肺炎衣原体重组的RNase HIIa的克隆和性质鉴定

目的对肺炎衣原体AR39的RNase HIIa（CpRNase HIIa）进行克隆、表达和性质鉴定。方法按已知的CpRNase HIIa基因设计引物、扩增。用pET表达系统（表达载体、大肠杆菌BL21和Ni-NTA树脂）构建重组质粒，表达和纯化CpRNase HIIa。5’-^32P标记底物RNA／DNA，鉴定酶学性质。结摹CpRNase HIIa能切割RNA／DNA杂合体的寡聚核糖核苷酸链，产生3’羟基和5’磷酸基团的末端。CpRNase HIIa对Mg^2＋和Mn^2＋表现出明显的离子偏好性，且反应最适pH值为9～10。CpRNase HIIa切割12个碱基对的RNA／DNA杂合体底物的多个位点，但主要切割位点位于c10-g11之间与u7-g8之间。结论CpRNase HIIa可以有效的降解RNA／DNA杂合体的RNA链，于肺炎衣原体内担负着一定的生物学功能。

肺炎衣原体重组的RNase HIIa和RNase HIIb的生化性质鉴定与比较

目的对肺炎衣原体AR39的RNase HIIa和RNase HIIb(CpRNase HIIa和CpRNase HIIb)进行克隆、表达及生化性质鉴定与比较。方法按已知的CpRNase HIIs基因设计引物、扩增。用pET表达系统构建重组质粒,表达和纯化CpRNase HIIs。5′-32P标记底物RNA/DNA及含有核糖核苷酸的DNA,鉴定酶学性质。结果CpRNase HIIa和CpRNase HIIb均能切割RNA/DNA杂合体的寡聚核糖核苷酸链,产生3′羟基和5′磷酸基团的末端。但两者确实存在着不同的酶活性质。结论CpRNase HIIa和CpRNase HIIb在细胞内担负着不同的功能。

肝门部胆管癌的外科治疗及随访

目的:探讨肝门部胆管癌的外科治疗并分析其随访结果。方法:75例肝门部胆管癌中,行根治性手术45例,姑息性手术23例,保守治疗7例。根治性切除的45例中,根据Bismuth-Corlette分型法分为Ⅰ型5例(11%),Ⅱ型25例(55%),Ⅲa型3例(7%),Ⅲb型9例(20%),Ⅳ型3例(7%)。结果:根治性手术组中位生存时间1 4个月,姑息性手术组中位生存时间7个月,保守治疗组中位生存时间3月,三者差异有统计学意义(P<0.05)。根治性手术组术后1年存活率达68.7%,3年存活率21.8%;姑息性手术组1年存活率为56.5%,3年存活率为0;保守治疗组1年存活率为15.0%,3年存活率为0,根治性手术组明显优于姑息性切除组,姑息性切除组优于保守治疗组(P<0.05)。结论:肝门部胆管癌应积极争取根治性切除,对于不能切除的病例应给予姑息性切除,可以显著延长患者生存期。