Analysis of Detecting HIV-1 Antibody in Paired Urine and Serum Specimens from Drug Users by ELISA

Objective- To compare the consistency of the results from detecting HIV-1 antibody in the paired urine and serum specimens from drug users by ELISA. Methods: The paired urine and serum specimens from 273 drug users detained at a detoxification unit were collected, and the HIV-1 antibodies in the specimens of them were screened by urine and serum ELISA kits, respectively. Results: Of 273 serum specimens, 94 ones showed positive reaction and among 94 counterpart urine specimens, 93 ones also appeared positive reaction. Taking the results together,the consistent rate of HIV-1 antibody screened by urine and serum ELISA kits was 99.6%. Conclusion: The urine ELISA kit, which screened HIV-1 antibody of urine showing almost the same results tested by serum ELISA kit, is reliable. It is proposed that urine ELISA be introduced in many fields.

2021—2023年贵港市HIV-1感染者的流行特征和检测结果分析

目的分析2021—2023年贵港市人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)抗体阳性者的免疫蛋白印迹试验(WB)带型特征,探讨免疫状况及相关指标在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)发展中的作用。方法对2021—2023年1719份经贵港市AIDS确证实验室确证为HIV-1抗体阳性且在治疗前开展了CD4^(+)T淋巴细胞检测的样本,用SPSS 25.0分析人口学特征和实验室相关检测结果。结果1719例HIV-1抗体阳性以男性、40岁以上、已婚、农民、文化程度较低、医疗机构临床筛查为主;CD4^(+)T淋巴细胞计数与年龄呈负相关,与WB条带数呈正相关(P<0.05)。带型p55、p39、p17检出阳性率在不同免疫程度和病程间差异有统计学意义(P<0.05)。结论农民仍然是贵港市AIDS宣教、检测工作的重点人群,p55、p39和p17可作为疾病发展和免疫情况的一个潜在判别依据。

石河子某高校大学生参与HIV检测的影响因素研究

目的:了解石河子某高校大学生参与HIV检测现状及其影响因素,为提高该人群HIV检测率提供依据。方法:于2020年11月分层整群抽取石河子某高校在校本科生,匿名调查其既往参与HIV检测情况,采用Logistic回归分析影响大学生参与HIV检测的相关因素。结果:共2810名大学生参与调研,HIV检测率为5.4%(153人);卡方检验结果显示不同性别、年龄、月均生活费、是否认识艾滋病患者、性取向、HIV相关知识是否知晓、是否发生过性行为和高危性行为的大学生HIV检测率差异均有统计学意义(P均<0.05);Logistic回归结果显示,男性、月均生活费>3000元、认识艾滋病患者、性取向不确定、发生过性行为与大学生既往HIV检测均呈正相关(P<0.05)。结论:大学生HIV检测率较低,相关部门应加大高校被动检测力度,根据高危因素开展针对性教育,提高学生风险意识,促进主动检测。

试剂加样间隔时间对HIV抗体ELISA结果的影响分析

目的研究不同试剂加样间隔时间对HIV抗体酶联免疫检测结果准确性的影响。方法以单因素试验分析不同试剂加样间隔时间对检测结果的影响,再根据单因素试验结果进行正交试验。结果加酶、显色剂间隔时间越长,PC和QC的检测结果越低。加酶间隔时间从45 min开始,PC出现失控的情况;加显色剂间隔时间从45 min开始,QC出现告警和失控的情况。正交试验结果显示加酶和显色剂的时间要控制在15 min以内。结论加酶、显色剂间隔时间过长对检测结果影响较大,加酶、显色剂的间隔时间要控制在15 min以内。

酶联免疫法和金标法对HIV抗体的检测结果比较

目的 探讨酶联免疫法和金标法对HIV抗体的检测结果,明确针对艾滋病更为有效的临床筛查手段。方法选取264例疑似艾滋病患者,采集入组患者静脉血并进行酶联免疫法与金标法检测HIV抗体。以临床诊断结果为准,比较酶联免疫法和金标法与临床检查结果的一致性;比较酶联免疫法和金标法对艾滋病的诊断效能。结果 264例疑似艾滋病患者中,经临床筛查试验和确证试验确诊225例。κ检验分析结果显示,酶联免疫法检查结果与临床诊断结果具有高度一致性(κ=0.897, P <0.05);金标法检查结果与临床诊断结果具有高度一致性(κ=0.902, P <0.05)。酶联免疫法与金标法诊断艾滋病的灵敏度、特异性与准确率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 酶联免疫法和金标法对HIV抗体均具有较好的检出效果,可为艾滋病临床诊断提供较为准确的数据参考,临床检测中可根据患者自身情况选择相应的检测方法,必要时还可进行联合检测。

HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法的建立及优化

目的:建立并优化HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法(CLIA)。方法:采用化学发光免疫的方法,通过对包被条件、HIV酶用量、反应加入量、反应时间和温度等反应参数进行优化,建立HIV抗原抗体联合检测方法,使用HIV国家参考品评价所建立方法的准确性。结果:包被比例取HIV-1抗原1∶5 000、HIV-2抗原1∶1 0000、HIV P24单抗1∶2 000;检测酶比例取Biotin-P24多抗1∶2 000;HRP-HIV-1抗原1∶5 000、HRP-HIV-2抗原1∶20 000、SA-HRP 1∶4 000;待测样本75μL/孔;第一步反应温度和时间分别为37℃和60 min,第二步反应温度和时间分别为37℃和30 min,为检测方法的较佳反应条件。检测国家参考品结果表明,阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、灵敏度和精密性均符合国家参考品标准要求。结论:成功建立了特异、灵敏的HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法,为在临床上推广应用提供了科学依据。

HIV区分抗原抗体检测试剂指导下的HIV确证流程优化

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)区分抗原抗体检测试剂对HIV确证流程的指导意义,并对现有的确证流程进行优化。方法回顾性分析2021年1至12月我院接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查患者数据,分析试剂的检测值和抗原抗体反应模式对HIV感染者和假阳性者的区分能力,探讨基于HIV抗原抗体反应模式优化HIV确证流程的可行性。结果2021年接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查的患者共225094例,其中676例筛查阳性,513例真阳,2例失访,总体阳性预测值达76.11%。区分抗原抗体检测试剂检测值可以区分真阳性者(即HIV感染者)和假阳性者,检测值越高,阳性预测值越高(Z=22.033,P<0.001),受试者工作特征曲线下面积达0.995,最佳阈值为24.90,此时方法灵敏度为96.70%,特异度为98.10%。区分抗原抗体检测试剂反应模式同样可以区分真阳性者和假阳性者,其三种反应模式中,“抗原抗体双阳性(Ag+Ab+)”阳性预测值最高(卡方检验及两两比较均P<0.05),在本研究中高达100%。此外,区分抗原抗体检测试剂反应模式对HIV确证流程具有指导意义,7例反应模式呈抗原单阳性(Ag+Ab-)患者,首次HIV-RNA定量均>5000拷贝/ml,但此时HIV抗体确证试验(免疫印迹试验,WB)均未达到阳性标准,因此这类患者应直接采用HIV-RNA定量进行确证,证实了《全国艾滋病检测技术规范》技术规范中确证流程的价值。在反应模式呈Ag+Ab+的患者中,尽管HIV-RNA定量相对于WB的诊断效能优势并不显著,但可以显著减少诊断时间(V=78,P<0.001),有助于加快患者(尤其是急性HIV感染者)启动治疗,因此我们对技术规范中的确证流程进行优化,推荐Ag+Ab+患者直接采用HIV-RNA定量进行确证。在实践中,对Ag+Ab-和Ag+Ab+患者直接进行HIV-RNA定量显著缩短了急性HIV感染者的确证耗时。结论对HIV区分抗原抗体检测试剂检测值高的患者和反应模式呈Ag+Ab-的患者,应当加强患者的管理和随访;对于反应模式呈Ag+Ab-或Ag+Ab+的患者,可以直接采用HIV-RNA定量进行确证。

不同判定标准对HIV感染诊断的影响

目的分析不同判定标准对HIV抗体确证结果所产生的影响,探讨目前的判定标准存在的问题,为标准的不断完善提供参考。方法分别用国家卫生行业标准以及试剂盒说明书的判定标准对2015年9月—2020年12月2202例HIV抗体确证结果进行判定,分析两种判定结果的一致性和Kappa值;分析不一致样本的抗体随访及核酸检测结果,探讨哪种判定标准更为合理。结果两种判定标准的一致率为97.87%,Kappa值为0.91。国家卫生行业标准判为阳性而试剂盒说明书判为不确定的样本共30例(1.36%),其中17例后续被确定为HIV感染阳性,另有1例随访后转阴,3例核酸阴性;国家卫生行业标准判为不确定而试剂盒说明书判为阴性的样本共17例(0.77%),其中12例进行了抗体随访或核酸检测,结果均不支持HIV感染诊断。结论为了避免错判或漏诊,建议国家卫生行业标准判为阳性而试剂盒说明书判为不确定的样本以及国家卫生行业标准判为不确定而试剂盒说明书判为阴性的样本均按照“HIV感染不确定”对象进行管理。尽快开展核酸检测及抗体随访,尽早明确诊断。

