HIF-2α通过调控NEK1表达减轻肾小管上皮细胞缺氧损伤的研究

目的探讨缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的作用及机制。方法体外培养人近曲小管上皮细胞(HK-2细胞),以2.5μmol/L抗霉素A作用24 h构建缺氧HK-2细胞模型,采用qRT-PCR法和Western blot法检测HIF-2α在正常HK-2细胞和缺氧HK-2细胞中的表达;将HIF-2α干扰序列(siRNA-HIF-2α)及其阴性对照(siRNA-NC)、NIMA相关激酶-1(NEK1)过表达质粒(pcDNA3.0-NEK1)及空载体质粒(pcDNA3.0-NC)转染至缺氧HK-2细胞后,采用CCK-8法检测缺氧HK-2细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI双染法检测缺氧HK-2细胞凋亡率,qRT-PCR法和Western blot法检测缺氧HK-2细胞中NEK1表达。结果与正常HK-2细胞比较,缺氧HK-2细胞中HIF-2αmRNA和蛋白表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Control组比较,Hypoxia组细胞增殖活性降低、细胞凋亡率升高、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Hypoxia组比较,si-NC组细胞增殖活性、细胞凋亡率、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与si-NC组比较,si-HIF-2α组细胞增殖活性降低、细胞凋亡率升高、细胞中NEK1 mRNA和蛋白表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与si-HIF-2α组比较,si-HIF-2α+pcDNA3.0-NC组细胞增殖活性、细胞凋亡率均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与si-HIF-2α+pcDNA3.0-NC组细胞比较,si-HIF-2α+pcDNA3.0-NEK1组细胞增殖活性升高、细胞凋亡率降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HIF-2α可能通过调控NEK1表达促进缺氧HK-2细胞增殖、抑制细胞凋亡,从而减轻HK-2细胞缺氧损伤。

HIF-1α、HIF-2α及OPA1基因在藏绵羊肺脏中的表达特征分析

试验通过RT-qPCR和ELISA方法分别测定了HIF-1α、HIF-2α及OPA1在不同海拔梯度(2500 m、3500 m、4500 m)和年龄段(4月龄、1.5岁、3.5岁)藏绵羊肺脏中的mRNA和蛋白质表达水平,分析HIF-1α、HIF-2α及OPA1表达特征在藏绵羊高原低氧适应中的作用模式。结果显示:在不同海拔梯度和年龄段,HIF-1α、HIF-2α及OPA1基因mRNA与蛋白质表达趋势基本一致;随着海拔的升高,HIF-1α和HIF-2α基因与蛋白表达量呈递增趋势,OPA1基因与蛋白表达量呈递减趋势,且HIF-1α和HIF-2α基因表达量随着海拔的升高显著增加(P<0.05),OPA1基因的表达量随着海拔的升高显著减少(P<0.05),OPA1蛋白在2500 m海拔的表达量显著高于4500 m海拔的表达量(P<0.05);随着年龄的增加,HIF-1α和HIF-2α基因与蛋白表达量呈递增趋势,OPA1基因与蛋白表达量呈递减趋势,且HIF-1α基因表达量随着年龄的增加而显著增加(P<0.05),OPA1基因表达量随着年龄的增加而显著减少(P<0.05)。同时,在不同海拔梯度和年龄段,HIF-1α蛋白表达量都明显低于HIF-2α和OPA1蛋白的表达量。以上结果提示,HIF-1α、HIF-2α及OPA1基因和蛋白质表达水平的海拔差异性和年龄差异性有可能是低氧环境下维持生物体功能活动正常运转的分子基础。

