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车载摄像头在ADAS HiL中的仿真方法 被引量:1
1
作者 贺岩 《汽车电器》 2024年第3期73-74,共2页
随着自动驾驶技术的发展,车载摄像头在自动驾驶系统环境感知中的作用越来越重要,为行车安全提供强大支持。对于自动驾驶控制器测试,摄像头仿真的准确度直接影响测试结果。文章将从ADAS HIL仿真开发角度出发,探讨视频暗箱和视频注入两种... 随着自动驾驶技术的发展,车载摄像头在自动驾驶系统环境感知中的作用越来越重要,为行车安全提供强大支持。对于自动驾驶控制器测试,摄像头仿真的准确度直接影响测试结果。文章将从ADAS HIL仿真开发角度出发,探讨视频暗箱和视频注入两种车载摄像头仿真方法。 展开更多
关键词 车载摄像头 ADAS hil 视频暗箱 视频注入
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基于车载以太网的HIL实时仿真测试平台的研究及应用
2
作者 任勇 张文平 +1 位作者 王涛 李小燕 《汽车电器》 2024年第1期73-77,80,共6页
利用以太网配置工具生成同时支持CAN/CANFD通信和SOME/IP通信的Simulink模型服务接口,采用MATLAB软件创建HIL仿真模型,应用Python语言开发支持车载以太网DoIP诊断的上位机,并基于Dspace实时仿真平台搭建HIL实时仿真测试平台。结果表明:... 利用以太网配置工具生成同时支持CAN/CANFD通信和SOME/IP通信的Simulink模型服务接口,采用MATLAB软件创建HIL仿真模型,应用Python语言开发支持车载以太网DoIP诊断的上位机,并基于Dspace实时仿真平台搭建HIL实时仿真测试平台。结果表明:该平台可以模拟基本驾驶操作测试,同时支持CAN/CANFD通信和SOME/IP通信测试,并可以对车载以太网报文进行E2E校验;利用诊断上位机可以进行CAN/CANFD通信和DoIP通信的UDS诊断操作。 展开更多
关键词 hil仿真测试 车载以太网 SOME/IP DoIP 车载以太网E2E校验
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重卡AMT控制系统HIL仿真设计与应用研究
3
作者 何琪 夏佳磊 刘俊明 《汽车电器》 2024年第7期81-83,共3页
文章首先介绍AMT控制系统的基本原理,然后基于dSPACE实时仿真系统搭建AMT控制系统输入输出对象模型以及整车动力学模型,应用仿真的环境模拟驾驶员的各种驾驶工况,对AMT控制软件进行全面的测试验证,有效地缩短开发周期,降低开发成本,提... 文章首先介绍AMT控制系统的基本原理,然后基于dSPACE实时仿真系统搭建AMT控制系统输入输出对象模型以及整车动力学模型,应用仿真的环境模拟驾驶员的各种驾驶工况,对AMT控制软件进行全面的测试验证,有效地缩短开发周期,降低开发成本,提高软件成熟度。 展开更多
关键词 AMT hil 仿真测试
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一种双维度驾驶风格在线识别算法及其HiL测试
4
作者 杨建伟 杨洪强 +2 位作者 潘瑞 郭春丽 杜鹏志 《重型汽车》 2024年第2期1-2,5,共3页
本文提出一种基于规则的双维度驾驶风格在线识别算法,从动态性和动力性两个方面来定义驾驶风格。通过对驾驶风格的在线识别,可以使重卡动力总成实现因人而异的智能化控制,从而提升驾乘体验并降低运营油耗。文中阐述了识别算法的具体逻辑... 本文提出一种基于规则的双维度驾驶风格在线识别算法,从动态性和动力性两个方面来定义驾驶风格。通过对驾驶风格的在线识别,可以使重卡动力总成实现因人而异的智能化控制,从而提升驾乘体验并降低运营油耗。文中阐述了识别算法的具体逻辑及Simulink建模实现,并对HiL系统驾驶仿真测试数据进行分析,结果表明该模型能够对双维度驾驶风格进行可靠的在线识别和计算。 展开更多
关键词 双维度驾驶风格 在线识别 SIMULINK建模 hil测试
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基于V2X和自动驾驶HIL联调的仿真测试系统开发
5
作者 吕斌斌 王鹏 +2 位作者 张贤超 刘志鹏 郑永祥 《汽车与新动力》 2024年第2期69-74,共6页
