HIV早期感染检测诊断中不同HIV抗原/抗体检测方法的应用

目的分析不同HIV抗原/抗体检测方法在免疫缺陷病毒(HIV)早期感染检测诊断中的应用价值。方法以3791份性服务工作者及吸毒人员血液标本为研究对象,分离血液标本后应用不同HIV抗原/抗体检测方法进行检测。结果HIV感染阳性样本检出率1.40%,试剂盒A、B同步检测所有样本检测结果表明两种试剂盒均检测出54份HIV感染阳性样本,试剂A检测特异度99.63%、灵敏度100.00%、误诊率0.35%、漏诊率0,试剂B检测分别为99.38%、100.00%、0.62%、0,两种检测方式检测特异度、灵敏度、误诊率以及漏诊率差异均无统计学意义,P>0.05。对比试剂A及试剂B检测结果差异无统计学意义,P>0.05。试剂A、B较C试剂检测窗口期提前,但是试剂A、B较P24试剂滞后。结论第四代HIV抗体试剂盒在HIV感染检测中的灵敏度均为100.00%,检测能力较强,而且有助于提前HIV感染检出窗口期。

三种HIV抗原/抗体检测方法对HIV早期感染检测的诊断效果分析

目的探讨分析三种HIV抗原/抗体检测方法对HIV早期感染检测的诊断效果.方法2018年2月至2019年3月,选择3452份血液样本作为泊头市医院检验科研究对象,选用2种第4代HIV试剂盒与1种第3代HIV试剂盒进行检测,观察比较检测结果.结果(1)试剂盒A检测HIV感染,灵敏度为100%,特异度99.67%;试剂盒B检测HIV感染,灵敏度100%,特异度99.55%;(2)试剂盒A检测窗口期平均13.5d,试剂盒B平均15.25d,试剂盒C平均18.25d,核心抗原P24检测平均9.25d.结论这次研究的2种第4代HIV抗体试剂盒对HIV感染的检测能力较高,灵敏度高,且可提前HIV感染检出的窗口期,为用血的安全性提供保障.

HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测方法的建立及应用

目的建立HIV-1/2抗体和P24抗原联合检测的酶免疫检测方法,用于HIV感染的实验室诊断,缩短HIV感染的检测窗口期。方法制备抗HIVP24单克隆抗体和多克隆抗体,联合使用基因工程HIV1/2型抗原和抗HIVP24单克隆抗体包被酶联反应板,以辣根过氧化物酶标记的HIV1/2型抗原和生物素化的兔抗HIVP24抗体作为标记物,建立联合检测HIV1/2抗体和P24抗原的ELISA方法,并对其特异性、敏感性和稳定性进行鉴定。结果检测P24抗原质控品的灵敏度可达0.2ng/ml;检测187份HIV阳性血清、210份其他疾病患者血清和520份正常人血清,其敏感性和特异度分别为100%和99.62%。同时重复12次检测4份HIV阳性血清,变异系数均小于10%。结论本方法可以在1.5h内一步同时检出特异性HIV-1/2抗体和HIVP24抗原,缩短了HIV感染的检测窗口期,具备快速、简便、特异、敏感等优点,适用于HIV感染的实验室诊断和流行病学调查。

