重组HIV-1抗原的应用及评价

将纯化的基因重组HIV 1P2 4和融合蛋白P2 4 gp4 1包被微孔板 ,用ELISA分别检测正常人血清和HIV Ab国家参比品 (Panel)。rP2 4对 2 0份HIV Ab阳性Panel的检出率为 95 % (19/ 2 0 ) ,对 2 0份HIV Ab阳性Panel通过率为90 % (18/ 2 0 ) ,P2 4 gp4 1对 2 0份HIV Ab阳性Panel检出率为 90 % (18/ 2 0 ) ,对 2 0份HIV Ab阴性Panel的通过率为6 0 % (12 / 2 0 ) ;rP2 4和P2 4 gP4 1对正常人血清的检测结果均为阴性。结果表明研制的P2 4具有较高的敏感性和特异性 。

基因重组HIV-1 P24抗原的应用分析

目的 分析重组HIV-1-p24抗原,以便研制HIV-抗体诊断试剂。方法 以纯化重组P24为包被抗原,应用ELISA检测HIV-Ab国家参比品和正常人血清。结果20份阳性HIV-Ab检出阳性19份,符合率为95％;20份阴性HIV-Ab检出阴性18份,符合率为90％;50份正常人血清检测结果均为阴性。结论 所研制的重组P24抗原具有较高的特异性和敏感性,可用于制备HIV抗体诊断试剂。

HIV-1 gp41重组抗原的表达及其免疫反应性检测

为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后标记HRP,通过双抗原夹心酶联免疫方法检测其免疫反应性和特异性。结果表明,获得的HIV-1gp41重组抗原能够与相应抗体特异性结合,与多种无关抗体间无交叉反应,对825份HIV阴性标本检测无错检。检测结果说明该重组抗原具有良好的免疫反应性,在HIV-1抗体诊断试剂中具有潜在的应用价值,为进一步研究gp41抗原奠定了基础。