第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性原因分析

目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送至确认实验室回报结果 40例HIV抗体阳性,28例HIV抗体不确定,51例HIV抗体阴性。随着S/CO值的增高,初筛结果与确证结果阳性符合率也随之升高。结论 HIV四代检测试剂假阳性率较高,这与试剂同时检测HIV抗体和P24抗原有关。当1<S/CO≤10时,实验室检测人员应依据实验检测结果,结合受检者相应病史和个体状况进行综合分析。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

靶向EBV潜伏膜蛋白1的单克隆抗体促进HIV相关EBV阳性伯基特淋巴瘤细胞凋亡的分子机制

目的制备和筛选抑制伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma,BL)的抗EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein-1,LMP1)单克隆抗体。方法人工合成EBV潜伏膜蛋白1的跨膜结构域5(transmembrane domain 5,TMD5),并以此为抗原,采用杂交瘤法制备抗TMD5单抗。ELISA法测定小鼠腹水中的抗体效价。7-氨基放线菌素D(7-Aminoactinomycin D,7-AAD)/Annexin V-PE双标记流式细胞术和JC-1染色联合流式细胞术测定线粒体膜电势评估单抗对BL细胞系Daudi细胞的促凋亡活性。蛋白质印迹法测定Daudi细胞内促存活信号通路p38-MAPK/IKK/NF-κB相关蛋白的表达水平。结果经过2轮筛选,获得R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A两种单抗,这2种单抗均能与TMD5发生抗体-抗原特异性结合,而与GAPDH无免疫反应。与NC组相比,R2-2-5E-6C组和R2-2-8D-3A组处理后的Daudi细胞中Annexin V+7-AAD+细胞所占百分比增加;JC-1荧光强度<104的细胞所占百分比增加;胞内p38-MAPK、IKK和NF-κB的表达水平降低(P<0.05)。结论筛选获得的抗TMD5单抗R2-2-5E-6C和R2-2-8D-3A可通过抑制LMP1介导的p38-MAPK/IKK/NF-κB信号通路的活性促进BL凋亡。

1例出境人员HIV抗体WB不确定结果分析及口岸防控思考

目的分析1例出境人员HIV抗体蛋白印迹试验(WB)不确定结果,提出艾滋病相关口岸防控思考。方法按照《全国艾滋病检测技术规范》检测要求,回顾性分析1例HIV抗体WB不确定样本检测流程。结果筛查试验:第一次和第二次体检初筛结果均为有反应,第一次和第二次体检两种抗体试剂复检结果均为有反应,第一次体检随访筛查两种抗体试剂检测结果为一有一无反应;确证试验:第一次体检、第一次随访及第二次体检WB检测条带分别为p24和gp160、gp160、gp160,结果均为HIV-1不确定;核酸检测:第一次随访及第二次体检病毒核酸载量检测结果均为“未检出”。结论针对HIV抗体不确定现状,建议尽快将HIV抗体确证试验和核酸检测作为补充实验在实际工作中联合使用。就此提出口岸艾滋病防控的思考:织牢疫情监测预警网络;完善国际旅行健康服务体系;强化实验室建设;建立联防联控体系,统筹协调口岸新冠疫情与艾滋病防控,做好“多病共防”。

住院患者178773例HIV抗体筛查结果分析

目的了解需要输血或进行外科手术的住院患者中人类免疫缺陷病毒(HIV)感染情况。方法检测178773例住院患者中需要输血以及外科手术的患者进行HIV抗体的检测,HIV抗体初筛采用酶联免疫吸附试验(ELISA法),阳性者送省疾控中心艾滋病确证实验室做蛋白印迹试验(Western-Blot,WB)确诊。结果 178773例需要输血以及外科手术的住院患者中,HIV抗体阳性者238例,阳性检出率1.33‰,238例HIV/AIDS患者几乎涉及所有临床科室;年龄分布主要为20～40岁(77.31%),其职业虽涉及公务员、退休干部、教师、律师、汽车司机、大/中学生、美容美发师与娱乐场所人员等,而最多的还是无固定职业者(50.00%)。结论对需要输血以及外科手术的患者进行HIV抗体的检测是发现HIV/AIDS的一条重要途径,综合医院应加强对住院患者的HIV抗体检测,以便及早发现HIV/AIDS患者,避免AIDS的医源性传播。

