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Primary Effusion Lymphoma in a HIV-1/2-Infected Patient
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作者 Maria Caixas Lima Pedro Vasques +7 位作者 Andreia Paulos André Valente Joana Santos Carla Antunes Matilde Gonçalves Maria Isabel Casella Nuno Luis José Poças 《World Journal of AIDS》 2023年第3期116-124,共9页
Background: Primary effusion lymphoma (PEL) is a lymphoid proliferation related to Kaposi sarcoma herpesvirus 8/human herpesvirus 8 (KSHV/HHV8) that affects mainly human immunodeficiency virus (HIV) infected individua... Background: Primary effusion lymphoma (PEL) is a lymphoid proliferation related to Kaposi sarcoma herpesvirus 8/human herpesvirus 8 (KSHV/HHV8) that affects mainly human immunodeficiency virus (HIV) infected individuals but can also occur in other immunodeficiency settings. It is characterized by lymphomatous effusions in different serous body cavities without the presence of a detectable tumor mass. The diagnosis is challenging and the clinical outcomes are poor. Aim: The aim of this paper is to report a rare case of PEL in a man who have sex with women (MSW) with HIV-1/2 infection, history of visceral Kaposi sarcoma (KS) and the development of a seronegative arthritis previous to the lymphoproliferative disease diagnosis. PEL presented with ascites, was treated with high-dose chemotherapy and autologous stem cell transplantation, with a good clinical outcome. Case Presentation: We describe a case of a 48-year-old HIV-1/2-infected patient from a high HHV8 seroprevalent country, hospitalized following a three-month history of increased abdominal volume and general constitutional symptoms. Laboratory data revealed normocytic normochromic anemia and a high level of lactate dehydrogenase. A diagnostic paracentesis was performed with cytology compatible with high-grade B-cell lymphoma. Peritoneal fluid cytology showed large lymphoid cells expressing leucocyte-common antigen CD45 without expression of the CD20 antigen (B-lymphocytes) and positivity for HHV8 by immunocytochemical staining, compatible with the diagnosis of PEL. 展开更多
关键词 Primary Effusion Lymphoma Acquired Immunodeficiency Syndrome hiv-1 hiv-2 Kaposi Sarcoma Herpesvirus 8/Human Herpesvirus 8 People Living with HIV
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中国流行株HIV-1gag-gp120与IL-2/IL-6共表达核酸疫苗质粒的构建和实验免疫研究 被引量:8
2