随着智能网联汽车的快速发展,车用无线通信(V2X)技术在智能交通领域发挥着越来越重要的作用,因此行业内对V2X和自动驾驶相关的硬件在环(HIL)融合测试需求也越来越高。由于V2X HIL系统与自动驾驶HIL系统两者相互独立,在实际应用中尚缺少... 随着智能网联汽车的快速发展,车用无线通信(V2X)技术在智能交通领域发挥着越来越重要的作用,因此行业内对V2X和自动驾驶相关的硬件在环(HIL)融合测试需求也越来越高。由于V2X HIL系统与自动驾驶HIL系统两者相互独立,在实际应用中尚缺少对两者相关应用场景及功能进行全链路的闭环仿真测试系统。基于dSPACE平台HIL仿真系统及V2X HIL系统的联调过程,搭建了一套能够同时验证蜂窝车联网(C-V2X)通信功能和单车智能感知功能的HIL联调仿真测试系统。测试结果表明:通过对V2X应用场景的仿真,该系统能够正确实现对单车智能驾驶功能测试、V2X被测算法的验证及预警功能显示,由此验证了联合仿真平台的有效性。 展开更多
关键词 车用无线通信(V2X) 自动驾驶 联调仿真测试 硬件在环(hil) dSPACE平台
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全自动凝血分析流水线HIL指数报警阈值和体积探测允许范围的初步建立
6
作者 寿玮龄 陈倩 +2 位作者 向成 唐月明 吴卫 《临床检验杂志》 CAS 2023年第12期886-890,共5页
目的 初步建立CS5100和CN6000全自动凝血分析仪溶血、黄疸和乳糜(HIL)报警指数及标本体积探测允许范围。方法 干扰标本由干扰物试剂盒配制或人工溶血方式获得。21例不同浓度干扰标本用于仪器HIL指数重复性验证,206例不同浓度干扰标本用... 目的 初步建立CS5100和CN6000全自动凝血分析仪溶血、黄疸和乳糜(HIL)报警指数及标本体积探测允许范围。方法 干扰标本由干扰物试剂盒配制或人工溶血方式获得。21例不同浓度干扰标本用于仪器HIL指数重复性验证,206例不同浓度干扰标本用于系统间HIL指数一致性验证。收集425例标本评估不同HIL指数时干扰物浓度分布,378例标本评估人工判断与仪器HIL指数等级一致性。测定人工制备干扰前后标本凝血筛查6项及HIL指数,比较不同干扰物浓度区间检测结果间差异,确定每个项目不同检测区间的HIL指数报警阈值。制备标准体积±10%上下限标本各10管,建立每台仪器体积探测允许范围并使用2 933例标本进行验证。结果 2个检测系统HIL指数重复性良好,系统间一致性较好(Kappa值分别为0.969、0.978和0.991,P值均为0.000)。仪器和人工判断对溶血标本评价存在一致性,但一致性一般(Kappa值为0.421~0.702,P均<0.001);仪器和人工判断对黄疸标本判断一致性较差(Kappa值为0.023~0.267,人员1与仪器之间P=0.258,余P均<0.001);仪器和人工判断对乳糜标本判断一致性较好(Kappa值为0.559~0.838,P均<0.001)。每个项目不同检测区间HIL指数报警阈值不同,用于普通肝素抗凝监测时APTT H报警指数明显低于其他项目。5台凝血分析仪体积探测允许范围分别为41.0~55.5 mm、44.3~58.4 mm,41.3~56.2 mm,58.3~72.5 mm和59.2~73.3 mm。结论 初步确定了适用于本实验室两个检测系统出凝血筛查项目不同检测区间HIL指数阈值和体积探测允许范围,为实现全面的分析前质量控制智能化管理提供依据。 展开更多
关键词 出凝血筛查项 分析前质量控制 hil指数 体积探测
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基于FPGA的自动驾驶HIL视频注入系统设计 被引量:3
7
作者 丁晟 董天天 +1 位作者 郑雪芳 秦昌琪 《电子器件》 CAS 北大核心 2023年第4期1075-1082,共8页
针对在实验室内场条件下,对自动驾驶控制器(ADCU)进行视频场景构造的传统技术手段无法满足硬件在环(HIL)仿真要求的问题,设计了一套基于FPGA的自动驾驶HIL视频注入系统。该系统利用FPGA内丰富的可编程资源和外围高速接口,将计算机显卡... 针对在实验室内场条件下,对自动驾驶控制器(ADCU)进行视频场景构造的传统技术手段无法满足硬件在环(HIL)仿真要求的问题,设计了一套基于FPGA的自动驾驶HIL视频注入系统。该系统利用FPGA内丰富的可编程资源和外围高速接口,将计算机显卡输出的Displayport视频接口转换为车载摄像头低电压差分信号(LVDS)视频接口,从而实现了对ADCU控制器的原位视频注入,满足HIL仿真测试的要求。同时,为了增强视频注入的灵活性,在原始视频中叠加马赛克、泥点、水滴、噪点等特效。根据使用和实测结果,视频注入系统能够实现满足自动驾驶HIL仿真要求的视频注入功能,各类特效叠加效果满足用户要求,为实验室内场条件下的ADCU测试、调试及演示提供了重要的技术手段。 展开更多
