HIV／AIDS泪液采集及泪液中病毒学和细胞因子的研究现状

在艾滋病眼病的研究中，泪液具有易采集、易分析等优势，且有重要研究价值。目前已成功用于HIV/AIDS研究的泪液采集方法有反射性泪液采集法、毛细玻璃管虹吸法、Schirmer试纸法,以及其他眼病研究中可借鉴的方法（如冲洗泪液法）。艾滋病患者泪液分析主要包括病毒学和细胞因子分析两个方面。对泪液中HIV病毒进行定性、定量研究，有助于明确泪液中HIV病毒的传染性，探索HIV病毒眼部储存库的特点；而对泪液中细胞因子水平进行分析，则有利于了解HIV病毒在眼部的致病机制及临床表现。HIV/AIDS泪液中只包含极少量的HIV病毒组织感染剂量，故通过泪液接触感染HIV的几率非常小。但泪腺及泪液相关组织可能是HIV病毒的另一储存库。

泪腺作为潜在人免疫缺陷病毒储存库的分子机制研究

背景获得性免疫缺陷综合征（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的以全身免疫系统严重损害为特征的感染性疾病，目前主要的治疗方法是高效抗逆转录病毒疗法（HAART），但不能彻底清除患者体内的免疫缺陷病毒（HIV），目前认为是病毒潜伏于HIV储存库所致。研究证实HAART治疗后患者血浆中HIV载量检测阴性的AIDS患者的泪液中发现了HIV，因此探索其眼部储存库是非常重要的。目的探讨泪腺组织是否具有HIV储存库的分子基础以及HIV感染泪腺组织的发生机制。方法收集2013年11月至2015年12月在北京协和医院因泪腺良性疾病行泪腺手术获得的泪腺组织标本14例，其中13例来自于HIV阴性患者，1例来自于HIV阳性患者。13例HIV阴性患者临床诊断为泪腺脱垂者9例和泪腺炎者4例，病理诊断为正常泪腺组织者12例和泪腺间质淋巴组织增生者1例。HIV阳性患者的临床诊断为泪腺炎，病理诊断为泪腺间质淋巴组织增生。将12例HIV阴性和1例HIV阳性患者的泪腺组织标本用石蜡固定切片，采用免疫组织化学法检测泪腺标本中HIV受体CD4及CXC趋化因子受体4（CXCR4）和CC趋化因子受体5（CCR5）分子的表达；1例HIV阴性患者的泪腺组织标本制备成新鲜冰冻切片，采用免疫荧光染色对泪腺标本中CD4及CXCR4和CCR5分子的表达进行验证。结果免疫组织化学染色显示，HIV阴性患者泪腺组织CD4分子染色背景强，为可疑阳性表达；各例标本中多数泪腺上皮细胞可见CXCR4表达，定位于细胞质和细胞核，少数泪腺上皮细胞不表达CXCR4；在各例标本中少数泪腺上皮细胞中CCR5呈局灶阳性表达，主要位于细胞质和细胞核，多数泪腺上皮细胞不表达CCR5。HIV阳性患者泪腺组织中CD4分子染色背景强，为可疑阳性表达；CXCR4及CCR5在泪腺上皮细胞中为阳性表达；间质组织中可见大量散在淋巴细胞，其CD4、CXCR4及CCR5均为阳性表达。免疫荧光染色显示，HIV阴性患者泪腺组织中CD4、CXCR4、CCR5均呈红色荧光，CD4呈线状及片状分布，主要定位于泪腺上皮细胞的细胞膜，而CXCR4和CCR5则呈现散在点状分布，定位于泪腺上皮细胞的细胞质。结论HIV相关分子受体CD4及其辅助受体CXCR4、CCR5在泪腺上皮细胞均呈阳性表达，泪腺上皮细胞具有受到HIV感染和成为HIV储存库的分子基础。