作者 金宁一 罗坤 +5 位作者 郭焱 秦云龙 王宏伟 方厚华 安汝国 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期1-3,共3页
以pcDNA3.1(+ )为载体 ,构建了含中国流行株HIV_1gag_gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒 ;并以pIRES 1neo为载体 ,构建了gag_gp12 0与IL_2 /IL_6共表达的 2种核酸疫苗质粒。将核酸疫苗质粒在体外转染BHK_2 1细胞 ,ELISA方法检测到 3种核酸... 以pcDNA3.1(+ )为载体 ,构建了含中国流行株HIV_1gag_gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒 ;并以pIRES 1neo为载体 ,构建了gag_gp12 0与IL_2 /IL_6共表达的 2种核酸疫苗质粒。将核酸疫苗质粒在体外转染BHK_2 1细胞 ,ELISA方法检测到 3种核酸疫苗质粒均表达了目的HIV_1结构蛋白。将核酸疫苗质粒免疫小鼠 ,免疫学指标检测结果表明 ,在本实验条件下 ,未能检测到含有gag_gp12 0的核酸疫苗质粒免疫鼠的细胞免疫和体液免疫功能的明显改变 ;而与IL_2 /IL_6共表达的 2种核酸疫苗质粒使免疫鼠CD4 +、CD8+T细胞数量明显升高 ,ConA和LPS诱导的细胞增殖能力显著增强 ,CTL活性明显提高 。 展开更多
关键词 hiv-1gAg-gp120 IL-2 IL-6 共表达 核酸疫苗
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HIV-1与HIV-2交叉反应毒株的基因亚型分析 被引量:5
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作者 于国龙 刁丽梅 +4 位作者 李杰 林鹏 鄢心革 林萍 张玉润 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第4期198-200,共3页
目的分析HIV-1+2蛋白印迹试验中HIV-1确证阳性同时出现HIV-2带型样本的基因亚型。方法将HIV-1+2确证试验中同时出现HIV-2带型的样本,通过基因诊断确认是否为HIV-2共感染;同时扩增HIV-1 gag,env基因段,通过测序和系统进化树的构建,分析具... 目的分析HIV-1+2蛋白印迹试验中HIV-1确证阳性同时出现HIV-2带型样本的基因亚型。方法将HIV-1+2确证试验中同时出现HIV-2带型的样本,通过基因诊断确认是否为HIV-2共感染;同时扩增HIV-1 gag,env基因段,通过测序和系统进化树的构建,分析具有HIV-2带型的HIV-1毒株的基因亚型。结果在34份出现HIV-2带型的标本中,基因诊断发现均为交叉反应,并非HIV-1和HIV-2共感染。出现交叉反应的毒株中以AE亚型为主,占73.5%(25/34),BC重组和B亚型分别占17.7%(6/34)和8.8%(3/34)。结论HIV-1+2蛋白确证试验中HIV-1确证阳性,同时出现HIV-2带型的阳性样本,并非HIV-1和HIV-2共感染,而是交叉反应。出现交叉反应的HIV-1毒株以AE亚型为主。 展开更多
关键词 交叉反应 hiv-1 hiv-2 基因亚型 聚合酶链反应
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乙型肝炎、性病和HIV-1感染人群中CCR5,CCR2和SDF1等位基因多态性的研究 被引量:5
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作者 刘惠刚 王福生 +5 位作者 洪卫国 金磊 周越塑 侯静 张冰 刘明旭 《世界华人消化杂志》 CAS 2002年第1期19-23,共5页
目的:研究乙型肝炎、HIV-1感染者和性病患者中CCR5,CCR2和SDF1等位基因的分布及其特点。 方法:收集乙型肝炎患者(268例)、艾滋病感染者(130例)和性病(259例)的血液标本共657份,应用QIAGEN全血细胞基因组提取试剂盒,分离纯化人血细胞基因... 目的:研究乙型肝炎、HIV-1感染者和性病患者中CCR5,CCR2和SDF1等位基因的分布及其特点。 方法:收集乙型肝炎患者(268例)、艾滋病感染者(130例)和性病(259例)的血液标本共657份,应用QIAGEN全血细胞基因组提取试剂盒,分离纯化人血细胞基因组DNA样品,应用PCR或PCR-RFLP分析CCR5,CCR2-64I和SDF1-3’A等位基因突变频率和分布特点。 结果:在乙型肝炎、性病和HIV-1感染者人群中,CCR5△32的突变频率分别为0.19%、0%和0%,在259例个体性病患者中只有一例男性发生了杂合子突变,而在乙型肝炎和HIV-1感染者人群中没有检测出CCR5△32突变基因,可见,CCR5△32的突变率较低,反之,CCR2-64I的突变频率较高,与前述三种患者对应的突变频率分别为19.3%、19.6%和20.7%,进而分析发现SDF1-3’A等位基因在乙肝、性病和HIV-1感染人群中的突变率分别为27.8%,27.4%和26.9%,应用x^2检测与统计学分析显示在乙肝,性病和HIV-1感染人群中CCR2-64I和SDF1-3’A等位基因突变分布之间无连锁关系。 结论:突变频率很低的CCR5△32基因型在上述3种类型传染病的发病过程中可能不起主要作用;而突变频率较高的CCR2-64I和SDF1-3’A基因型的功能及其在上述3种传染病进程中的意义有待进一步研究。 展开更多