关键词 视频注入 hil 自动驾驶 ADCU FPGA
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BMS HIL试验研究 被引量:1
8
作者 范学 邹圣星 +2 位作者 汤志鑫 李智君 梁鹏 《汽车电器》 2023年第5期69-75,81,共8页
本文围绕动力电池及其管理系统功能需求和HIL硬件在环试验进行分析,提出BMS HIL台架的功能和指标要求,介绍HIL测试中模型要求及模型参数获取方法、测试用例设计。通过本次研究,实现BMS功能和故障注入等HIL测试,为BMS功能开发提供快速、... 本文围绕动力电池及其管理系统功能需求和HIL硬件在环试验进行分析,提出BMS HIL台架的功能和指标要求,介绍HIL测试中模型要求及模型参数获取方法、测试用例设计。通过本次研究,实现BMS功能和故障注入等HIL测试,为BMS功能开发提供快速、全面的测试验证手段。 展开更多
关键词 动力电池及其管理系统 hil硬件在环测试 模型
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HIL testing of wheel slide protection systems:criteria for continuous updating and validation
9
作者 L.Pugi G.Paolieri +4 位作者 M.Giorgetti L.Berzi R.Viviani L.Cabrucci L.Bocciolini 《Railway Engineering Science》 2023年第2期108-121,共14页
Assessment of railway wheel slide protection(WSP) systems involves the execution of complex experimental activities that are quite expensive and time-consuming, since they involve the physical reproduction of degraded... Assessment of railway wheel slide protection(WSP) systems involves the execution of complex experimental activities that are quite expensive and time-consuming, since they involve the physical reproduction of degraded adhesion conditions on a real railway line. WSP is devoted to regulating applied braking forces to avoid excessive wheel sliding in case of degraded adhesion conditions between wheel and rail. WSP must be also compliant to safety specifications related to assured braking performances and consumed air. Hardware in the loop(HIL) testing offers an affordable and sustainable way to accelerate these activities optimizing cost, duration and safety of experimental activities performed online. HIL test rigs are subjected to continuous updates, customization and natural ageing of their components. This work investigates the criteria that can be adopted to assure a continuous monitoring and validation of a real WSP test rig, the Italian test rig of Firenze Osmannoro. 展开更多
