HIV区分抗原抗体检测试剂指导下的HIV确证流程优化

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)区分抗原抗体检测试剂对HIV确证流程的指导意义,并对现有的确证流程进行优化。方法回顾性分析2021年1至12月我院接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查患者数据,分析试剂的检测值和抗原抗体反应模式对HIV感染者和假阳性者的区分能力,探讨基于HIV抗原抗体反应模式优化HIV确证流程的可行性。结果2021年接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查的患者共225094例,其中676例筛查阳性,513例真阳,2例失访,总体阳性预测值达76.11%。区分抗原抗体检测试剂检测值可以区分真阳性者(即HIV感染者)和假阳性者,检测值越高,阳性预测值越高(Z=22.033,P<0.001),受试者工作特征曲线下面积达0.995,最佳阈值为24.90,此时方法灵敏度为96.70%,特异度为98.10%。区分抗原抗体检测试剂反应模式同样可以区分真阳性者和假阳性者,其三种反应模式中,“抗原抗体双阳性(Ag+Ab+)”阳性预测值最高(卡方检验及两两比较均P<0.05),在本研究中高达100%。此外,区分抗原抗体检测试剂反应模式对HIV确证流程具有指导意义,7例反应模式呈抗原单阳性(Ag+Ab-)患者,首次HIV-RNA定量均>5000拷贝/ml,但此时HIV抗体确证试验(免疫印迹试验,WB)均未达到阳性标准,因此这类患者应直接采用HIV-RNA定量进行确证,证实了《全国艾滋病检测技术规范》技术规范中确证流程的价值。在反应模式呈Ag+Ab+的患者中,尽管HIV-RNA定量相对于WB的诊断效能优势并不显著,但可以显著减少诊断时间(V=78,P<0.001),有助于加快患者(尤其是急性HIV感染者)启动治疗,因此我们对技术规范中的确证流程进行优化,推荐Ag+Ab+患者直接采用HIV-RNA定量进行确证。在实践中,对Ag+Ab-和Ag+Ab+患者直接进行HIV-RNA定量显著缩短了急性HIV感染者的确证耗时。结论对HIV区分抗原抗体检测试剂检测值高的患者和反应模式呈Ag+Ab-的患者,应当加强患者的管理和随访;对于反应模式呈Ag+Ab-或Ag+Ab+的患者,可以直接采用HIV-RNA定量进行确证。

电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的评价

目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清样本。采用Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数进行测定。以Roche Elecsys HIV Combi试剂盒为评估试剂,以生物梅里埃Vironostika Uni-FormⅡplus O HIV抗体试剂盒为参比试剂。定性检测血清HIV p24抗原和HIV1/2抗体并评价检测方法分析性能、结果一致性和血清转化灵敏度。结果 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒批内和天间不精密度良好,符合临床使用要求。血清样本检测结果和参比试剂检测结果一致性完全符合。评估试剂的血清转化灵敏度比参比试剂平均提前了5.1 d。结论 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒具有良好的精密度和血清转换灵敏度,有利于筛查HIV早期感染,能为临床HIV早期诊断、随访监测提供有效的实验室诊断依据。

甲肝IgM抗体诊断试剂盒在甲肝病毒抗原检测中的应用

将HAVIgM -Ab诊断试剂盒用HAV -Ag标准品调控灵敏度后 ,用于检测HAV -Ag ,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果 ,以选择在甲肝疫苗生产中 ,抗原检测的合适方法。经过调控灵敏度后 ,抗HAVIgM诊断试剂盒完全可以用来检测HAV -Ag。并可以正确评价HAV -Ag滴度 ,HAV感染性滴度。适用于甲肝疫苗的检定工作。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