关键词 乙型肝炎 性病 hiv-1感染人群 CCR5 CCR2 SDF1 基因多态性
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我国首次发现的HIV-1和HIV-2双重感染样品中病毒部分基因的序列特征分析 被引量:4
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作者 邢辉 潘品良 +5 位作者 冯毅 林旭东 于健石 龚新昌 戴玉琳 邵一鸣 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期111-115,共5页
上海市卫生检疫局送检了一例HIV - 1和HIV - 2抗体检测均呈阳性的双重感染样品 ,对其感染的HIV前病毒的 gag和env基因区进行了序列分析 ,首次阐明我国发现的HIV双重感染样品的HIV部分基因特征。从HIV感染者淋巴细胞 (peripheralbloodmon... 上海市卫生检疫局送检了一例HIV - 1和HIV - 2抗体检测均呈阳性的双重感染样品 ,对其感染的HIV前病毒的 gag和env基因区进行了序列分析 ,首次阐明我国发现的HIV双重感染样品的HIV部分基因特征。从HIV感染者淋巴细胞 (peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)中提取前病毒DNA ,分别使用HIV 1和HIV 2特异性引物用套式PCR扩增HIV 1和HIV 2的部分基因区。PCR产物不经克隆直接测序 ,经GenBank检索并使用GCG软件包进行序列分析。结果表明 ,其中感染的HIV 2毒株中gag基因区与德国株HI2PEI2KR相似 ,基因离散率仅为8 1% ,env基因C2 -V3区与来自几内亚比绍的HIV 2U0 5 35 8株最近 ,离散率为 13 0 4% ,在其 gp36区发现与HIV 2U0 5 35 8基因离散率为 10 6 3% ,两个毒株均属HIV 2中的A亚型。而其HIV 1型毒株在 gag和env区都与从尼日利亚分离的H92NG0 83株相似 ,属HIV 1的G亚型。本文首次对我国发现的HIV 2型毒株进行了主要基因区的序列分析 ,表明在非洲较常见的HIV 2A亚型和HIV 1G亚型毒株 ,已随援外劳工传入我国。 展开更多
关键词 双重感染 序列分析 系统树分析 hiv-1 hiv-2
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中国流行株HIV-1gag和hIL-2/hIL-6核酸疫苗构建与实验免疫研究 被引量:4
6
作者 秦云龙 金宁一 +5 位作者 罗坤 李凡 王宏伟 王莉馨 张永生 殷震 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期5-8,共4页
目的探讨中国流行株 HIV- 1gag与 h IL - 2 /h IL - 6共表达重组核酸疫苗质粒的免疫效果。方法以核酸疫苗质粒 p IRES1neo为表达载体 ,构建重组核酸疫苗质粒 p IRES1- gag、p IRES1- gag- h IL- 2、p IRES1- gag- h IL- 6 ,通过间接免... 目的探讨中国流行株 HIV- 1gag与 h IL - 2 /h IL - 6共表达重组核酸疫苗质粒的免疫效果。方法以核酸疫苗质粒 p IRES1neo为表达载体 ,构建重组核酸疫苗质粒 p IRES1- gag、p IRES1- gag- h IL- 2、p IRES1- gag- h IL- 6 ,通过间接免疫荧光试验、Dot- EL ISA检测 gag/h IL - 2 /h IL - 6基因的表达产物。另将此重组核酸疫苗质粒免疫 Balb/c小鼠 ,进行淋巴细胞转化试验、CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞数量测定、细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL )特异性杀伤作用检测及血清抗体检测 ,结果构建的重组质粒转染 BHK细胞后可表达目的基因 ,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖、诱导特异性 CTL 反应 ,当和 h IL- 2 /h IL- 6共表达时免疫效果更加显著。讨论与 Gag蛋白共表达的 h IL- 2 /h IL- 6能够进一步增强免疫鼠的细胞免疫与体液免疫水平 ,构建的重组质粒为 HIV- 展开更多
关键词 hiv-1 GAG蛋白 白细胞介素-2 白细胞介素-6
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HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:4
7
作者 楚鹰 宫祥丹 +5 位作者 高建伟 苏艾荣 陈德燕 宋红勇 吴喜林 吴稚伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期540-545,共6页
目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠... 目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型(hiv-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体 真核蛋白表达 疫苗