关键词 Hardware in the loop(hil) Wheel slide protection(WSP) Degraded adhesion conditions Train brake
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车机与空调HIL交互测试研究
10
作者 梁玮 李星望 付吉 《汽车电器》 2023年第6期84-87,90,共5页
为保证汽车车机与空调交互功能的可靠性,分析车机与空调的交互控制策略,基于dSPACE实时系统设计车机与空调HIL交互测试方案,利用车机、空调的接口定义表进行I/O模型配置,并建立资源映射关系的信号列表,按照交互控制功能模块开发上位机... 为保证汽车车机与空调交互功能的可靠性,分析车机与空调的交互控制策略,基于dSPACE实时系统设计车机与空调HIL交互测试方案,利用车机、空调的接口定义表进行I/O模型配置,并建立资源映射关系的信号列表,按照交互控制功能模块开发上位机测试界面,根据功能设计规范开发测试用例,通过上位机模拟车机与空调交互的各种工况。经验证,车机与空调交互功能测试和故障诊断测试通过,确保了车机与空调的交互功能和故障诊断功能的可靠性。 展开更多
关键词 交互测试 hil 车机 空调
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基于Hilbert-Huang变换的海洋平台结构损伤识别研究 被引量:4
11
作者 王晗 王晓梅 +1 位作者 徐蒙 刘晓峰 《中国海洋平台》 2016年第3期34-41,共8页
海洋平台在服役期间,由于各种因素的影响会出现不同程度的损伤,这些损伤不断累积,对结构安全造成了极大威胁。利用通用有限元分析软件ANSYS对波流联合作用下的导管架平台模型进行瞬态动力学分析,通过MATLAB编程实现对动力响应信号的Hilb... 海洋平台在服役期间,由于各种因素的影响会出现不同程度的损伤,这些损伤不断累积,对结构安全造成了极大威胁。利用通用有限元分析软件ANSYS对波流联合作用下的导管架平台模型进行瞬态动力学分析,通过MATLAB编程实现对动力响应信号的Hilbert-Huang变换,得到信号的固有模态函数(IMF)、Hilbert谱和Hilbert边际谱。提出以损伤前后信号Hilbert边际谱置信度作为损伤指标,分析对比不同损伤程度下该损伤指标的有效性,并探讨了采样数据长度和波浪参数对该损伤指标的影响。研究结果可以为后续研究和工程应用提供参考。 展开更多
关键词 固定式海洋平台 损伤识别 hilBERT-HUANG变换 hilbert边际谱 ANSYS
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hil-1基因通过饮食限制通路调节秀丽隐杆线虫寿命
12
作者 成慧 方菲 +4 位作者 石嘉豪 杨桦 张梦杰 杨平 费俭 《实验动物与比较医学》 CAS 2023年第3期271-281,共11页
目的揭示H1连接子组蛋白基因(H1 linker histone gene,hil-1)的生理学功能,以及其调控线虫寿命的分子机制。方法以秀丽隐杆线虫为模式生物,采用RNA干扰菌喂食、hil-1(gk229)突变体回交纯化以及过表达质粒显微注射技术来敲降、敲除以及... 目的揭示H1连接子组蛋白基因(H1 linker histone gene,hil-1)的生理学功能,以及其调控线虫寿命的分子机制。方法以秀丽隐杆线虫为模式生物,采用RNA干扰菌喂食、hil-1(gk229)突变体回交纯化以及过表达质粒显微注射技术来敲降、敲除以及过表达hil-1基因,然后观察线虫存活寿命及产卵情况,通过热耐受实验、百草枯应激实验和重金属Cr6+应激实验评价hil-1(gk229)突变体的抗逆性,利用实时荧光定量PCR实验以及构建双突变体线虫进一步确定hil-1调控寿命所关联的信号通路和作用靶点。结果与野生型N2线虫相比,RNA干扰后的线虫寿命以及hil-1(gk229)突变体线虫寿命明显缩短(P<0.001),而hil-1全身性过表达后线虫寿命延长(P<0.05)。与野生型N2线虫相比,hil-1(gk229)突变体线虫对热压力和氧化压力的耐受性明显降低(P<0.001,P<0.05),而对重金属的耐受能力无差异(P>0.05)。并且,相比于野生型N2线虫,hil-1(gk229)突变体线虫的发育周期缩短(P<0.001),产卵提前(P<0.001),但产卵总量没有显著变化(P>0.05)。