HIF-1α、HIF-2α和MT在人甲状腺乳头状癌中的表达及其意义

目的:探讨HIF-1α、HIF-2α和MT在人甲状腺乳头状癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法检测70例人甲状腺乳头状癌组织和40例正常甲状腺组织中HIF-1α、HIF-2α和MT的表达水平,并分析这三种蛋白表达与临床病理指标的相关性及三者间的表达相关性。结果:在70例人甲状腺乳头状癌组织中,HIF-1α、HIF-2α和MT的阳性表达率分别为52.86%(37/70)、50.00%(35/70)和44.29%(31/70)。HIF-1α、HIF-2α和MT的表达与颈部淋巴结转移有显著相关性(P=0.034,P=0.022,P=0.032)。此外,HIF-1α与HIF-2α的表达呈显著正相关(rs=0.258,P=0.031),HIF-1α与MT的表达呈显著正相关(rs=0.266,P=0.026),HIF-2α与MT的表达呈显著正相关(rs=0.259,P=0.030)。两种蛋白(HIF-1α/HIF-2α,HIF-1α/MT,HIF-2α/MT)联合表达较一种蛋白表达与颈部淋巴结转移更具相关性(HIF-1α/HIF-2α:P=0.004,HIF-1α/MT:P=0.024,HIF-2α/MT:P=0.029)。HIF-1α、HIF-2α和MT三种蛋白联合表达较两种或一种蛋白表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P=0.017)。结论:HIF-1α、HIF-2α和MT在人甲状腺乳头状癌组织中的表达与颈部淋巴结转移密切相关,且三者的表达密切相关,HIF-1α、HIF-2α和MT在人甲状腺乳头状癌中的表达情况可作为监测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的指标。

HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达及其与肾细胞癌血管生成的关系分析

目的探讨HIF-2α(缺氧诱导因子-2α)、VEGF(血管内皮生长因子)、COX-2(环氧化酶-2)、MMP-9(金属基质酶-9)表达及其与肾细胞癌血管生成的关系。方法应用免疫组化方法,检测79例肾细胞癌手术切除标本的HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达情况,并与MVD(微血管密度)表达进行关联性分析。结果肾癌组织MMP-9、VEGF的表达均显著高于正常肾组织(P<0.05);不同临床分期肾癌组织中的MMP-9、VEGF表达有明显差异(P<0.05)。MVD与VEGF、MMP-9蛋白表达呈显著正相关(r=0.381、0.375,P<0.05);MVD与COX-2表达有关,COX-Z表达0级和4级MVD值最低,与1、2、3级之间比较差异有统计学意义(P<0.05),0级与4级之间比较差异无统计学意义(P>0.05),1、2、3级之间差别无统计学意义(P>0.05)。肾细胞癌中HIF-2α阳性组的MVD值高于HIF-2α阴性组中MVD值,差异有统计学意义(t=4.374,P<0.05);Spearman等级相关分析发现,HIF-2α的表达与MVD间存在正相关关系(r=0.545,P<0.01)。结论 HIF-2α、VEGF、COX-2、MMP-9表达及其与肾细胞癌血管生成之间有明显相关性,在临床上可以根据相关基因表达情况而采取相应的干预措施。

长期慢性低氧对牦牛和黄牛血液中HIF-2α、EPO水平及红细胞相关指标的影响

为探讨牦牛和迁饲黄牛血液中红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、低氧诱导因子-2α(HIF-2α)、促红细胞生成素(EPO)等因子对高原适应和习服的不同特征及调控机理,按照海拔低于3 500m和高于3 500m两组采集青海地区的牦牛血样,同时采集高山迁饲黄牛(海拔2 500m)及低海拔黄牛(海拔1 300m)血液,采用全自动血液分析仪测定血液中红细胞、血红蛋白、红细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等;采用双抗夹心酶标法测血液中EPO、HIF-2α含量。通过t检验及单因素方差分析法分析指标间的差异性,并分析各指标与HIF-2α、EPO的相关性。结果表明,海拔高于3 500m牦牛组的RBC、HB、HCT显著升高,而HIF-2α和EPO水平却未发生显著变化。与迁饲黄牛和低海拔黄牛相比,牦牛血液中的RBC明显降低,而MCH、HIF-2α和EPO显著升高。牦牛血液中EPO、RBC、HB、HCT、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关;迁饲黄牛血液中红细胞分布宽度(RDW-SD)与EPO水平呈显著相关;低海拔黄牛血液EPO、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关。推测:海拔升高引起的低氧是影响牦牛血液RBC、HB、HCT改变的主要因素;与黄牛相比,低RBC、低MCH、高HIF-2α、高EPO水平是牦牛适应低氧的主要特征,且牦牛血细胞各指标对血液中HIF-2α水平的改变更敏感。提示牦牛通过遗传进化成功适应高原环境。

