沉默HIG2促进NK细胞对喉癌细胞杀伤敏感性的机制探讨

目的:探讨缺氧诱导基因2(HIG2)在喉癌细胞逃逸NK细胞免疫杀伤中的作用机制。方法:免疫组织化学法检测喉癌组织和癌旁组织中HIG2的表达;Western blot检测HIG2、NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3)的蛋白表达;Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭;流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡、CD3^(-)CD56^(+)的NK细胞纯度、NKG2D受体表达及Hep-2细胞NKG2D配体的表达;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,NK细胞对Hep-2细胞的杀伤活性。结果:HIG2在喉癌组织中高表达。CD3^(-)CD56^(+)的NK细胞纯度大于90%。沉默HIG2抑制Hep-2细胞侵袭,促进细胞凋亡,提高NKG2D配体的表达,增强NK细胞对Hep-2细胞的杀伤敏感性。NKG2D抗体抑制NK细胞NKG2D受体表达,减弱NK细胞对沉默HIG2的Hep-2细胞的杀伤活性。结论:沉默HIG2可抑制喉癌细胞侵袭,促进细胞凋亡,上调NKG2D配体表达,增强NK细胞对喉癌细胞的杀伤敏感性。

HIG2基因的研究进展

低氧可诱导蛋白2(HIG2)基因作为一种新的脂滴蛋白和自分泌生长因子,在细胞生物学和人类疾病中,特别是癌症的研究中,具有重要的意义。随着分子生物学技术的发展,人们对HIG2基因的调控有很多新的认识。本研究对HIG2基因的结构和HIG2基因在肾细胞癌、细胞淋巴瘤、上皮卵巢癌、透明细胞腺癌及子宫癌的表达及调控进行了综述。

缺氧诱导基因2诱导甘油三酯堆积稳态失衡促进肝癌发生的研究

目的探讨缺氧诱导基因2(hypoxia-inducible gene 2,HIG2)在肝癌发生发展中的作用和意义。方法正常肝细胞(QZG)、肝癌细胞系(HepG2、SMMC7721)常规培养,采用Western Blot法检测HIG2蛋白的表达水平;通过甘油三酯检测试剂盒检测每6×106个正常肝细胞系(QZG)和肝癌细胞系(HepG2、SMMC7721)甘油三酯含量;使用涂有Matrigel的聚碳酸酯膜的Transwell小室测定细胞侵袭和迁移能力,划痕实验比较转染了对照质粒以及转染了HIG2过表达质粒的HepG2细胞的细胞迁移率;实时定量荧光PCR分析30例肝癌组织和对应肝癌癌旁组织中HIG2蛋白的表达;免疫组织化学方法检测肝癌癌旁组织和肝癌组织中HIG2蛋白的表达及部位。结果肝癌细胞系HepG2和SMMC7721比正常肝细胞系QZG中HIG2蛋白水平增加(P<0.05),同时肝癌细胞系HepG2和SMMC7721甘油三酯含量[(16.94±0.33)mg/dL,(16.04±1.02)mg/dL]均显著高于正常肝细胞系QZG[(4.90±0.39)mg/dL],差异比较具有统计学意义(P<0.05);与转染对照质粒组比较,HIG2的过表达质粒显著增加了HepG2细胞的迁移率和划痕愈合百分比(P<0.05);实时定量荧光PCR结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2的丰度增加(P<0.05);Western Blot结果显示与肝癌癌旁组织比较,肝癌组织中HIG2蛋白水平增加(P<0.05);免疫组化显示HIG2在肝癌组织中高表达且主要在胞浆中。结论HIG2蛋白可以显著诱导肝癌细胞的甘油三酯的堆积,同时促进了肝癌细胞的侵袭和转移潜力。