鼠疫菌F1抗体/抗原酶联免疫诊断试剂盒的应用评价

目的对兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒进行临床应用评价。方法采用双抗原/抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接血球凝集试验(IHA)、胶体金免疫层析试验(GICA)3种方法的诊断试剂对比检测云南省地方病防治所中心实验室保藏的和现场采集的血清样品和脏器样品,对血清样品做鼠疫菌F1抗体检测,对脏器样品做鼠疫菌F1抗原检测。结果在358份血清样品中,ELISA试剂检出F1抗体阳性52份(14.52%),IHA试剂检出阳性37份(10.34%),GICA试剂检出阳性45份(12.57%)。ELISA与IHA试剂的符合率为95.23%,与GICA试剂的符合率为96.92%。经统计学χ2检验,ELISA试剂检出F1抗体阳性率高于IHA试剂(χ2=11.53,P=0.000 7),与GICA试剂检出的差异无统计学意义(χ2=3.27,P=0.070 4)。进一步分析滴度差值频数,ELISA试剂检测人血清的敏感性高于IHA试剂的样品占87.5%。在117份脏器样品中,3种试剂均检出F1抗原阳性15份(12.82%),符合率100%。滴度差值频数比较,ELISA试剂检测敏感性高于反向间接血球凝集试验(RIHA)试剂的样品为78.57%。结论兰州生物制品研究所有限责任公司研制的鼠疫菌F1抗体酶联免疫诊断试剂盒和鼠疫菌F1抗原酶联免疫诊断试剂盒性质特异,其敏感性优于IHA试剂盒和GICA试剂条,值得在鼠疫的监测和快速诊断中推广应用。

HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒研制重大进展

中科院武汉病毒研究所HIV分子流行病学和分子病毒学学科组与单抗实验室共同合作,经过三年的不断实验和反复研究,研制出了适于我国流行HIV毒株检测的第四代HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒。

盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制—Ⅰ克伦特罗人工抗原及抗体的制备

〔目的〕酶联免疫分析试剂盒中的关键试剂是制备CBL人工抗原和抗体。〔方法〕通过重氮偶联法制备克伦特罗人工抗原 ,不同摩尔比的克伦特罗 -牛血清白蛋白结合物免疫家兔。〔结果〕经SephadexG -75柱纯化 ,用薄层层析和紫外光谱确证 ,获克伦特罗 -牛血清白蛋白结合物 ,间接酶联免疫分析法测试其效价N P >1:40 960 0。〔结论〕重氮偶联法成功制备CBL -BSA ,并获得高效价的抗血清。

合成肽抗原抗精子抗体ELISA试剂盒的研究

目的 :建立合成多肽抗原检测抗精子抗体 (As Ab)的酶联免疫吸附测定法 (EL ISA )。方法 :固相法合成特异性精子肽 ,包板制备检测 As Ab的 EL ISA试剂盒 ,并对该试剂盒进行方法考核。结果 :抗原包被浓度选择 0 .5 mg/ L ;检测 4 39份血清标本的 As Ab表明 ,不明原因不育患者组阳性率达 2 1.5 % ,未婚男女对照组阳性率仅为 1% ,两组对比差异有统计学意义 (P <0 .0 0 5 )。与德国 Gesellschaft试剂盒比较检测 2 6份血清标本 ,显示极好的一致性 (Kappa值 0 .77>0 .75 )。重复性试验显示其精密度较好 (CV<10 % ) ;37℃放置 8d,结果不受影响。结论 :结果表明该合成肽抗原检测抗精子抗体 EL ISA试剂盒特异性强 ,重复性好、稳定性高 。

单克隆抗体Dot-ELISA检测血吸虫病循环抗原试剂盒应用初报

中国预防医学科学院寄生虫病研究所严自助等研制的单克隆抗体Dot—ELISA试剂盒用于诊断血吸虫病人具有很高价值。我们在德阳县寿丰乡作应用试验,初步获得满意结果。 1 试验对象 粪检阳性血吸虫病人;非流行区健康献血员;华枝睾吸虫病人;肺吸虫病人;一个血吸虫病流行区村民及中学几个班的学生。

HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒研制取得重要进展

中科院武汉病毒研究所HIV分子流行病学和分子病毒学学科组与单抗实验室共同合作，经过3年的不断实验和反复研究，研制出了适于我国流行HIV毒株检测的第四代HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒。

检测血吸虫循环抗原的多价单克隆抗体诊断试剂盒的研制和应用

用杂交瘤技术生产抗血吸虫肠相关循环阳极抗原（ＣＡＡ）单克隆抗体与血吸虫卵糖蛋白单克隆抗体经混合后标记辣根过氧化物酶（ＨＲＰ），制成Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，检测轻、中、重不同疫区粪检阳性的血吸虫病人血清中循环抗原，阳性率分别为８４．３％、８７．２％和９１．５％。累计阳性率为８９．２％（６１９／６９４）。对健康人、肝吸虫、肺吸虫病人血清均未出现阳性反应，显示有较高的敏感性和特异性。ＥＰＧ＞８０的病人循环抗原检出率高干ＥＰＧ／８０的病人。说明循环抗原检出率与感染度有关。血吸虫病人经吡喹酮治疗后半年和１年循环抗原转阴率分别为７１．４％和８８．６％。结果表明．该试剂盒可用于确诊病人和考核疗效。试剂盒质量稳定，操作简便快速，整个试验可在１小时内完成，且不需特殊仪器，适于现场大规模查病应用。

九种检测HIV抗体试剂盒结果初步比较

艾滋病(AIDS)是一种由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的性传播疾病.据最新资料统计,我国艾滋病流行呈直线上升趋势.