给eat-2(ad465)突变体线虫喂食hil-1 RNA干扰菌后,hil-1表达下调不影响eat-2(ad465)突变体线虫的寿命(P>0.05)。相较于野生型N2线虫,hil-1(gk229)突变体线虫中daf-16表达水平明显下调(P<0.001),其下游基因mtl-1和ctl-1表达也下调(P<0.05,P<0.001)。与daf-2(e1370)突变体相比,daf-2(e1370),hil-1(gk229)双突变体线虫的寿命无明显变化(P>0.05),而与daf-16(mu 86)突变体相比,daf-16(mu86),hil-1(gk229)双突变线虫的寿命明显缩短(P<0.001)。与对照组相比,在表皮和肠道中RNA干扰hil-1基因表达后线虫寿命明显缩短(P<0.001)。结论hil-1基因缺失明显缩短线虫寿命,同时使线虫对热压力和氧化压力的耐受性降低。hil-1基因可能通过饮食限制信号通路调控秀丽隐杆线虫的寿命,且该作用主要在表皮和肠道。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 H1连接子组蛋白基因 衰老 寿命 饮食限制通路
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锚定修饰磁珠的SA-hIL2/7/21体外扩增人外周血T细胞的实验研究
13
作者 左安欣 周世荣 高基民 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期997-1003,共7页
目的为探究一种新的T细胞体外扩增方式,探索并比较了SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21 3种细胞因子在游离与锚定修饰磁珠2种情况下,对T细胞的增殖以及表型特征的影响。方法利用本实验室大肠杆菌原核表达系统制备的SA-hIL2/7/21融合蛋白锚定... 目的为探究一种新的T细胞体外扩增方式,探索并比较了SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21 3种细胞因子在游离与锚定修饰磁珠2种情况下,对T细胞的增殖以及表型特征的影响。方法利用本实验室大肠杆菌原核表达系统制备的SA-hIL2/7/21融合蛋白锚定修饰磁珠后体外扩增T细胞,随后CFSE标记流式细胞术分别测定细胞的增殖程度以及初始记忆T细胞表面标志的表达。结果锚定修饰磁珠的SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21促增殖效果显著优于游离的SA-hIL2、SA-hIL7、SA-hIL21,并且前者可促进CD8^+CD45RO^+以及CD62L-CCR7-(TEM)表达,但降低CD8^+CD45RO-和CD62L^+CCR7^+(TCM)的表达。结论与游离组扩增T细胞相比,锚定修饰磁珠组一方面促进T细胞增殖的能力更强;另一方面可使T细胞表型由TCM向TEM转变。 展开更多
关键词 SA-hil-2 SA-hil-7 SA-hil-21 T细胞 体外扩增
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基于NI PXI平台的发动机ECU HIL系统上位机程序开发 被引量:9
14
作者 倪计民 李晓锦 石秀勇 《汽车技术》 北大核心 2014年第3期54-58,共5页
基于NI PXI实时硬件平台,利用实时配置软件Veristand搭建了发动机ECU HIL系统的上位机程序,实现了对ECU控制算法验证、参数标定和电气故障测试等功能。利用LabVIEW FPGA模块开发的自定义设备程序,既可实现上位机对测试数据的组织和管理... 基于NI PXI实时硬件平台,利用实时配置软件Veristand搭建了发动机ECU HIL系统的上位机程序,实现了对ECU控制算法验证、参数标定和电气故障测试等功能。利用LabVIEW FPGA模块开发的自定义设备程序,既可实现上位机对测试数据的组织和管理,又可模拟发动机时序信号、采集ECU的喷油点火PWM信号;利用ECU测量与标定工具包中的自定义设备XCP and CCP Master,实现了对ECU测量参数和标定参数的读写,进而进行初步标定;利用基于PXI 2510开关板卡的自定义设备,实现了ECU电气故障的测试。试验结果表明,该上位机程序能够满足硬件在环仿真测试的实时性要求。 展开更多
关键词 发动机 ECU hil系统 上位机 PXI平台 程序开发