HIF-1α和HIF-2α上调非小细胞肺癌中CCR7的表达

背景与目的CCR7与非小细胞肺癌的淋巴结转移密切相关,但CCR7的上调机制却不是很清楚。本研究通过观察趋化因子受体CCR7和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子2α(HIF-2α)在非小细胞肺癌组织中的表达及相互关系,探讨非小细胞肺癌CCR7上调机制。方法应用免疫组织化学染色(SP法)检测94例非小细胞肺癌组织中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达,并联合运用RNAi技术沉默人肺腺癌A549细胞中HIF-1α、HIF-2α表达,采用RT-PCR和免疫荧光方法观察CCR7的变化情况,分析CCR7表达与HIF-1α、HIF-2α之间的关系。结果免疫组织化学结果显示:CCR7主要表达于癌细胞质和(或)胞膜,HIF-1α、HIF-2α主要表达于癌细胞核和(或)细胞质,非小细胞肺癌中CCR7、HIF-1α和HIF-2α的表达率分别为75.53%(71/94)、54.25%(51/94)和70.21%(66/94),χ2检验显示CCR7表达与非小细胞肺癌的临床病理分期(P<0.001)和淋巴结转移(P=0.001)有密切关系,而与年龄、性别、组织学类型无关(P>0.05)。此外,CCR7和HIF-1α、HIF-2α表达正相关(r=0.272,P<0.01)(r=0.225,P<0.05)。向A549细胞中转染HIF-1α、HIF-2α特异性siRNA,分别抑制HIF-1α、HIF-2α表达后发现CCR7的mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05)。结论CCR7表达与非小细胞肺癌侵袭转移密切相关,CCR7在NSCLC中过表达受HIF-1α和HIF-2α调控。

沉默HIF-2α表达对低氧下乳腺癌干细胞微球体富集的影响

目的:探讨沉默低氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)表达对低氧下乳腺癌干细胞(breast cancerstem cells,BCSCs)微球体富集的影响。方法:构建HIF-2αRNA干扰慢病毒载体,并转染至MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot检测HIF-2αmRNA及蛋白表达;MTT检测MCF-7细胞在不同氧浓度下增殖活性;显微镜下观察低氧下BCSCs微球体形成情况;有限稀释法检测微球体细胞单克隆形成能力;RT-PCR检测微球体细胞干细胞相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达。结果:成功构建了HIF-2α基因siRNA慢病毒表达载体,RT-PCR和Western blot结果显示干扰组细胞HIF-2αmRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。与未转染组及空载体组比较,低氧下RNA干扰组细胞增殖活性及BCSCs单克隆形成能力明显降低(P<0.05);RT-PCR结果亦显示RNA干扰组BCSCs相关标志物ABCG2、CD44及OCT-4 mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧能够诱导和强化MCF-7细胞乳腺癌癌干细胞样特性,而沉默HIF-2α表达可抑制低氧下BCSCs富集,提示HIF-2α有望成为乳腺癌治疗新的靶点。

HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊不同组织中的表达及其意义

高原低氧适应性研究对于了解高原土著动物的遗传进化和高原疾病的治疗有着重要意义。HIF(hypoxia inducible factor)是氧信号转导系统的重要转录因子,在细胞的低氧应答中起着关键作用。实验旨在研究HIF-1α和HIF-2α基因表达特征在藏绵羊低氧适应中的意义。采用RT-q PCR技术对藏绵羊HIF-1a和HIF-2a基因进行了组织表达分析。结果表明:HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊的8种组织(心、肝、脾、肺、肾、大脑、小脑和脑干)中均有表达。HIF-1α基因在肺和小脑中有高水平表达,其他依次是肾、脑干、大脑、心、脾和肝。HIF-2α基因在肺中表达水平最高,其他依次是脑干、心、肾、小脑、大脑和肝。结论:该研究首次证实,HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊脾、大脑、小脑和脑干中均有表达,且HIF-1α在小脑中的表达水平较高。HIF-1α和HIF-2α基因在藏绵羊上呈表达广泛性和组织差异性,与其他高原土著动物有着类似的表达特征。这种个别组织HIF-1α和HIF-2α表达水平的提高提示,其正是维持低氧环境下生物体功能活动正常运转的分子基础。

