艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原和抗体联合检测的临床价值分析

目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检测CD4+T淋巴细胞与RNA,对比分析检测结果。结果 1 000份检测样本中,HIV抗体检测阳性80例、(HIV)-1、p24抗原检测阳性11例,(HIV)-1、p24抗原与抗体联合检测阳性6例。11例(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本中,四代酶联试剂检测显示9例HIV抗原、抗体检测阳性,2例检测阴性,进行病毒载量检测均≥20 000拷贝/ml,检测CD4细胞显示<500个/μl样本4例。结论临床应用可区分(HIV)-1、p24抗原与抗体的四代试剂进行检测可提高对HIV感染患者的检出率并缩短检测窗口期,在检测过程中结合应用病毒载量与CD4细胞水平计数检测对于促进检验准确性的提高也具有积极意义。

探讨 81 例临床分型 HIV 感染者血液样本 HIV1-RNA 载量、HIV1-P24、Anti-HIV 及 CD4+T 细胞计数检测结果的相关性

通过检测临床已知病例血样 HIV 抗原抗体含量、HIV1-RNA 及 CD4+T 细胞计数,了解 HIV1-P24 抗原及抗 HIV 抗体的含量与 HIV/AIDS 病程进展的关系,寻找监视和预测 HIV 感染者病程发展及疗效观察的敏感的免疫学指标。方法:收集81 例不同感染阶段病人血清或血浆分别检测 HIV1-P24、Anti-HIV 含量、HIV(s/co)及 CD4+淋巴细胞的数量和 HIV1-RNA 病毒载量,用统计学方法比较它们的相关性,评价它们在 HIV 感染者/AIDS 病程进展中的价值。结果:对 81 例检测结果进行统计分析:HIV1-RNA 病毒载量与 HIV1-P24 之间 U=4.02,P<0.01,数值相差非常显著;HIV1-RNA 阳性率为 0.6667,HIV1-P24阳性率为 0.1604,二者阴性/阳性符合率为 0.5185,阳性预断值均为 1.0;随着病程的发展 HIV1-RNA 病毒载量、HIV1-P24 检测结果呈现不同幅度上升趋势,而不同感染阶段相应 CD4+T 细胞计数结果呈现不同程度的下降趋势;Anti-HIV 和 HIV(s/co)具有良好的一致性,但 HIV(s/co)变化与病程长短无相关性,对病程的进展整体表现为不敏感;81 例 HIV1-P24 与 Anti-HIV检测结果:急性无症状感染期(A)HIV1-P24(18 例阴性)/Anti-HIV(18 例阳性) ;有症状感染期(B)HIV1-P24(29 例阴性,1 例阳性)/Anti-HIV(30 例阳性) ;艾滋病期(C)HIV1-P24(19 例阴性,14 例阳性)/Anti-HIV(33 例阳性) ;HIV1-P24与 Anti-HIV 检测结果同时阳性共有 15 例(其中 8 例 Cut-off:1.7-3.86;7 例 Cut-off:10.54-44.25) ,有 53.33%HIV1-P24表现为低反应性 (弱阳性) 。 结论: 用罗氏电化学发光法检测 HIV1-P24 及 Anti-HIV 的含量, 其具有结果快速准确和高灵敏性,更适合临床 HIV 感染的初筛和病程监测的需要。

石墨烯增敏的SPR技术应用于HIV1 p24抗原的检测

目的:建立石墨烯增敏的表面等离子体共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)用于检测HIV1 p24,为HIV感染者的早期快速筛查提供一种检测方法。方法:石墨烯通过静电连接在采用聚乙二醇高分子处理的SPR芯片表面,HIV1 p24特异性抗体通过石墨烯表面的羧基官能团和HIV1 p24抗体表面的氨基官能团共价结合作用固定在芯片的表面,建立一种石墨烯增敏的无标记、快速的表面等离子共振技术用于检测HIV1 p24抗原,通过优化芯片分析条件,检测HIV1 p24抗原,分析石墨烯增敏的SPR芯片技术的检测性能。结果:石墨烯增敏的SPR芯片技术检测HIV1 p24抗原的重复性、敏感性与特异性均较好;检测灵敏度为10 ng/mL,相较于相同条件传统Au-SPR生物传感器检测得到的最低检测限(63 ng/mL),降低了至少6倍。结论:初步构建的石墨烯增敏的SPR芯片技术,有望为HIV感染者的早期筛查提供一个有力的技术平台。

HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒研制重大进展

中科院武汉病毒研究所HIV分子流行病学和分子病毒学学科组与单抗实验室共同合作,经过三年的不断实验和反复研究,研制出了适于我国流行HIV毒株检测的第四代HIV-1p24抗原抗体检测试剂盒。

HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法的建立及优化

目的:建立并优化HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法(CLIA)。方法:采用化学发光免疫的方法,通过对包被条件、HIV酶用量、反应加入量、反应时间和温度等反应参数进行优化,建立HIV抗原抗体联合检测方法,使用HIV国家参考品评价所建立方法的准确性。结果:包被比例取HIV-1抗原1∶5 000、HIV-2抗原1∶1 0000、HIV P24单抗1∶2 000;检测酶比例取Biotin-P24多抗1∶2 000;HRP-HIV-1抗原1∶5 000、HRP-HIV-2抗原1∶20 000、SA-HRP 1∶4 000;待测样本75μL/孔;第一步反应温度和时间分别为37℃和60 min,第二步反应温度和时间分别为37℃和30 min,为检测方法的较佳反应条件。检测国家参考品结果表明,阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、灵敏度和精密性均符合国家参考品标准要求。结论:成功建立了特异、灵敏的HIV抗原抗体化学发光免疫检测方法,为在临床上推广应用提供了科学依据。

电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的评价

目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清样本。采用Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数进行测定。以Roche Elecsys HIV Combi试剂盒为评估试剂,以生物梅里埃Vironostika Uni-FormⅡplus O HIV抗体试剂盒为参比试剂。定性检测血清HIV p24抗原和HIV1/2抗体并评价检测方法分析性能、结果一致性和血清转化灵敏度。结果 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒批内和天间不精密度良好,符合临床使用要求。血清样本检测结果和参比试剂检测结果一致性完全符合。评估试剂的血清转化灵敏度比参比试剂平均提前了5.1 d。结论 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒具有良好的精密度和血清转换灵敏度,有利于筛查HIV早期感染,能为临床HIV早期诊断、随访监测提供有效的实验室诊断依据。

HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。

第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性原因分析

目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送至确认实验室回报结果 40例HIV抗体阳性,28例HIV抗体不确定,51例HIV抗体阴性。随着S/CO值的增高,初筛结果与确证结果阳性符合率也随之升高。结论 HIV四代检测试剂假阳性率较高,这与试剂同时检测HIV抗体和P24抗原有关。当1<S/CO≤10时,实验室检测人员应依据实验检测结果,结合受检者相应病史和个体状况进行综合分析。

HIV/AIDS患者肝组织HIV-1 p24抗原的免疫组化检测

目的 检测HIV抗原标志物在肝组织的表达情况,探讨HIV AIDS患者肝损伤发生的可能机制。方法 采用免疫组织化学方法对14例HIV AIDS患者的肝活检组织切片进行HIV 1p2 4抗原检测,比较不同病变肝组织中HIV 1p2 4抗原的表达数量。结果 在14例肝组织切片的Kupffer细胞、内皮细胞、肝细胞均发现HIV 1p2 4抗原表达;阳性肝细胞计数分析显示,表达数量随病变严重程度而增加(P <0 0 5 )。结论 HIV能够在HIV AIDS患者的肝脏内表达,并且可能参与肝细胞的凋亡。