HIV区分抗原抗体检测试剂指导下的HIV确证流程优化

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)区分抗原抗体检测试剂对HIV确证流程的指导意义,并对现有的确证流程进行优化。方法回顾性分析2021年1至12月我院接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查患者数据,分析试剂的检测值和抗原抗体反应模式对HIV感染者和假阳性者的区分能力,探讨基于HIV抗原抗体反应模式优化HIV确证流程的可行性。结果2021年接受HIV区分抗原抗体检测试剂筛查的患者共225094例,其中676例筛查阳性,513例真阳,2例失访,总体阳性预测值达76.11%。区分抗原抗体检测试剂检测值可以区分真阳性者(即HIV感染者)和假阳性者,检测值越高,阳性预测值越高(Z=22.033,P<0.001),受试者工作特征曲线下面积达0.995,最佳阈值为24.90,此时方法灵敏度为96.70%,特异度为98.10%。区分抗原抗体检测试剂反应模式同样可以区分真阳性者和假阳性者,其三种反应模式中,“抗原抗体双阳性(Ag+Ab+)”阳性预测值最高(卡方检验及两两比较均P<0.05),在本研究中高达100%。此外,区分抗原抗体检测试剂反应模式对HIV确证流程具有指导意义,7例反应模式呈抗原单阳性(Ag+Ab-)患者,首次HIV-RNA定量均>5000拷贝/ml,但此时HIV抗体确证试验(免疫印迹试验,WB)均未达到阳性标准,因此这类患者应直接采用HIV-RNA定量进行确证,证实了《全国艾滋病检测技术规范》技术规范中确证流程的价值。在反应模式呈Ag+Ab+的患者中,尽管HIV-RNA定量相对于WB的诊断效能优势并不显著,但可以显著减少诊断时间(V=78,P<0.001),有助于加快患者(尤其是急性HIV感染者)启动治疗,因此我们对技术规范中的确证流程进行优化,推荐Ag+Ab+患者直接采用HIV-RNA定量进行确证。在实践中,对Ag+Ab-和Ag+Ab+患者直接进行HIV-RNA定量显著缩短了急性HIV感染者的确证耗时。结论对HIV区分抗原抗体检测试剂检测值高的患者和反应模式呈Ag+Ab-的患者,应当加强患者的管理和随访;对于反应模式呈Ag+Ab-或Ag+Ab+的患者,可以直接采用HIV-RNA定量进行确证。

第4代HIV抗原抗体联合检测试剂的评价

目的评价HIV（1＋2）抗原抗体联合检测试剂，了解其是否适合于血液筛查。方法用HIV抗原抗体联合检测试剂和第3代HIV抗体检测试剂平行检测HIV感染或疑似感染样本205份、吸毒人群样本1486份、有既往献血史人群样本427份、献血和献浆人群样本7237份和丙型肝炎患者样本176份，对两种试剂检测结果不一致样本进行HIV p24抗原或RNA的检测，并分析其特异性和灵敏度。结果联合检测试剂检测HIV p24抗原的分析灵敏度为（2．5～5．0）U／ml，检测HIV抗体的分析灵敏度与第3代HIV抗体检测试剂相当。共检测出8996份HIV抗体阴性样本和503份HIV抗体阳性样本，与第3代试剂相比其特异为99．67％，灵敏度为100％，而且2份HIV感染“窗口期”样本也能检出。结论该试剂在增加HIVp24抗原检测的情况下，对HIV抗体检测的特异性和敏感性没有降低，可用于血液筛查以减少“窗口期”样本传播HIV的风险。

快速检测、抗原-抗体联合酶联检测和集合核酸检测在MSM人群HIV-1检测中的应用研究

目的比较快速检测(胶体硒)和抗原-抗体联合酶联检测(4代酶联检测)以及集合核酸检测对男男同性恋人群(MSM)HIV急性感染的检验效能。方法结合该市2008年男男同性恋人群HIV感染专项调查工作,应用快速检测、4代酶联检测对接受调查的2 165例MSM进行HIV抗体初筛,对结果阴性者进行集合核酸检测,直至找到急性期感染者;对不同方法的检测成本进行估算,比较发现1例感染者的性价比。结果快速检测和4代酶联检测应用于MSM人群HIV筛查时,分别存在7.6%和2.9%的漏检率。本次调查使用集合核酸检测共发现10例急性期感染者。使用快速检测、4代酶联检测发现1例感染者的成本分别为48.8、50.5元,使用集合核酸检测发现1例急性期感染者的成本为7 380.2元。结论 4代酶联检测与快速检测成本接近,但前者功效更高,应该成为目前针对MSM人群HIV检测策略的组成部分,集合核酸检测应成为必要的补充,在该市MSM人群中使用上述方法的成本低于国外同类报道。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