HIV-1抗体不确定和阴性者WB条带及病毒载量分析

目的 目前针对病毒载量检测在I型艾滋病病毒(HIV-1)抗体不确定及阴性个体中诊断意义的报道较少。文中旨在通过分析HIV-1抗体不确定和HIV抗体阴性病例的蛋白印迹试验(WB)带型及随访情况,探索病毒载量检测在鉴别HIV-1抗体不确定不同带型和HIV抗体阴性个案中的作用,评价核酸检测对于WB中HIV-1抗体不确定或HIV抗体阴性个体早诊断的意义。方法 选取2015年至2020年江苏省艾滋病确证中心实验室WB判定为HIV-1抗体不确定和HIV-1抗体阴性的151份样品。分析HIV-1抗体不确定样本WB带型经随访后的阳转情况;分析不同WB带型病毒载量的检测水平;分析不同水平的病毒载量样本经随访后WB条带阳转的情况;分析失访样本中WB带型及检测出病毒载量的分布,评估失访样本的传播风险;探索WB条带为阴性的样本中病毒载量检测率及阳转率。结果 WB带型分析显示,共127份HIV-1抗体不确定和24份HIV抗体阴性,HIV-1抗体不确定共出现9种带型。84份(80.0%)阳转,16份(15.2%)仍为HIV-1抗体不确定,5份(4.8%)为阴性。其中,env+gag区同时出现条带的阳转率最高[71例(95.9%)],gp160+p24+p17带型的阳转率为100%。HIV-1抗体不确定带型与病毒载量的关系结果显示,env+gag区条带的病例病毒载量检出率最高[78例(95.1%)],其中>5000拷贝/mL73份(89.0%),>10 000拷贝/mL72份(87.8%)。不同病毒载量的HIV-1抗体不确定病例的转归情况显示,126份HIV-1抗体不确定样本中进行了核酸检测,94(74.6%)份样本检测出病毒载量,其中86(91.5%)份样本病毒载量>10 000拷贝/mL,32(25.4%)份样本未检出病毒载量。失访样本病毒载量结果分析显示,22份失访样本中,env区条带共17份(77.3%);env+gag区同时出现条带共9份,6(66.7%)例检出病毒载量。结论 核酸检测病毒载量水平作为补充试验能够有效鉴别WB方法判定的不确定结果及阴性结果个体的感染状况,缩短了HIV感染诊断时间,尤其对急性感染期和晚期的HIV感染者的早发现有重要作用,为早发现早治疗提供技术支撑。

2013—2015年石家庄市HIV确证结果分析

目的分析石家庄市艾滋病确证实验室HIV抗体初筛阳性样本复检和确证实验结果,提高实验室HIV抗体检测能力。方法对石家庄市2013—2015年HIV抗体初筛阳性的样品,采用ELISA试剂和快诊试剂进行复检,任一复检试验阳性的样本,再用免疫印迹法(WB)进行确证实验。结果共收集2 684份初筛阳性样本,复检阳性率为65.76%,WB确证阳性率为71.16%。确证HIV-1抗体阳性病例1 256例,以男性为主(占89.49%),主要集中在26~45岁(占50.08%),性传播是最主要的传播途径(占93.71%),以同性性接触为主(占67.71%)。WB带形图多为9条带(占55.33%),全带型和次全带型占96.02%。不确定样本中完成追踪检测51人,有28人转阳,占54.90%。49.97%的复检阳性样品来自医疗机构,35.58%来自疾控中心。送检机构的确证阳性率,由高到低分别为疾控中心(81.69%)、医疗机构(74.72%)、出入境检验机构(34.85%)、采供血机构(32.28%),差异有统计学意义(P<0.05);确证病例来源,主要为术前检测和自愿咨询检测者,分别占37.73%和29.91%。结论石家庄市HIV确证检阳性率相对稳定,医疗机构主动提供艾滋病检测咨询(PITC)和艾滋病自愿检测(VCT)已逐步成为发现HIV感染者的重要方式。

