径≥5cm、浸润深度浆膜及以下胃腺癌组织的miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平均高于肿瘤最大径<5 cm、浸润深度未及浆膜的胃腺癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌发病呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:miR-550a-3p和TDP1 mRNA水平与胃腺癌的病灶大小和浸润程度明显相关,且与发病情况呈正相关。

日粮不同蛋白质水平对绵羊IGF-1和GH分泌及基因表达的影响

本研究旨在探讨不同蛋白质水平日粮对绵羊胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和生长激素(GH)分泌及基因mRNA表达量的影响,为科学配置肉羊饲料及研究肉羊生长发育提供基础。选择6月龄体重相近的多胎萨福克公羔18只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白质水平的日粮(低蛋白日粮、中蛋白日粮和高蛋白日粮)。采用ELISA方法和SYBR Green Real-time PCR方法检测日粮不同蛋白质水平对不同生长发育阶段(30、60、90和120d)羔羊外周血中IGF-1、GH浓度和皮肤组织中基因表达的影响。结果显示,日粮蛋白质水平显著影响绵羊平均日增重、外周血中IGF-1和GH的浓度以及皮肤组织IGF-1基因的表达丰度,而未显著影响GH基因的表达丰度。结果提示,随着日粮蛋白质水平的升高,绵羊生长发育快,外周血中IGF-1浓度增加,GH浓度降低,IGF-1基因表达量增加。

低氧训练对大鼠肾皮质HIF-1α、VEGF基因表达的影响

目的:探讨不同模式低氧耐力训练对大鼠肾皮质HIF-1α、VEGF基因表达的影响。方法:6周龄雄性SD大鼠90只,经过适应性训练后筛选出60只,随机分为6组:常氧安静组、低氧安静组、低住低练组、高住低练组、低住高练组。采用常压低氧舱以13.6%的氧浓度(相当于海拔3 500 m的氧浓度)进行低氧训练,低氧训练强度为30 m/min,常氧训练强度为35 m/min,持续运动1 h/d,5天/周,训练4周。安静组4周末、训练组最后一次训练恢复24 h后取材。采用实时荧光定量PCR技术测试大鼠肾皮质HIF-1α、VEGF mRNA水平的变化。结果:高住高练组大鼠肾皮质HIF-1α、VEGF mRNA表达较低住低练组均有非常显著性上调(P<0.01);高住低练组、低住高练组大鼠肾皮质HIF-1α、VEGF mRNA表达与低住低练组相比有所升高,但无显著性差异;高住高练组HIF-1α与VEGF表达呈高度正相关,相关系数为0.798(P<0.05)。结论:高住高练比高住低练、低住高练更能促进肾皮质HIF-1α、VEGF mRNA表达;高住高练肾皮质HIF-1α基因表达对VEGF转录有一定促进作用。

羊驼MC1R基因克隆及其在不同毛色个体中表达水平研究

为了获取羊驼MC1R基因序列,探索MC1R基因表达水平与羊驼毛色之间的相关性,根据GenBank已发表序列(EU1358800)设计1对引物,以羊驼皮肤总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增并成功获得了中华白色羊驼MC1R基因cDNA序列,长度为1081 bp,编码317个氨基酸,与已发表序列进行对比,同源性为99%,发现7处突变。根据所克隆序列设计引物,采用实时荧光定量PCR技术(QRT-PCR),分析MC1R基因在白色和棕色羊驼皮肤中的基因表达量,并对结果进行统计分析。结果表明:经过内参基因校正后,棕色羊驼皮肤中MC1R基因的相对表达量是白色羊驼相对表达量的4.32倍(P<0.01)。MC1R基因表达量的差异与羊驼毛色表型之间可能存在一定的相关性。

HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊不同组织中的表达及其意义

高原低氧适应性研究对于了解高原土著动物的遗传进化和高原疾病的治疗有着重要意义。HIF(hypoxia inducible factor)是氧信号转导系统的重要转录因子,在细胞的低氧应答中起着关键作用。实验旨在研究HIF-1α和HIF-2α基因表达特征在藏绵羊低氧适应中的意义。采用RT-q PCR技术对藏绵羊HIF-1a和HIF-2a基因进行了组织表达分析。结果表明:HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊的8种组织(心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑和脑干)中均有表达。HIF-1α基因在肺和小脑中有高水平表达,其他依次是肾、脑干、大脑、心、脾和肝。HIF-2α基因在肺中表达水平最高,其他依次是脑干、心、肾、小脑、大脑和肝。结论:该研究首次证实,HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊脾、大脑、小脑和脑干中均有表达,且HIF-1α在小脑中的表达水平较高。HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊上呈表达广泛性和组织差异性,与其他高原土著动物有着类似的表达特征。这种个别组织HIF-1α和HIF-2α表达水平的提高提示,其正是维持低氧环境下生物体功能活动正常运转的分子基础。

HIF-1α和PTEN基因在肾细胞癌中表达的相关性及临床意义

目的:探讨抑癌基因PTEN与HIF-1α在肾细胞癌中的表达及相互关系。方法:用免疫组化S-P法检测80例肾细胞癌、40例癌旁肾组织,10例非瘤正常肾组织中PTEN及HIF-1α的表达,将表达结果与临床分期、组织学分级及淋巴转移等生物学行为进行相关分析。结果:PTEN蛋白表达与肾癌Robson分期及组织学分级呈负相关,HIF-1α蛋白表达与肾癌Robson分期及组织学分级呈正相关。PTEN阳性表达组HIF-1α阳性表达率为42.3%,PTEN阴性表达组HIF-1α阳性表达率为85.7%,两者显著负相关(r=-0.419,P<0.01)。结论:PTEN及HIF-1α的表达与肾癌的组织学分级、临床分期和淋巴结转移密切相关,可作为判断肿瘤浸润进展的指标。

升阳益胃汤对溃疡性结肠炎模型大鼠HIF-1、TAK-1表达的影响

目的:研究升阳益胃汤对溃疡性结肠炎大鼠模型的治疗作用及对HIF-1、TAK-1表达的影响。方法:采用5%葡聚糖硫酸钠溶液灌胃造模,随机分为两组,即正常对照组和模型组,造模成功后,模型组又分为模型对照组、升阳益胃汤高剂量组、中剂量组、低剂量组及西药组。模型组和正常组给予等容的蒸馏水灌胃,药物组按各自剂量采取灌胃途径给药,连续28 d后,将大鼠麻醉取材,检测指标。结果:模型组和升阳益胃汤低剂量组大鼠DAI显著升高;西药组和升阳益胃汤中、高剂量组大鼠DAI显著降低。病理示,升阳益胃汤各剂量组和西药组结肠组黏膜仍可见腺体及杯状细胞,虽仍可见炎性细胞浸润,但明显少于模型组,其中高剂量组和西药组效果较好。ELISA示,HIF-1:模型组和西药组均较正常对照组显著升高,西药组和高、中、低剂量组均模型组显著降低,高、中、低剂量组均较西药组显著降低。TAK-1:模型组、西药组、低、高剂量组均较正常对照组显著升高,低、中剂量组较模型组显著降低,中剂量组较西药组、及低、高剂量组TAK均显著降低。结论:升阳益胃汤可降低溃疡性结肠炎大鼠HIF-1和TAK-1的表达,抑制炎症的反应,从而对本病起到治疗作用,且有一定的量效关系。

人HIF-1α的腺病毒表达载体的构建与分析(英文)

低氧诱导因子 1(hypoxiainduciblefactor 1,HIF 1)是由HIF 1α和HIF 1β组成的异源二聚体转录因子 ,在细胞的氧平衡过程中起重要作用。在应答低氧信号时 ,HIF 1α亚基表达水平上调 ,并通过激活参与细胞能量代谢、红血细胞生成以及血管生成的靶基因表达 ,达到保护局部缺 贫血细胞免于凋亡或死亡 ,而后者则是临床上影响大脑和脊椎神经损伤恢复的主要原因。为了达到基因治疗急性神经损伤的目的 ,我们构建了表达HIF 1α的重组腺病毒载体。实验表明 ,重组腺病毒可以在大肠杆菌中组装 ,并在HEK2 93T细胞中包装。包装后的HIF 1α重组腺病毒载体的病毒感染效率为 2× 10 1 3CFU ,外源基因HIF 1α在He1a细胞中的表达 6h后达到峰值。目前正在开展建立在此基础上的急性神经损伤动物模型试验。