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q^2引导构象选择CoMFA方法研究HIV-1 RT抑制剂 被引量:3
8
作者 曾宝珊 陈敏伯 +1 位作者 董喜成 刘新泳 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第7期1121-1128,共8页
对未知受体结构的药物设计其主导方法CoMFA来说,柔性目标分子的多种构象造成了问题的复杂性.本文介绍交叉验证参数R^2(q^2)引导的构象选择CoMFA方法,选择化合物的最佳构象.将一组47个HIV-1 RT抑制剂进行有、无构象选择的CoMFA分析来作评... 对未知受体结构的药物设计其主导方法CoMFA来说,柔性目标分子的多种构象造成了问题的复杂性.本文介绍交叉验证参数R^2(q^2)引导的构象选择CoMFA方法,选择化合物的最佳构象.将一组47个HIV-1 RT抑制剂进行有、无构象选择的CoMFA分析来作评价.根据化合物的活性、毒性、选择性指数(毒性/活性比)等实验数据构建得到的模型,其交叉验证参数q^2为0.7以上,非交叉验证的相应参数为0.94以上,最后,还经过试验集化合物验证该模型的预测能力,置信度(1-α)>0.99. 展开更多
关键词 q^2引导构象选择 CoMFA方法 hiv-1RT抑制剂 比较分子场分析 配体药物 药物设计
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HIV-1膜蛋白GP120V1/V2区域的真核表达、纯化和鉴定 被引量:3
9
作者 宋红勇 楚鹰 吴稚伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期142-145,共4页
目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向... 目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础。方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向克隆到多系统表达载体pTriEx-3 Hygro vector(Merck&Co.,Inc.)中,构建了表达质粒,并将表达质粒瞬时转染293T细胞,144小时后收获上清液,经浓缩、纯化后,SDS-PAGE电泳,Western blot检测蛋白的表达,ELISA检测其与HIV-1阳性病人血清的反应性。结果:经SDS-PAGE电泳、Western blot、ELISA方法证实确实得到了有免疫反应活性的V1V2蛋白,从表观分子量判断,表达的V1V2蛋白被糖基化修饰。使用V1V2蛋白作为抗原,分析发现中国HIV-1阳性病人体内比较广泛的存在着V1V2的抗体,为血清学的分析奠定了实验基础。 展开更多
关键词 hiv-1 V1V2 真核表达
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广州市发现首例HIV-1/HIV-2混合感染 被引量:5
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作者 高凯 李燕 +5 位作者 梁彩云 徐慧芳 顾菁 李泽荣 赵宇腾 张周斌 《华南预防医学》 2006年第1期17-19,共3页
目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验... 目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验采用蛋白印迹法(WB)。结果患者为男性,非洲马里人,血清经初筛试验为HIV阳性。初筛阳性的血清,以HIV-1/HIV-2 HIVBLOT2.2试剂做蛋白印迹试验(WB),确认为HIV-1阳性,同时HIV-2的特异条带gp36阳性;样本再用HIV-2型的BLOT1.2膜条确认为HIV-2阳性。结论被检者为HIV-1/HIV-2混合感染,这是广州市、广东省首次发现HIV-1/HIV-2混合感染,提示HIV-2可能会以对外交流等方式传入广东。 展开更多
关键词 hiv-1 hiv-2 抗体 病毒
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HIV-1 HXB2株蛋白酶在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定 被引量:1
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作者 贾建安 周波 +9 位作者 钱宝华 蒋少华 陈秋莉 潘欣 赵平 任浩 温宗梅 邓松华 卢洪洲 潘卫 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期108-112,共5页