两种检测EB病毒衣壳抗原IgA抗体的酶联免疫吸附试验试剂盒性能比较

人体感染EB病毒（EBV）后会产生多种抗体,EBV衣壳抗原IgA抗体（VCA-IgA）是其中一种,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）法可以检测出其存在与否[1,2],但市场上检测VCA-IgA的ELISA试剂盒多种多样。临床实验室所选择的试剂盒由于供货、招标或其他因素等有时需要更换试剂盒,

艾滋病毒重组抗原及第三代艾滋病毒抗体EIA诊断试剂盒的研制

近年来中国的艾滋病毒(HIV)感染人数以每年30%的速度增长,HIV感染者总数已超过60万人,感染者已从吸毒人员、献血员等高危人群扩展到社会各个阶层,我国已处于艾滋病泛滥前的关键时期.HIV诊断试剂盒是HIV防制工作中最重要的技术工具.用于人群筛检的HIV诊断试剂盒已历经三代,第一代试剂盒主要使用来自细胞培养的HIV病毒的裂解产物作为抗原;第二代产品使用基因工程重组抗原和/或人工合成肽作为抗原,使包被抗原中免疫优势区的比例明显增强,从而提高了试剂的灵敏度,而且标准化生产的相对更纯的抗原的使用使试剂的特异性和重复性均大为提高.前两代试剂均采用间接法原理,即先以抗原包被聚丙乙烯板,再加入待检血清,最后加入酶标记的抗人IgG抗体,因此均只能检测IgG抗体.1992年问世于美国的第三代试剂则采用双抗原夹心法,即先以抗原包被,再加入待检血清、酶标记的抗原,从而可同时检测所有类型的抗体,明显提高了试剂的灵敏度,同时由于采取了双抗原识别机制,特异性也得到了明显提高,因此在国外已取代间接法而成为主流试剂.

HIV抗原抗体检测试剂在血液筛查中的应用研究

目的研究第四代HIV抗原检测试剂在血液筛查中的应用价值。方法对第四代HIV抗原抗体检测试剂进行灵敏度和重复性实验;分别采用第三代HIV抗体检测试剂和第四代HIV抗原抗体检测试剂对血液标本进行初复检,对第三代试剂检测阴性第四代试剂检测阳性的标本采用HIV核酸检测方法进行确认。结果第四代HIV抗原抗体检测试剂最低抗原检出浓度为1.25U/ml,孔间精密度为3.2%;2009年10月～2011年3月,共筛查标本23480例,其中13例第三代试剂结果阴性而第四代试剂结果阳性,经HIV核酸检测的方法进行确认,全部结果均为阴性。

小鼠肝炎病毒抗体ELISA试剂盒的研制——多价抗原检测抗体

自从1949年首次分离到MHV以来,在不同国家和地区已分离出许多MHV毒株,检测小鼠群MHV感染所用抗原也因实验室而异。我们用MHV-3抗体ELISA试剂盒进行检测。据Robert L.Peter报导,MHV多价抗原检测自然感染小鼠血清较单价抗原更敏感,但在国内尚未见报道。因此,本文用5株MHV研制了多价抗原检测抗体ELISA试剂盒,并与单价抗原进行了比较。实验结果报导如下。

ELISA试剂的性能：EIAgen乙型肝炎表面抗原酶免检测试剂盒（双抗体夹心法）

酶联免疫吸附试验（ELISA）测定的效果主要取决于试剂的质量。随着制备技术的不断发展，ELISA检测的效果日益改善。可检测的范围已从定性扩大为定量。试剂的性能如特异性、灵敏度和精密度等反映在试剂盒的说明书中。下面以亚特斯公司的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和铁蛋白试剂的说明书为例，介绍定性和定量的ELISA试剂的性能。说明书内容所列项目与化学发光免疫测定系统的试剂说明书相类似，读者也可参考比较，以了解两者的差别。