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腺病毒介导hIL-24抑制裸鼠肝癌荷瘤生长及其机制研究 被引量:8
15
作者 汪小华 叶震敏 +3 位作者 盛伟华 谢宇锋 王金志 杨吉成 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期925-930,共6页
为了研究腺病毒hIL-24抑制SMMC-7721肝癌细胞裸鼠荷瘤的生长抑制及其作用机制,构建了重组腺病毒载体pAdeasy-1-pTrack-CMV-hIL-24(Ad-hIL-24),经PacI线性化后转染QBI-293A细胞,多轮感染后收获高效价腺病毒重组病毒子。用SMMC-7721肝癌... 为了研究腺病毒hIL-24抑制SMMC-7721肝癌细胞裸鼠荷瘤的生长抑制及其作用机制,构建了重组腺病毒载体pAdeasy-1-pTrack-CMV-hIL-24(Ad-hIL-24),经PacI线性化后转染QBI-293A细胞,多轮感染后收获高效价腺病毒重组病毒子。用SMMC-7721肝癌细胞使16只裸鼠致瘤,然后随机NS分成干预组、5-Fu组、Ad组和Ad-hIL-24组,进行抗肿瘤试验。四组均使用瘤体内注射干预用药,100μL/只NS组、Ad组(107pfu)和Ad-hIL-24组(107pfu)隔日一次,共注射5次;5-Fu组20μg/kg,连续注射5d。用药前、用药后1周和2周分别测皮下瘤体的长径(L)、短径(W),计算出瘤体体积,治疗开始后第15天,将裸鼠脱颈处死,摘取瘤体称重,计算出抑瘤率。显微镜观察细胞生长形态、免疫组化法测caspase3蛋白表达、P53及P27核内抑癌基因表达、CD34染色标记测定的MVD及VEGF蛋白表达。与NS组比较,Ad-hIL-24组与5-Fu组的抑瘤率分别为68.52%(P<0.01)和65.64%(P<0.01);镜下Ad-hIL-24组肿瘤组织的caspase3蛋白表达细胞数较其它3组呈显著性升高(P<0.01),P27核内抑癌基因表达细胞数也较NS组明显增高(P<0.01),CD34染色标记测定的CD34及VEGF较NS组和Ad组明显减少(P<0.001),P53未见明显变化。结论Ad-hIL-24可以显著抑制裸鼠SMMC-7721荷瘤的生长,其机制可能通过激活caspase途径、上调P27抑癌基因表达、抑制血管形成等多途径发挥抑瘤作用。 展开更多
关键词 构建 Ad—hil-24 SMMC 7721荷瘤 抑瘤 机制
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错配PCR技术提高抗hIL17A单链抗体亲和力的研究 被引量:5
16
作者 田辉 白福良 +4 位作者 徐黎明 王文飞 牛泽杉 任桂萍 李德山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期722-725,732,共5页
目的:通过错配PCR技术提高1株人源化抗hIL17A单链抗体(scFv)的亲和力,为进一步开发治疗类风湿性关节炎(RA)的人源化抗体药物奠定基础。方法:本研究采用错配PCR和重叠PCR的方法,对抗体的重链、轻链可变区分别随机引入突变,并将细菌内膜... 目的:通过错配PCR技术提高1株人源化抗hIL17A单链抗体(scFv)的亲和力,为进一步开发治疗类风湿性关节炎(RA)的人源化抗体药物奠定基础。方法:本研究采用错配PCR和重叠PCR的方法,对抗体的重链、轻链可变区分别随机引入突变,并将细菌内膜展示技术和流式细胞技术(FCM)相结合进行高通量筛选,获得高亲和力突变株。由于hIL17A能刺激HeLa细胞产生白细胞介素IL-6和IL-8,因此scFv突变株经表达纯化后,利用real-time PCR技术在mRNA转录水平上检测其阻断hIL17A刺激HeLa细胞产生IL-6和IL-8的能力。结果:筛选出5株突变株,经流式细胞仪检测其中有3株亲和力与亲本相比有很大程度的提高,2株与亲本相当,而且所有突变株均保留了亲本与hIL17A的结合能力,经real-time PCR检测证明这5株突变株均有阻断hIL17A刺激HeLa细胞产生IL-6和IL-8的能力,突变株的亲和力与中和效果成正比。结论:错配PCR技术是抗体体外亲和力提高的一种可行性方法,在保证与抗原结合能力的基础上提高了其亲和力和中和活性。该实验结果为RA的靶向治疗提供了候选药物,而且也为抗体的体外亲和力的提高提供了参考方法。 展开更多
关键词 hil17 亲和力成熟 细菌展示技术 FCM REAL-TIME PCR 单链抗体
