ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析

目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标本进行检测,检测内容包括HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体。结果采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性2例,阳性率为0.50%,梅毒抗体阳性3例,阳性率为0.75%,丙型肝炎抗体阳性4例,阳性率为1%;采用化学发光法检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性3例,阳性率为0.75%,梅毒抗体阳性4例,阳性率为1%,丙型肝炎抗体阳性5例,阳性率为1.25%。结论采用化学发光法检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙型肝炎抗体的敏感性高于酶联免疫法检测,可作为首选检测方案,具有良好的临床应用价值。

ELISA法和化学发光法对脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测比较

目的:分析和比较临床上采用酶联免疫吸附法(ELISA)以及化学发光法检测脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体以及丙肝抗体的结果。方法:2011年8月-2014年8月收集脐血1 147份,对其临床数据进行回顾性分析,分别采用酶联免疫吸附以及化学发光法对其中的HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体进行检测,并对结果进行分析。结果:1 147份脐血中酶联免疫吸附方法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体阳性率分别为0.61%(7/1 147)、0.87%(10/1 147)、1.13%(13/1 147),而化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体阳性率分别为0.78%(9/1 147)、0.96%(11/1 147)、1.39%(16/1 147),并且将购买的抗体标准品进行梯度稀释。检测结果表明,3种抗体稀释到10pg/m L,化学发光法检测3组抗体均为阳性,酶联免疫吸附方法仅梅毒抗体为阳性,而HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的检测结果均为阴性。结论:本研究结果表明,临床上采用化学发光发对脐血中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体检测的灵敏性高于ELISA方法,因此在临床检测过程中建议采用化学发光发进行检测。

血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体行ELISA法和化学发光法检测的对比研究

目的比较血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体行酶联免疫吸附法(ELISA)和化学发光法检测的结果。方法选取2017年3月-2019年4月万载县人民医院住院患者986例的血液标本,以ELISA法和化学发光法对患者血清、标志物行HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体及丙肝抗体检测,比较检测结果。结果 ELISA法检测HIV-1/HIV-2抗体阳性率为0.51%,梅毒抗体阳性率为0.81%,丙肝抗体阳性率为1.01%;化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体阳性率为0.81%,梅毒抗体阳性率为0.91%,丙肝抗体阳性率为1.32%;标准抗体品梯度稀释后化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体均为阳性,ELISA法中仅梅毒抗体近阳性。结论化学发光法在检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体中敏感性更高,结果更准确。

ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测分析

目的:探讨分析ELISA法和化学发光法对梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体检测效果。方法:选取我院体检中心1251例血液标本,分别采用ELISA法和化学发光法对血液标本中梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体进行检查。结果:使用ELISA法和化学发光法对血液标本进行梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的阳性检测,显示使用化学发光法检测出为阴性的血液标本,ELISA法同样检测出为阴性。而化学发光法检查出为阳性的血液标本,ELISA法显示并不是所有的样本为阳性,经其他辅助方法诊断其结果与化学发光发的检查结果相符。结论:在梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体、丙肝抗体的检测中,化学发光法的敏感性较高,检查结果较为准确,值得推广。

黄芩、猫眼草、连翘单味中药体外抗HIV-1病毒活性的研究

目的:构建抗人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)-1假病毒药物筛选平台,在此基础上观察黄芩、猫眼草、连翘单味中药对HIV假病毒感染MAGI-CCR5细胞系的影响,评价其抗病毒作用。方法:选用重组质粒PLAI(含HIV包膜蛋白基因)和重组质粒JRFC(含HIV骨架基因)共转染293T细胞制备假病毒,建立假病毒筛选平台;采用MTT法检测药物对MAGI-CCR5细胞增殖的影响,筛选出对细胞无毒性的最合适浓度。通过药物体外对假病毒感染MAGI-CCR5的抑制实验,观察3种单味中药水煎液体外抗HIV-1病毒的活性。结果:3种单味中药均有体外抗HIV假病毒作用,且抗病毒作用与药物质量分数呈明显的剂量效应关系,2.17 mg/L黄芩、3.45 mg/L猫眼草、2.50 mg/L连翘表现出最高抑制率,依次是41.87%、37.38%、14.12%。结论:单味中药黄芩、猫眼草具有较好的体外抗HIV病毒的作用,连翘的抗HIV病毒作用相对较弱。

HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定

目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。

抗HIV-1 gp120单链抗体导向SEAD227A融合蛋白原核温控型表达载体构建及表达

人工合成了能广泛识别HIV—1 gp120的单链抗体(SeFv120)基因和金黄色葡萄菌外毒素A(SEA)基因，将SEA基因第227位编码Asp(D)的密码子GAT转换成编码Ala(A)的密码子GCT，并对两基因进行密码子优化。构建原核温控型表达质粒pBV—120和pBV—SL120，经条件优化，pBV—120和pBV—SL120分别在E．coli BL21(DE3)plys中44℃诱导6h、42℃诱导7h获得最佳表达，表达量分别占菌体总蛋白的27．673％和32．519％。目的蛋白经包涵体洗脱、分子筛层析折叠复性后可与HIV—1抗原条发生良好的结合反应。