小细胞肺癌干细胞和肿瘤组织中HIF-1α和HIF-2α的表达及意义

目的观察小细胞肺癌干细胞和肿瘤组织中HIF-1α和HIF-2α的表达,并探讨其临床意义。方法采用干细胞无血清培养技术富集小细胞肺癌细胞系H446第3代肿瘤球细胞作为肿瘤干细胞;实时荧光定量PCR法检测H446干细胞中HIF-1α和HIF-2αmRNA的表达;免疫荧光法检测H446干细胞中HIF-1α和HIF-2α蛋白表达;免疫组化SP法检测小细胞肺癌组织中HIF-1α和HIF-2α蛋白表达。结果小细胞肺癌干细胞HIF-2αmRNA表达上调(P<0.05),而HIF-1αmRNA表达下调(P<0.05);小细胞肺癌干细胞中HIF-2α蛋白呈阳性,而HIF-1α蛋白呈阴性;小细胞肺癌组织中HIF-1α的阳性率为46.7%(28/60),HIF-2α阳性率为25%(15/60)。相关分析结果显示HIF-2α与小细胞肺癌干细胞标志物u PAR呈正相关且两者共同表达于小细胞肺癌坏死组织周围区域;HIF-2α与小细胞肺癌肿瘤直径和远处转移有关(P<0.05),而HIF-1α与患者年龄、性别、肿瘤直径、淋巴结转移、胸膜侵袭和远处转移无关(P>0.05)。结论 HIF-2α在小细胞肺癌干细胞中表达上调且与小细胞肺癌干细胞标志物u PAR呈正相关,与小细胞肺癌肿瘤直径和远处转移相关,提示HIF-2α表达可能与小细胞肺癌干细胞样特征有关。

胃癌组织中幽门螺杆菌感染与HIF-2α、ABCG-2表达的相关性

目的检测幽门螺杆菌感染(Hp)与HIF-2α、ABCG-2蛋白在胃癌组织中的表达,探讨Hp感染在胃癌发生、发展中的干细胞机制及对化疗抵抗的分子机制。方法采用快速尿素酶试验和免疫组化SP法联合检测60例胃癌组织和45例慢性胃炎组织的Hp感染情况,免疫组化SP法检测胃癌组织中HIF-2α、ABCG-2蛋白的表达情况。结果胃癌组织中Hp的阳性表达率为67.3%(37/55),明显高于慢性胃炎组织的45.2%(19/42),差异有统计学意义(P=0.029)。Hp感染与胃癌的浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05),而与性别、年龄、组织分化程度及远处转移无关(P>0.05)。HIF-2α蛋白在Hp阳性胃癌组织与Hp阴性胃癌组织中的阳性表达率分别为81.1%和50.0%,且HIF-2α蛋白表达与Hp感染之间呈正相关(r=0.321,P=0.017)。ABCG-2蛋白在Hp阳性胃癌组织与Hp阴性胃癌组织中的阳性表达率分别为86.5%和55.6%,且ABCG-2蛋白表达与Hp感染之间呈正相关(r=0.342,P=0.011)。在37例Hp阳性胃癌组织中,HIF-2α与ABCG-2表达呈正相关(r=0.604,P<0.0001)。结论 Hp可能通过激活HIF-2α-ABCG-2通路来促进胃癌组织中HIF-2α和ABCG-2的表达,诱导胃癌细胞的干细胞化及化疗抵抗。

HIF-2α对乳腺癌细胞中CD44表达的影响

目的探讨乳腺癌细胞中HIF-2α和CD44的表达及其意义。方法采用免疫组化法检测基底型乳腺癌和管腔型乳腺癌组织中HIF-2α和CD44的表达;采用免疫荧光双标技术检测HIF-2α和CD44在MDA-MB-231细胞以及MCF-7细胞中的共表达情况;在乳腺癌细胞MDA-MB-231中调控HIF-2α基因,实时荧光定量PCR法检测CD44基因的表达变化。结果免疫组化结果表明,HIF-2α在基底型乳腺癌组织及管腔型乳腺癌组织中均高表达,CD44在基底型乳腺癌组织中高表达,在管腔型乳腺癌组织中低表达;免疫荧光双标结果显示HIF-2α与CD44在乳腺癌细胞中共表达,且在MDA-MB-231细胞中的表达水平明显高于在MCF-7细胞中的表达水平;调控乳腺癌细胞中HIF-2α基因,CD44 mRNA表达水平也随之发生变化,其变化趋势与HIF-2α基因的变化一致。结论在乳腺癌中,HIF-2α基因与CD44基因表达密切相关,HIF-2α可能通过调控CD44的表达来维持乳腺癌干细胞的"干性"。