目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1GagP2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选。方法根据HIV-1HXB2株PRDNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DN... 目的原核表达、纯化HIV-1型HXB2株蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV-1GagP2/NC蛋白酶切割位点序列随机突变的噬菌体展示文库的切割筛选。方法根据HIV-1HXB2株PRDNA序列设计引物,用重叠延伸PCR方法合成使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体进行测序。将HIV-1PRDNA克隆至原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和柱对表达蛋白进行纯化,SDS-PAGE鉴定,并用HIV阳性血清进行免疫反应性的鉴定。结果合成的使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经测序显示其编码氨基酸序列与原始序列完全一致。所构建的HIV-1PR原核表达质粒pQE30-pr,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为14000的HIV-1PR蛋白,纯化的目的蛋白浓度为7.74mg/ml。ELISA检测该蛋白与HIV阳性血清呈特异性反应。结论已成功合成并克隆了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1PR的DNA编码序列,经表达及纯化的HIV-1PR蛋白具有免疫学特性。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒 蛋白酶 基因表达 大肠杆菌 hiv-1 HXB2
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HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究 被引量:1
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作者 王莉馨 金宁一 +5 位作者 王宏伟 秦云龙 罗坤 葛涛 江文正 金洪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期297-300,共4页
目的:将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达,以期获得重组痘苗病毒,观察细胞因子的佐剂作用,与核酸疫苗混合免疫,评价免疫效果,为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法:将HIV-1中国流行... 目的:将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达,以期获得重组痘苗病毒,观察细胞因子的佐剂作用,与核酸疫苗混合免疫,评价免疫效果,为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法:将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒,SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠,进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4+、CD8+ T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果:获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比,vJ38gag-IL-2,具有更好的免疫原性,重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次,以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论:重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。 展开更多
关键词 hiv-1 中国流行株gag基因 HIL-2 痘苗病毒 表达 DNA疫苗
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北京市同性恋HIV-1感染者的包膜基因C2-V3区序列测定和亚型分析 被引量:40
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作者 姚均 何忠平 +4 位作者 赵红心 李兴旺 冯鑫 徐克沂 张福杰 《中国性病艾滋病防治》 2002年第3期131-133,141,共4页
目的 了解北京市同性恋HIV-1感染者HIV-1的亚型类型及传播来源和流行时间。方法 应用套式聚合酶链式反应(PCR)对12份1993~2001年北京市HIV-1阳性同性恋者外周血单个核细胞(PBMC)的核酸样品进行扩增,并对其包膜区的C2-V3段的306个... 目的 了解北京市同性恋HIV-1感染者HIV-1的亚型类型及传播来源和流行时间。方法 应用套式聚合酶链式反应(PCR)对12份1993~2001年北京市HIV-1阳性同性恋者外周血单个核细胞(PBMC)的核酸样品进行扩增,并对其包膜区的C2-V3段的306个核酸序列进行测定和分析。结果12份样品全部是B亚型的HIV-1毒株序列,其亚型内的基因离散率为 10.35± 2.06,与国际 A-E亚型共享序列比较后发现其与 A、C、D、E亚型的共享序列的基因离散率均大于 25%,而与国际 B亚型共享序列的基因离散率仅为11.25±3.60。系统树分析显示,12个毒株与B亚型共享序列聚在一起并远离其它国际亚型,并且12个毒株与SF162紧密相连,而与国际B亚型共享序列和泰国B亚型代表株TH14可以分开。对gp120中最重要的中和抗体决定簇V3环序列进行对比分析发现,12毒株在V3环中变化较大,其中4毒株带有GPGR这一欧美B亚型V3环顶端四肽序列特征,占33.33%,1个毒株带有GLGR,占8.33%,而其它7个毒株为GWGR,占58.34%。结论HIV-1在北京市同性恋人群中流行的为B亚型,流行来源为欧美,流行时间10年左右,V3环顶端四肽序列特征以GWGR为主。 展开更多