电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的评价

目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清样本。采用Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数进行测定。以Roche Elecsys HIV Combi试剂盒为评估试剂,以生物梅里埃Vironostika Uni-FormⅡplus O HIV抗体试剂盒为参比试剂。定性检测血清HIV p24抗原和HIV1/2抗体并评价检测方法分析性能、结果一致性和血清转化灵敏度。结果 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒批内和天间不精密度良好,符合临床使用要求。血清样本检测结果和参比试剂检测结果一致性完全符合。评估试剂的血清转化灵敏度比参比试剂平均提前了5.1 d。结论 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒具有良好的精密度和血清转换灵敏度,有利于筛查HIV早期感染,能为临床HIV早期诊断、随访监测提供有效的实验室诊断依据。

HIV(1+2)抗体/P24抗原联合法与胶体硒法在临床检测HIV中的应用研究

目的比较第4代酶联免疫吸附测定(ELISA)[HIV(1+2)抗体与P24抗原联合检测]和胶体硒法在临床检测HIV中的特点。方法分别用第4代ELISA检测试剂和胶体硒试剂检测HIV抗体,初筛阳性样本送重庆市疾病预防控制中心进行Western blot确证试验。结果第4代ELISA试剂检测、胶体硒检测及Western blot检测HIV的阳性率分别为0.34%、0.29%及0.27%。第4代ELISA的HIV漏检率(1.3%)低于胶体硒法(4.9%),而其检测HIV的假阳性率(0.03%)高于胶体硒试剂(0.01%)。结论第4代ELISA和胶体硒法联合应用可提高HIV检测的准确性。

福建发现首例HIV-2感染者

目的：我国目前尚未发现ＨＩＶ－２病毒感染者，首例ＨＩＶ－２病毒感染者的检出对于ＨＩＶ－２病原学的研究、血清学确认实践、及艾滋病的预防控制具有重要意义。方法：被检血清标本用ＦＡＧＴ（ＧＢＣ，ＨＩＶ－１＋２）、ＥＩＡ（Ｖｉｒｏｎｏｓｔｉｃａ，ＨＩＶ－１＋２）和ＰＡ（Ｓｅｒｏｄｉａ，ＨＩＶ－１）３种不同原理的检测方法进行ＨＩＶ抗体初筛检测，可疑阳性血清经免疫印迹试验（ＷＢ）确认，通过分析蛋白反应条带确定ＨＩＶ抗体的性质。进行艾滋病流行病学调查，分析被检人员感染ＨＩＶ的地点、途径及可能扩散传播的范围。结果：ＦＡＧＴ和ＥＬＩＳＡＨＩＶ抗体初筛检测试验发现１个回国人员ＨＩＶ抗体阳性，用ＨＩＶ－１＋２和ＨＩＶ－２特异性的抗体ＷＢ试验证实为ＨＩＶ－２病毒感染。这是福建也是我国首例确认报告的ＨＩＶ－２抗体阳性者。

2018-2021年渝东北地区HIV抗体确证试验结果分析

目的分析渝东北地区2018-2021年人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体确证阳性样本分布特征,为艾滋病精准防控提供参考依据。方法依据《全国艾滋病检测技术规范》,对渝东北各HIV初筛实验室送检的样本进复检和确证试验,比较不同送检机构、性别、年龄送检人群的差异。结果4517份初筛阳性样本中,HIV-1抗体确证阳性3186份,占70.53%,阴性966份,占21.39%,不确定365份,占8.08%。送检机构以疾病预防控制中心阳性率最高,为86.64%;男性阳性占比为72.6%,女性占27.4%,男女比例约为2.65∶1;年龄主要集中在>40~60岁,阳性占比为44.70%;送检人群主要以医疗就诊人群的阳性占比最高,为52.66%。结论需重点关注中老年人群艾滋病防控,提倡自愿咨询检测,同时加大HIV筛查范围,全面覆盖重点人群和一般人群,有效防止艾滋病广泛传播。

广州市发现首例HIV-1/HIV-2混合感染

目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验采用蛋白印迹法(WB)。结果患者为男性,非洲马里人,血清经初筛试验为HIV阳性。初筛阳性的血清,以HIV-1/HIV-2 HIVBLOT2.2试剂做蛋白印迹试验(WB),确认为HIV-1阳性,同时HIV-2的特异条带gp36阳性;样本再用HIV-2型的BLOT1.2膜条确认为HIV-2阳性。结论被检者为HIV-1/HIV-2混合感染,这是广州市、广东省首次发现HIV-1/HIV-2混合感染,提示HIV-2可能会以对外交流等方式传入广东。