鼻咽癌组织中HIF-2α和Caspase-3的表达及意义

目的探讨乏氧诱导因子-2α(HIF-2α)和半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法检测46例初诊鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎组织中HIF-2α和Caspase-3蛋白的表达。结果 HIF-2α蛋白在鼻咽癌组织中的表达高于鼻咽慢性炎性组织,而Caspase-3蛋白表达则相反(P<0.05);HIF-2α蛋白表达与患者性别、年龄、颈部淋巴结转移状态及临床分期无明显相关(P>0.05),与T分期的早晚相关(P<0.05)。Caspase-3蛋白的表达与患者的性别、年龄、T分期、颈部淋巴结转移状态及临床分期无明显相关(P>0.05)。鼻咽癌组织中HIF-2α和Caspase-3蛋白的阳性表达无相关性(r=-0.195,P>0.05)。结论 HIF-2α和Caspase-3蛋白的异常表达可能涉及鼻咽癌的发生和发展过程;HIF-2α蛋白的高表达可能与鼻咽癌恶性进展密切相关。

青海地区藏族、汉族HIF-2a基因单核苷酸多态性与胃癌易感性的相关性研究

目的探讨青海地区藏、汉族HIF-2α基因单核苷酸多态性与胃癌易感的相关性。方法收集青海省藏医院、青海大学附属肿瘤医院、青海省肿瘤医院就诊胃癌患者(长期居住于青海地区)藏族51例、汉族60例。使用外周血提取DNA。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增,并使用测序法检测HIF-2α基因的3个位点,分别为rs6715787、13419896、7598371,同时行相关性分析。结果rs6715787、rs7598371的单核苷酸多态性(SNP)基因型分别为C/G、C/C、G/G,rs13419896的SNP基因型为A/G、G/G、A/A。两组基因型分布检验后符合Hardy-Weinberg平衡规律(P <0.05)。藏、汉族胃癌组rs13419896的A/G、G/G、A/A基因型频率分别为27.45%、29.41%,43.13%、45.00%,43.33%、11.67%,基因型频率分布两组差异有高度统计学意义(χ2=14.195,P <0.01),其等位基因差异有高度统计学意义(χ2=11.495,P <0.01)。藏族胃癌组等位基因A频率分布高于汉族胃癌组。藏、汉族胃癌组rs7598371的C/G、C/C、G/G基因型频率分别为29.42%、37.25%、33.33%,41.67%、5.00%、53.33%,两组的基因型频率分布差异有统计学意义(χ2=18.118,P <0.01),其等位基因差异有高度统计学意义(χ2=16.002,P <0.01),藏族胃癌组等位基因C频率分布高于汉族胃癌组。藏、汉族胃癌组rs6715787的C/G、C/C、G/G基因型频率分别为35.29%、41.18%,23.52%、51.67%,8.33%、40.00%。两组基因型频率分布差异有高度统计学意义(χ2=16.675,P <0.01),其等位基因差异有高度统计学意义(χ2=13.518,P <0.01),藏族胃癌组等位基因C频率分布明显高于汉族胃癌组。基因位点藏汉族胃癌患者表达不同,其中青海地区藏族人群胃癌患者携带C/C型的HIF-2α基因的rs6715787高表达,藏族人群胃癌患者携带C/C型的HIF-2α基因rs7598371高表达,汉族人群胃癌患者携带C/G型的HIF-2α基因rs6715787高表达,汉族人群胃癌患者携带G/G型的HIF-2α基因rs7598371高表达。结论HIF-2α基因rs7598371、rs6715787、rs13419896与青海地区藏汉族胃癌可能无相关性,但青海地区藏族胃癌、汉族胃癌HIF-2α基因单核苷酸多态性存在差异,基因位点藏汉族对照组、藏汉族胃癌患者表达不同,提示青海地区藏族胃癌、汉族胃癌患者的基因型不同,遗传基础可能不同。