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Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫原性 被引量:2
17
作者 李晖 李榕 +3 位作者 钟森 罗月贝 任红 邓存良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期597-600,共4页
目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列... 目的:构建克隆结核分枝杆菌Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗,并在COS7细胞中表达,研究该疫苗的免疫原性。方法:克隆Mtb8.4/hIL12嵌合基因,并导入真核表达载体pCIneo中,构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组真核质粒。用限制性内切酶消化、PCR及DNA序列测定等鉴定后,转染COS7细胞,用RTPCR和Westernblot鉴定Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平的表达。用Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗免疫C57BL/6N小鼠,收集脾细胞培养上清检测细胞因子的水平,并用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定细胞毒性T细胞(CTL)的杀伤作用。结果:pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒构建成功。以其转染COS7细胞后,Mtb8.4/hIL12嵌合基因在转录水平获得表达。Mtb8.4/hIL12嵌合基因疫苗能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,IFNγ和IL2的分泌增加,IL4的分泌减少,特异性CTL的杀伤活性增强。结论:成功地构建pCIneoMtb8.4/hIL12重组质粒,并在COS7细胞中表达。构建的Mtb8.4/hIL12基因疫苗具有较强的免疫原性,可明显诱导CTL的杀伤活性。 展开更多
关键词 结核病 MTB8.4 hil.12 嵌合基因 免疫原性
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结核病Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗免疫保护效果研究 被引量:6
18
作者 李晖 李榕 +5 位作者 钟森 李强 任红 黄永茂 陈宣世 龙汉安 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期139-143,共5页
目的研究Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗的免疫原性及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。方法将雌性C57BL/6N小鼠40只,随机分为5组,即Mtb8.4/hIL-12嵌合基因、Mtb8.4基因疫苗组、BCG组、空载体组和PBS组。小鼠脾细胞培养上清液检测细胞因... 目的研究Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗的免疫原性及对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。方法将雌性C57BL/6N小鼠40只,随机分为5组,即Mtb8.4/hIL-12嵌合基因、Mtb8.4基因疫苗组、BCG组、空载体组和PBS组。小鼠脾细胞培养上清液检测细胞因子水平;并按效靶比例分别为100∶1、50∶1、10∶1进行细胞毒性T细胞(CTL)杀伤检测。用结核杆菌H37Rv强毒株静脉攻击小鼠,计数肺和脾组织中的结核杆菌菌落数,对小鼠部分肺和脾组织作病理切片,HE染色观察组织病变程度,Z-N染色查抗酸杆菌,观察该疫苗对小鼠结核杆菌感染的免疫保护效果。结果Mtb8.4/hIL-12嵌合基因疫苗对小鼠结核杆菌感染有一定的免疫保护效果,能够诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,细胞因子IFN-γ和IL-2分泌增加,IL-4分泌减少,特异性CTL活性增加;使小鼠肺和脾组织中的结核杆菌菌落数较空载体组显著减少,组织病变明显减轻,其效果优于卡介苗(BCG)组和Mtb8.4基因疫苗组。结论hIL-12与Mtb8.4构建成嵌合基因疫苗后,使Mtb8.4基因疫苗的免疫效力得到很大提高。 展开更多