关键词 北京 同性恋 包膜基因 C2-V3区 hiv-1 亚型 基因变异 序列测定
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究 被引量:2
14
作者 魏强 王健伟 +3 位作者 郭丽 屈建国 赵玉琪 洪涛 《中国实验诊断学》 2006年第7期725-729,共5页
目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白... 目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP(+)的肝癌细胞BEL-7402和AFP(-)的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd-null相比,重组腺病毒rvAdAFP-vpr只在AFP(+)肝癌细胞中表达HIV-1Vpr,并诱导肝癌细胞的细胞周期G2期阻滞和细胞凋亡,而在AFP(-)肝癌细胞中不明显表达Vpr,不能显著诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡。结论重组腺病毒rvAdAFP-vpr对于Vpr的表达是AFP表达特异性的,可有效诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡,有望用于AFP(+)肝癌的基因治疗研究。 展开更多
关键词 甲胎蛋白启动子 hiv-1 vpr 重组腺病毒 细胞周期G2阻滞 凋亡
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应用斑点金免疫渗滤试验快速同步检测抗HIV-1,HIV-2IgG抗体 被引量:2
15
作者 翟建新 王业富 +3 位作者 段炼炼 徐争辉 万志香 杨永 《中国病毒学》 CSCD 2006年第2期116-120,共5页
应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸。通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C)。这5种抗原蛋白首先... 应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸。通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C)。这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点。用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟。与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点。同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值。 展开更多
关键词 hiv-1/2 斑点金免疫渗滤试验(DIGFA) 融合蛋白 P24 GP41
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HIV-1 SF_2株env基因(gp41)的克隆构建及其原核表达 被引量:1
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作者 董梅 鲁晓青 +1 位作者 陈向伟 王斌 《山西医科大学学报》 CAS 2001年第6期481-483,共3页
目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表... 目的 克隆并在大肠杆菌中表达HIVgp4 1。 方法 应用PCR技术 ,纯化HIV 1SF2 株外膜蛋白env基因 (gp4 1) ,并重组入原核高效表达载体 pBV2 2 0 ,在大肠杆菌HB10 1中进行表达。 结果 SDS PAGE电泳结果表明 ,在 4 4 0 0 0处有一条蛋白表达带。Westernblot证明 ,4 4 0 0 0蛋白带可与HIV 1阳性血清发生特异性反应。结论 该重组表达 gp4 1的融合蛋白 ,可为HIV 1gp4 1。 展开更多
关键词 hiv-1SF2 HIV包膜蛋白质gp41 PBV220 原核表达 基因 克隆 大肠杆菌
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ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析 被引量:7
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作者 金晶 《中国医药指南》 2018年第4期49-49,共1页