靶向递送携带HIF-2α siRNA的阳离子脂质体抑制肾透明细胞癌生长

目的:探索靶向缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)的阳离子脂质体-siRNA复合物(liposome-siRNA,Lipo-siRNA)是否可以有效干扰HIF-2α的表达并抑制肾透明细胞癌的生长。方法:使用ZetaSizer Nano及电镜鉴定Lipo-siRNA,荧光显微镜观察脂质体介导的siRNA转染786-O细胞的情况,CCK-8检测Lipo-siRNA对786-O细胞的抑制能力,Western blot检测Lipo-siRNA对HIF-2α表达的影响,活体成像检测Lipo-FAM-siRNA的体内转染情况,裸鼠皮下移植瘤模型检测Lipo-siRNA对肿瘤生长的抑制情况。结果:Zata电位、粒径大小及电镜观测结果均表明Lipo-siRNA构建成功;荧光显微镜观察表明脂质体可以有效介导FAM-siRNA对786-O细胞的转染(P<0.05);CCK-8实验表明Lipo-siRNA可以显著沉默HIF-2α表达(P<0.01)并抑制786-O细胞的增殖(P<0.05);活体成像结果显示Lipo-siRNA可以显著富集于肿瘤部位(P<0.001);裸鼠皮下移植瘤模型显示Lipo-siRNA可以有效降低肿瘤组织中HIF-2α的表达(P<0.05),并抑制肿瘤生长(P<0.05)。结论:携带靶向HIF-2αsiRNA的阳离子脂质体可以在裸鼠体内外水平显著干扰HIF-2α的表达,抑制肾透明细胞癌细胞的生长,具有治疗肾透明细胞癌的潜力。

HIF-1α和HIF-2α在高原藏族胃癌中的表达及其意义

目的探讨HIF-1α和HIF-2α在高原藏族胃癌中的表达及其意义。方法整群选取2013年4月—2014年4月该院收治的40例胃癌患者资料进行分析,将其设置为实验组,选择同期入院的40例非胃癌患者作为对照组,采用免疫组化SP法检测入选患者组织中的HIF-1α和HIF-2α以及VEGF表达,分析其在高原藏族胃癌中的表达及其意义。结果胃癌患者HIF-1α阳性表达率62.5%,显著高于对照组(P<0.05)。HIF-2α阳性表达率为37.5%,显著高于对照组(P<0.05);VEGF阳性率为65%,显著高于对照组(P<0.05)。HIF-1α和淋巴结转移和TNM临床分期关系密切(P<0.05);HIF-2α和年龄、分化程度以及淋巴结转移等无相关性(P>0.05);VEGF表达和淋巴结转移、浸润深度以及临床TNM分期关系密切(P<0.05);高原藏族胃癌患者中VEGF和HIF-1α表达为正相关(P<0.05);与HIF-2α无相关性(P>0.05)。结论 HIF-1α和HIF-2α因子的表达和高原藏族胃癌的发生和发展具有紧密的联系,治疗时加强低氧诱导因子监测,可能对临床治疗方案具有一定的指导意义。

HIF-1α、HIF-2α在高原根田鼠不同组织中的表达及意义

研究发现低氧诱导因子（hypoxia inducible factors）HIF-1α和HIF-2α在高原土著动物藏羚羊、高原鼠兔的多种组织中均表达增高,表现出一定的组织差异性[1]。高原根田鼠（plateau microtus oeconomus）也是一种栖居于青藏高原的土著小型哺乳动物,其不同组织HIF-lα及HIF-2α的表达情况如何,目前尚无研究。本研究通过检测高原根田鼠HIF-lα及HIF-2α mRNA的组织表达情况，揭示高原根田鼠在低氧环境下HIF-1α及HIF-2α基因的表达特征及其对该物种生存适应的生理意义。