平行试验与顺序试验替代HIV抗体检测方法

目的寻求应用不同初筛试验的组合替代传统酶联免疫吸附试验(ELISA)+免疫蛋白印迹试验(WB)的人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体检测方法。方法将1 004份血清样本用ELISA和快速试验按平行试验和顺序试验分别进行检测,以WB为金标准,对结果进行比较。结果1 004份受检血清中,平行试验的敏感度和阴性预测值均为100.0%,而顺序试验则为99.8%和99.7%,2种试验的特异度和阳性预测值相同,分别为98.8%和99.4%。结论结合流行率的影响,平行试验更适用于人群的个体诊断、自愿咨询检测(VCT)及要求漏诊率很低的血液筛查(如血站、医院的献血员筛查),但费用较高。而顺序试验的检测成本低,在流行率比较低或资源比较贫困的地区更为适用。

以CP23重组蛋白为抗原建立检测微小隐孢子虫抗体间接ELISA方法的研究

以在 E.coli高效表达的微小隐孢子虫子孢子表面抗原 CP2 3为抗原 ,以辣根过氧化物酶 (HRP)标记的山羊抗鼠Ig G为二抗 ,建立了检测微小隐孢子虫抗体的间接 EL ISA方法。经检测筛选出最佳反应条件为 1μg/孔纯化的 E.coli表达的CP2 3抗原包被酶标板 ,用 10 %兔血清进行封闭 ,以正常 E.coli裂解上清液稀释待检血清。实验表明应用 CP2 3重组蛋白作为诊断 C.parvum抗原具有特异性高。

四种初筛检测HIV抗体实验方法评价

目的比较金标法、硒标法、ELISA法和渗滤法四种艾滋病病毒（人类免疫缺陷病毒，HIV）抗体初筛检测方法在艾滋病临床诊断中的应用。方法对就诊的21290例门诊患者，用金标法、硒标法、ELISA法和渗滤法四种方法进行检测，结果进行统计学处理。结果检测21290例就诊患者血液标本，使用金标法、ELISA法、硒标法和渗滤法分别检出HIV抗体阳性91例、42例、36例和36例。经蛋白印迹法确认其特异度分别为38．4％，83．3％，97．1％，97．1％。应用统计学处理后发现，金标法比较敏感，而硒标法和渗滤法两种方法之间的检出率差异无统计学意义。结论金标法与ELISA法、硒标法和渗滤法比较，具有较高的灵敏度，但特异度较差；硒标法和渗滤法两种方法特异度较好，但试剂成本较贵不宜推广；ELISA法为目前HIV抗体血清学批量检测的首选方法。

检测禽副粘病毒2型抗原的双抗体夹心ELISA方法的研究

以禽副粘病毒 2型 (Yucaipa株 )群特异性单抗 7E5为基础建立了检测PMV_2抗原的双抗体夹心ELISA方法。该方法对Yucaipa病毒的最低检出量为 1.6 96 2 μg/ml,对PMV_2不同形式病毒及各分离株也都有很好的检出率。用Yucaipa病毒尿囊液人工感染 10日龄SPF鸡 ,于感染后不同时间采集心、肝、脾、肺、肾、法氏囊、气管等病科及泄殖腔拭子 ,经处理后用建立的方法进行检测 ,结果表明PMV_2病毒在感染鸡的法氏囊组织内大量存在 ,感染后 3天就可从法氏囊组织内检测到PMV_2病毒 ,粪便中仅个别有检出阳性者。

3种免疫学方法检测慢性血吸虫病患者循环抗原和抗体的比较

近来,我们采用RIHA、McAb-Dot-ELISA、IHA3种免疫学诊断方法,对82例慢性血吸虫病患者血清中循环抗原和抗体进行对比检测,现将实验结果报道如下: 材料和方法一、实验对象慢性血吸虫病患者82例,系铜陵董店血吸虫病流行区的粪检阳性者。其中大部分病人曾有血吸虫病治疗史。

艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原和抗体联合检测的临床价值分析

目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检测CD4+T淋巴细胞与RNA,对比分析检测结果。结果 1 000份检测样本中,HIV抗体检测阳性80例、(HIV)-1、p24抗原检测阳性11例,(HIV)-1、p24抗原与抗体联合检测阳性6例。11例(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本中,四代酶联试剂检测显示9例HIV抗原、抗体检测阳性,2例检测阴性,进行病毒载量检测均≥20 000拷贝/ml,检测CD4细胞显示<500个/μl样本4例。结论临床应用可区分(HIV)-1、p24抗原与抗体的四代试剂进行检测可提高对HIV感染患者的检出率并缩短检测窗口期,在检测过程中结合应用病毒载量与CD4细胞水平计数检测对于促进检验准确性的提高也具有积极意义。

大豆抗原蛋白血清抗体间接ELISA检测方法的建立

旨在建立检测血清大豆抗原蛋白抗体的间接ELISA方法。经琼脂糖凝胶层析纯化大豆抗原蛋白，以不同剂量皮下注射免疫小鼠，采用方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度，并对其他条件进行优化，最终建立检测血清大豆抗原蛋白抗体的间接ELISA方法，利用该方法检测小鼠免疫后血清抗体水平。

牛病毒性腹泻病毒抗原抗体检测方法研究进展

随着现代分子生物学与免疫学技术的快速发展与应用,牛病毒性腹泻病毒新型抗原抗体检测方法不断发展和完善对近年来对牛病毒性腹泻病毒的RT-PCR、荧光定量RT-PCR、RT-LAMP、ELISA和胶体金技术等抗原抗体检测方法进行综述,以期为不同实验室寻找适合的诊断方法以及发展新型诊断方法提供参考,为我国牛病毒性腹泻病的综合防控提供合理的科学依据。

HIV抗原抗体检测试剂在血液筛查中的应用研究

目的研究第四代HIV抗原检测试剂在血液筛查中的应用价值。方法对第四代HIV抗原抗体检测试剂进行灵敏度和重复性实验;分别采用第三代HIV抗体检测试剂和第四代HIV抗原抗体检测试剂对血液标本进行初复检,对第三代试剂检测阴性第四代试剂检测阳性的标本采用HIV核酸检测方法进行确认。结果第四代HIV抗原抗体检测试剂最低抗原检出浓度为1.25U/ml,孔间精密度为3.2%;2009年10月～2011年3月,共筛查标本23480例,其中13例第三代试剂结果阴性而第四代试剂结果阳性,经HIV核酸检测的方法进行确认,全部结果均为阴性。

HIV抗原/抗体检测的电化学发光法在献血者血液筛查中的应用评估

目的评估检测HIV抗原/抗体的电化学发光免疫分析法(ECLIA)在献血者血液筛查中的应用效果。方法选取本站2016年9月~2020年9月采用ELISA法抗-HIV反应性的献血者标本128(人)份[双试剂反应性7份(其中WB确认抗-HIV阳性6份、NAT确认抗-HIV阴性1份),单试剂反应性121份(均经WB确认为阴性)]以及从本站2020年6~9月以ELISA法筛查和NAT检测均为非反应性的献血者留存标本中随机选取1360(人)份,用ECLIA法对这2类献血者标本做HIV抗原/抗体检测;比较2种方法的检测结果,包括HIV阳(阴)性符合率、敏感性与特异性。结果对于1360份ELISA和NAT检测均为非反应性的标本,用ECLIA检测亦均为非反应性。ECLIA法对于ELISA法检测和确认试验均为献血者HIV反应性标本的检测结果符合率100%(6/6);对于ELISA法抗-HIV检测反应性但确认试验阴性的122份标本的HIV抗原/抗体检测反应(性)率3.28%(4/122)、非反应(性)率96.72(118/122)ECLIA法与ELISA法的总体符合率为96.88%(124/128)。ECLIA的敏感性、特异性和假阳性率分别为100%,99.73%和0.27%;ELISA的敏感性、特异性和假阳性率分别为100%、91.77%和8.23%。结论检测HIV抗原/抗体的ECLIA法同时具有良好的敏感性和特异性,可以满足献血者血液筛查的要求,且较血站目前常规使用的ELISA法检测的HIV假阳性率更低。