2015年乐山市HIV-1抗体阳性病例抗病毒治疗效果及耐药分析

目的分析乐山市接受抗病毒治疗的HIV-1抗体阳性病例治疗效果及毒株耐药、突变情况。方法选取乐山市2015年接受抗病毒治疗时间>6个月的HIV-1抗体阳性病例共计620例,采集其抗凝全血进行病毒载量检测,对病毒载量>1 000copy/mL的样本采用自建基因型耐药检测进行耐药检测及分析。结果 620例患者中,419例病毒载量<200copy/mL,抗病毒治疗有效率为67.58%;175例病毒载量>1 000copy/mL,均值1.85×105copy/mL,病毒抑制失败率28.22%;其中93例样本核酸扩增阳性,主要为CRF07-BC亚型(占68.82%)和CRF01-AE亚型(占19.35%)。总耐药率6.13%(33/538),其中对核苷类反转录酶抑制剂(NRTIs)、非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)和蛋白酶抑制剂(PIs)的耐药率分别为57.58%、84.85%和18.18%;耐药毒株对NRTI主要突变位点为M184V、K65R,对NNRTI主要突变位点为K103N、K101E、Y181C、G190A,对PI未发现主要位点突变,次要突变位点主要是Q58E、A71V。结论乐山地区部分HIV-1抗体阳性患者抗病毒治疗效果较差。与2014年相比,总耐药率及对NRTIs、NNRTIs耐药率均有所下降,但对PI耐药率上升。应加强对接受HAART的HIV-1抗体阳性病例的病毒载量及耐药检测,及时评估治疗效果及耐药情况。

应用斑点金免疫渗滤试验快速同步检测抗HIV-1,HIV-2IgG抗体

应用斑点金免疫渗滤试验(dotimmunogoldfiltrationassay,DIGFA)建立了一种同步快速检测四种抗HIV-1/2IgG抗体的HIV诊断试纸。通过基因工程技术在大肠杆菌中表达了5种HIV抗原蛋白片段(P24,GP41,GP36,GP120V3,GP120C)。这5种抗原蛋白首先被固定在硝酸纤维素膜上,然后滴加待测血清,其中的病毒抗体通过免疫反应与抗原结合,再加胶体金标记的葡萄球菌蛋白A(SPA),待其渗过膜片后,洗涤,即可形成肉眼可见的红色斑点。用已确证的21份HIV阳性血清(其中包括1份HIV-1标准阳性血清和1份HIV-2标准阳性血清)和30份阴性血清进行了试验,结果表明该快速检测方法与ELISA方法无显著差异。该检测方法不需任何仪器,仅凭肉眼即可判定结果,整个检测过程不超过5分钟。与传统的的ELISA法相比,具有方便快速,成本低廉,应用范围广等优点。同时,此HIV快速诊断试纸可以同步检测并区分针对HIV-1和HIV-2感染的不同检测标志物(抗P24、GP41、GP120和GP36抗体),这对提高快速检测的灵敏度和准确性,以及对判断HIV感染者是否临近或已进入AIDS期有着较高的应用价值。

探讨ELISA和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测

目的:比较ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测。方法:用ELISA法与化学发光法对病人血清和标准物质进行以上三种抗体的检测,并对结果进行分析。结果:(1)化学发光法测定值较低的阳性标本,ELISA法测定有可能为阴性。(2)用化学发光法检测病人血清中HIV-1/HIV-2抗体为阴性标本的测定数据有一定程度的波动。(3)同一公司生产的以上三种抗体的标准物质,用ELISA均为阳性,可是用化学发光法仅丙肝抗体检测为阳性,而其它两种均为阴性。结论:基本证实了化学发光法比ELISA法敏感性高。

ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测意义

目的探讨分析ELLSA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙抗体的临床检测意义。方法将382份脐血作为研究分析对象,分别采用酶联免疫吸附和化学发光法对所选标本进行检测,包含丙肝抗体、梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体检测。结果采用ELLSA检测后HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体阳性率分别为0.52%、0.79%、1.05%。采用化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体3种检测的阳性率分别为0.79%、1.05%、1.31%。标准抗体品梯度稀释后再进行检测,将此3种抗体稀释程度为10 pg/m L,三组抗体采用化学发光法进行检测,其结果均为阳性,采用酶联免疫吸附方式进行检测的只有梅毒抗体呈阳性,其余两项均为阴性。结论化学发光法作为临床进行血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体检测的首选方案,此检测方式具有更高的灵敏性。

对172名HIV-1抗病毒治疗患者耐药影响因素分析

了解抗病毒治疗患者对免费抗病毒治疗药物的耐药状况,并寻找可能导致的耐药因素。方法 选择HIV在治患者样本172份,用in-house套式聚合酶链反应扩增HIV pol区基因,通过序列测定,用ChromasPro软件进行序列拼接分析,进入Stanford HIV耐药数据库序列结果比对,获得耐药位点和耐药程度分析结果。从年龄、性别、病毒载量等因素分析导致耐药的可能的原因。结果 172例患者中有14例对至少一种药物产生耐药,占8.14%。分析结果显示病毒载量越高,耐药的可能性越大;从性别分层的分析结果显示,男性患者明显比女性患者的耐药率要高;而从年龄层次的分析结果看,年龄分层结果显示随着年龄的增大耐药率并无明显变化。结论 本研究总体耐药率已经达到世界卫生组织所规定的中度耐药水平,需要引起相关部门关注。