目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标... 目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标本进行检测,检测内容包括HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体。结果采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性2例,阳性率为0.50%,梅毒抗体阳性3例,阳性率为0.75%,丙型肝炎抗体阳性4例,阳性率为1%;采用化学发光法检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性3例,阳性率为0.75%,梅毒抗体阳性4例,阳性率为1%,丙型肝炎抗体阳性5例,阳性率为1.25%。结论采用化学发光法检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙型肝炎抗体的敏感性高于酶联免疫法检测,可作为首选检测方案,具有良好的临床应用价值。 展开更多
关键词 ELISA法 化学发光法 hiv-1/hiv-2 梅毒抗体 丙型肝炎抗体 检测
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5,6-二氢-2-吡喃酮作为HIV-1蛋白酶抑制剂的3D-QSAR和对接研究 被引量:2
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作者 仝建波 吴英纪 +1 位作者 白敏 占培 《原子与分子物理学报》 北大核心 2017年第2期238-244,共7页
本文采用分子对接法研究了24个5,6-二氢-2-吡喃酮衍生物与HIV-1蛋白酶的相互作用,并采用三维定量构效关系(3D-QSAR)研究了药物分子化学结构和生物活性之间的关系.最终得到模型的复相关系数(R_(cum)~2)为0.961、留一法交互校验复相关系数... 本文采用分子对接法研究了24个5,6-二氢-2-吡喃酮衍生物与HIV-1蛋白酶的相互作用,并采用三维定量构效关系(3D-QSAR)研究了药物分子化学结构和生物活性之间的关系.最终得到模型的复相关系数(R_(cum)~2)为0.961、留一法交互校验复相关系数(Q_(cv)~2)为0.897,外部交互验证复相关系数(Q_(ext)~2)为0.880,从结果可以看出三维定量构效关系对化合物的抗艾滋病活性具有比较好的预测能力.然后通过分子对接研究了配体小分子和HIV-1蛋白酶活性氨基酸残基之间的结合模式,这些信息对于以后设计合成新的抗艾滋病药物具有一定的指导作用. 展开更多
关键词 定量构效关系 分子对接 5 6-二氢-2-吡喃酮 hiv-1蛋白酶
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HIV-1感染、致病机理和人体CCR5、CCR2等基因多态性之间的相互关系研究进展 被引量:7
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作者 王福生 陈菊梅 《中国性病艾滋病防治》 2000年第1期58-60,共3页
1 概述 HIV-1感染人体后引起进行性的AIDS病变,通常经历三个典型的时期,第一为急性感染期,表现为广泛的病毒血症;接着是无症状期,此时在淋巴器官中大多可检测出病毒的复制;最后是免疫系统破坏,并伴随病毒血症的再次出现,并产生继发性感... 1 概述 HIV-1感染人体后引起进行性的AIDS病变,通常经历三个典型的时期,第一为急性感染期,表现为广泛的病毒血症;接着是无症状期,此时在淋巴器官中大多可检测出病毒的复制;最后是免疫系统破坏,并伴随病毒血症的再次出现,并产生继发性感染等而死亡。引起AIDS的病毒株有以下几种:(1)嗜巨噬细胞HIV-1株:它主要通过性传播,从初期感染者体内分离到的原代病毒,它感染细胞后不诱生合胞体(syncytia);(2)嗜T细胞HIV-1病毒株:是从发病的AIDS病人身上来源的或实验室培养的毒株。它的毒性很强,感染后,病情呈进行性发展;(3)双嗜性HIV-1病毒株,即感染巨嗜细胞,又感染T细胞。 展开更多
关键词 艾滋病 hiv-1 CCR5 CCR2 基因多态性
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共表达HIV-1CN与IL-2基因产物免疫鼠T淋巴细胞亚群的研究 被引量:1
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作者 郭焱 郭巍 《武警医学院学报》 CAS 2000年第4期245-247,共3页
目的 :研究细胞因子在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法 :以表达中国流行株HIV lgag gp12 0基因的核酸疫苗质粒 pcDNAGP及共表达中国流行株HIV lgag gp12 0基因与Ⅱ 2基因的核酸疫苗质粒 pGPH 2免疫Balb/c鼠 ,用流式细胞仪测定 ... 目的 :研究细胞因子在机体免疫应答过程中的免疫佐剂效应。方法 :以表达中国流行株HIV lgag gp12 0基因的核酸疫苗质粒 pcDNAGP及共表达中国流行株HIV lgag gp12 0基因与Ⅱ 2基因的核酸疫苗质粒 pGPH 2免疫Balb/c鼠 ,用流式细胞仪测定 10 0 0 0个免疫鼠脾淋巴细胞中CD4+,CD8T细胞数及CD4+/CD8+比值。结果 :pGIL 2与pcDNAGP比较 ,pGIL 2免疫鼠CD4 和CD8T细胞数明显提高。结论 :在机体的免疫应答过程中 ,细胞因子IL 展开更多
关键词 融合基因 IL-2 共表达 hiv-1CN T淋巴细胞亚群
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