青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与胃癌易感性

目的探讨青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与藏族胃癌易感的相关性。方法收集世居青海的健康藏族62例作对照组、胃癌患者45例作胃癌组。利用血液基因组DNA提取试剂盒提取并纯化被研究者外周血。采用PCR及测序法检测HIF-2α基因的rs13419896、rs7598371、rs6715787位点,并行相关性分析。结果 rs13419896SNP基因型分别为A/G、G/G、A/A,rs7598371SNP基因型分别为C/G、C/C、G/G,rs6715787SNP基因型分别为C/G、C/C、G/G。对照组检验基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡规律(P>0.05)。其中rs13419896的A/G、G/G、A/A基因型频率在胃癌组中分别为28. 89%、28. 89%、42. 22%,在对照组中的频率为38. 71%、27.42%、33.87%。rs7598371的C/G、C/C、G/G基因型频率在胃癌组分别为26. 67%、35. 56%、37.78%,在对照组分别为41.94%、25.81%、32.26%。rs6715787的C/G、C/C、G/G基因型频率在胃癌组分别为35.56%、40.00%、24.44%,在对照组分别为40.32%,32.26%、27.42%。经χ~2检验示,胃癌组与对照组间无统计学差异(P>0.05)。结论青海地区藏族HIF-2α基因单核苷酸多态性与藏族胃癌易感性无关。

HIF-2α、CA9在肾透明细胞癌表达的临床意义

目的探讨乏氧诱导因子HIF-2α、CA9在肾细胞癌中的表达情况及临床意义。方法应用免疫组化染色,检测110例肾细胞癌组织中HIF-2α、CA9的表达情况。结果 HIF-2α在肾细胞癌中表达阳性率87.3%,CA9在肾细胞癌中表达阳性率为90%,与对照组织相比有显著差异(P<0.001);HIF-2α表达强度与临床分期及病理核分级呈正相关(P<0.05),CA9表达强度与肾细胞癌临床分期、病理核分级无明显关系(P>0.05);两个因子表达与患者年龄、性别,无明显相关(P>0.05)。结论 HIF-2α、CA9在肾细胞癌中表达阳性率高,其中HIF-2α与肾透明细胞癌临床分期、病理核分级明显相关,可以作为预测肾细胞癌患者预后的分子标记物,并可能成为非常有潜力的生物治疗靶点,CA9则可能作为预测患者预后及治疗疗效的标记物之一。

胃癌细胞系幽门螺杆菌感染对HIF-1α、HIF-2α及VEGF表达的影响

目的研究幽门螺杆菌对人胃癌细胞株BGC-823中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将不同浓度的H.pylori悬液与BGC-823细胞共培养24h后收集细胞,应用MTT法检测细胞存活率,RT-PCR和Western blotting技术检测HIF-1α、HIF-2α及VEGF的表达。对照组加稀释用培养液。结果与对照组比较,H.pylori可显著促进BGC-823细胞的增殖(P<0.05)并能显著提高细胞HIF-1α、HIF-2α及VEGF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),呈浓度依赖性。结论 H.pylori感染能够刺激BGC-823细胞VEGF的表达,其机制可能是通过HIF-1α、HIF-2α途径介导。这可能是其诱导胃癌血管生成和促进胃癌侵袭转移的机制之一。

ABCG2、Hif-2α在乳头状甲状腺癌患者外周血中表达与预后相关性研究

目的研究ABCG2与Hif-2α在乳头状甲状腺癌患者外周血中的表达与预后相关性。方法选取26例乳头状甲状腺癌患者作为观察组并给予手术治疗,同期健康志愿者26例作为对照组。比较观察组与对照组外周血中ABCG2与Hif-2α mRNA表达情况。结果观察组外周血中ABCG2与Hif-2α mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ期和Ⅳ期患者ABCG2与Hif-2α mRNA相对水平显著高于其他分期(P<0.05)。术后1~3年,死亡患者术前外周血中ABCG2 mRNA相对水平均显著高于生存患者(P<0.05);术后1~2年,死亡患者术前外周血中Hif-2α mRNA相对水平均显著高于生存患者(P<0.05)。结论 PTC患者外周血中ABCG2与Hif-2α mRNA表达水平与PTC分期存在相关性,并在预后中具有一定临床价值。