2012-2013年徐州市HIV-1/2抗体筛查阳性标本确证结果分析

目的对徐州市HIV-1/2抗体筛查阳性标本进行复检和确证实验。方法按《全国艾滋病检测技术规范(2009年修订版)》要求,对2012-2013年徐州市辖区内的艾滋病筛查实验室送检的HIV-1/2抗体筛查阳性标本进行复检实验(ELISA和胶体硒),复检阳性标本进行确证实验(免疫印迹法),对确证结果为不确定者进行随访复查。结果 678份筛查阳性标本中复检HIV-1抗体阳性434份,复检阳性率64.01%;确证实验阳性400份,占92.17%;不确定27份,占6.22%;阴性7份,占1.61%。400份确证阳性的标本中,有397份标本酶联免疫法筛查实验中的S/CO值>6,占99.25%;34份确证阴性和不确定样本中,21份S/CO值<6,占61.76%。确证阳性标本中出现≥7个条带的375份,占93.75%。27例不确定者随访到16例,其中14例结果阳转,2例转阴。结论筛查实验存在一定的假阳性,S/CO值>6的标本确证阳性的几率较高;对同时出现gp160和p24的不确定样本应予以重视。

HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体胶体金检测法在急诊手术前的应用

目的 应用HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体胶体金试剂在急诊手术患儿输血前的检测,并与HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体酶联免疫吸附试验技术（ELISA法）进行比较.方法 对该院2009年8月～2010年3月的1 036例急诊手术患儿,先用胶体金试剂分别检测HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体,再用ELISA法分别检测HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体,比较两种方法的结果符合率.结果 1 036份标本中HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体胶体金试剂检测阴性分别为1 031份、1 034份和1 035份,ELISA法检测阴性分别为1 033份、1 035份和1 034份.HBsAg和HCV抗体胶体金法与ELISA法检测阴性符合率均为100%;HIV-1/2抗体胶体金法与ELISA法检测阴性符合率为99.9%.结论 HBsAg,HCV抗体和HIV-1/2抗体胶体金试纸法与ELISA法检测阴性符合率高,操作简便、快速,适合急诊手术患者输血前的筛选.

唾液法与血液法检测HIV-1/2抗体的比较

唾液法与血液法检测ＨＩＶ—１／２抗体的比较李俊成曾镇光祖述宏张文波岳伟①唐小萍王文②中华人民共和国秦皇岛卫生检疫局（秦皇岛０６６００２）利用人类口腔中的唾液进行ＨＩＶ抗体的检测，是否与应用血清检测具有相同的敏感度、特异性，带着疑问，１９９４年４月，我...

HIV-1/2抗体口腔快速检测仪临床效果观察

目的:评价HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测艾滋病病毒Ⅰ/Ⅱ型(HIV-1/2)抗体的敏感性和特异性,及其与血液HIV-1/2抗体检测试剂的一致性。方法:使用HIV-1/2抗体口腔快速检测仪采集并检测已知HIV感染者37例及我院性病门诊就诊患者391例口腔外牙龈黏膜渗出液(OMT)标本,同时使用ELISA检测上述人群的血清标本HIV-1/2抗体。结果:37例已知感染者口腔外牙龈黏膜渗出液及血液标本检测均为阳性;391例就诊患者中血液样本呈阳性2例,口腔外牙龈黏膜渗出液呈阳性1例。结果不同的病例1例,后经WesternBlot试验确认为阴性。该HIV-1/2抗体口腔快速检测仪的敏感性为100%,特异性为100%,与ELISA检测的一致性为99.77%。结论:HIV-1/2抗体口腔快速检测仪检测HIV-1/2抗体结果与现行的血液ELISA检测相近。其特有的无创安全、简捷易用的特点适用于不愿或不宜采血人群、艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊和自行检测等,也适用于医疗机构,可有效降低艾滋病职业暴露的风险。

四个小檗碱类化合物的体外抗HIV-1活性

目的:研究小檗碱和巴马汀母核上己基的引入对化合物抗HIV-1活性的影响,并比较结构相似的小檗碱和巴马汀抗HIV-1活性的差异。方法:考察4个化合物对重组HIV-1RT活性、HIV-1复制和细胞毒性的影响。结果:小檗碱和巴马汀有较强的体外抑制HIV-1重组逆转录酶活性,EC50分别是63.1和44.52μg.mL-1;己基巴马汀有一定的抗HIV-1活性,合胞体抑制的EC50是0.08μg.mL-1,治疗指数为11.38;巴马汀对各种细胞系的细胞毒性较其他3种化合物小。结论:己基巴马汀有一定的抗HIV-1活性,己基的引入可能改变了其作用机制,提示构效关系的研究将为寻找高效低毒的天然化合物提供实验依据。