关键词 结核病 Mtb8.4/hil-12 嵌合基因 基因疫苗 免疫保护
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pcDNA3.1/hIL-18真核表达载体的构建及表达 被引量:2
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作者 孔令洪 李瑶琛 +4 位作者 王一理 尚宁宽 来宝长 耿宜平 司履生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期225-227,共3页
目的 :构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL 18,并在哺乳动物细胞COS 7和Rlc310中进行瞬时和稳定性表达。方法 :从含hIL 18基因的中介载体 pGEM TEasy( pGEM T/hIL 18)中 ,以限制性内切酶酶切方法获得目的片段 ,克隆入真核表达质粒 pcDNA3.... 目的 :构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL 18,并在哺乳动物细胞COS 7和Rlc310中进行瞬时和稳定性表达。方法 :从含hIL 18基因的中介载体 pGEM TEasy( pGEM T/hIL 18)中 ,以限制性内切酶酶切方法获得目的片段 ,克隆入真核表达质粒 pcDNA3.1( + )中。以脂质体法转染COS 7和Rlc310细胞 ,用RT PCR检测IL 18mRNA的水平 ,免疫组化染色法检测蛋白表达。结果 :构建了hIL 18基因的重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL 18,并可在哺乳动物细胞中瞬时、稳定表达 ,获得了可稳定表达hIL 18基因的Rlc310细胞株。结论 :pcDNA3.1/IL 18的构建及表达 ,为IL 展开更多
关键词 hil—18 RT—PCR 免疫组织化学 细胞培养
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含hIL-24重组腺病毒载体(Ad-mda-7/hIL-24)的构建及其对喉癌细胞Hep2增殖的影响 被引量:3
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作者 刘娣 许晓群 +4 位作者 张建华 陈雪梅 苏庆红 孟德萍 王郡甫 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期121-125,共5页
目的构建含有人白细胞介素24(hIL-24)的腺病毒表达载体(Ad-mda-7/hIL-24),观察其对喉癌细胞Hep2增殖的影响。方法提取IL-24cDNA克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,采用pAdEasy系统进行细菌内同源重组得到含目的基因的腺病毒载体,脂质体转染293... 目的构建含有人白细胞介素24(hIL-24)的腺病毒表达载体(Ad-mda-7/hIL-24),观察其对喉癌细胞Hep2增殖的影响。方法提取IL-24cDNA克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,采用pAdEasy系统进行细菌内同源重组得到含目的基因的腺病毒载体,脂质体转染293A细胞进行包装并扩增病毒。PCR和Western blot方法鉴定重组腺病毒,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察其对Hep2增殖的影响。结果成功构建Ad-mda-7/hIL-24,滴度达107pfu/mL,MTT检测表明Ad-mda-7/hIL-24可明显抑制Hep2细胞生长。结论构建有较强感染能力的Ad-mda-7/hIL-24,并能显著抑制Hep2细胞增殖,为研究其作用机制及将其用于喉癌的基因治疗提供了实验和理论依据。 展开更多
关键词 hil-24 腺病毒 细胞增殖
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