3种HIV ELISA检测试剂灵敏度分析

目的通过检测人类免疫缺陷病毒(HIV)窗口期标本,比较目前中国使用的几种HIV酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂的灵敏度。方法 1例HIV核酸检测阳性、酶联免疫阴性首次献血者标本,于第1、2、3周各抽取血3份。用检测方法A(中国产第4代HIV ELISA检测试剂A)、检测方法 B(中国产第3代HIV ELISA检测试剂B)、检测方法 C(进口第4代HIV ELISA检测试剂C)分别进行常规抗体检测,并用生物素-亲和素ELISA对该血样本的HIV-1 P24抗原进行了单独检测。结果用检测方法 B检测时,第1、2、3周标本均显示为阴性;用检测方法 A检测时,第1、2周标本均显示为阴性,第3周标本显示为阳性;用检测方法 C检测时,第1周标本显示为阴性,第2、3周标本均显示为阳性。用生物素-亲和素ELISA检测HIV-1 P24抗原,结果显示第1、2周标本HIV-1 P24抗原均显示为阴性,第3周标本HIV-1 P24抗原显示为阳性。结论实验所用检测方法 A的中国产第4代HIV检测试剂A的灵敏度比检测方法 B的中国产第3代HIV检测试剂B灵敏度高,但比实验所用检测方法 C的进口第4代HIV检测试剂C灵敏度低。

HIV1/2抗体与P24抗原联合检测的意义研究

目的研究HIV1/2抗体与P24抗原联合检测对临床诊断的影响。方法自2006年1月-2011年3月分别收集ELISA法检测HIV1/2抗体吸光度(OD值)为临界值及大于等于阳性对照的患者血清33、29份,采用电化学发光法联合检测HIV1/2抗体与P24抗原(HIVCOM),追踪患者免疫印迹HIV确证试验结果,研究HIV1/2抗体与P24抗原联合检测对临床诊断的影响。结果 33例临界值吸光度患者中27例HIV1/2抗体与P24抗原阳性,6例阴性,29例大于等于阳性对照值吸光度的患者中28例阳性,1例阴性,免疫印迹HIV确证试验的检测结果与联合检测HIV1/2抗体及P24抗原结果一致。结论 HIV1/2抗体与P24抗原联合检测较ELISA法能够更早更准确的发现HIV感染,对临床的早期诊断和治疗具有重要的意义及应用价值。

HIV抗体不确定的血清学特征及鉴别效果

目的:分析HIV抗体不确定标本的血清学特征,探讨HIV抗体不确定结果的鉴别方法。方法:对12例HIV抗体不确定孕妇的标本进行免疫印迹确认(WB);观察12例孕妇HIV抗体的发展情况;比较条带免疫印迹法(LIA)、HIV-1p24抗原检测法以及病毒载量法(VL)对HIV不确定标本的鉴别效果。结果:12例产妇HIV抗体p24、gp160+p24、gp160不确定所占比例最高;HIV抗体转阳率为8.33%。结论:只有条带类型为gp160+p24不确定的孕妇会发生HIV抗体转阳,LIA、VL实验检测方法能有效鉴别HIV抗体不确定孕妇感染情况。

探讨几种HIV病毒感染者血液标本检测指标的相关性

目的通过检测临床已知病例血样HIV抗原抗体含量、HIV1-RNA及CD4+T细胞计数,了解HIV1-P24抗原及HIV抗体的含量与HIV/AIDS病程进展的关系,寻找监视和预测HIV感染者病程发展及疗效观察的敏感免疫学指标。方法收集162例不同感染阶段病人血清或血浆分别检测HIV1-P24、Anti-HIV含量、HIV(s/co)及CD4+淋巴细胞的数量和HIV1-RNA病毒载量,用统计学方法比较其相关性,评价其在HIV感染者/AIDS病程进展中的价值。结果对162例检测结果进行统计分析:HIV1-RNA病毒载量与HIV1-P24之间U=4.02,P<0.01,差异有显著性;HIV1-RNA阳性率为0.6667,HIV1-P24阳性率为0.1604,二者阴性/阳性符合率为0.5185,阳性预断值均为1.0;随着病程的发展,HIV1-RNA病毒载量、HIV1-P24检测结果呈现不同幅度上升趋势,而不同感染阶段相应CD4+T细胞计数结果呈现不同程度的下降趋势;Anti-HIV和HIV(s/co)具有良好的一致性,但HIV(s/co)变化与病程长短无相关性,对病程的进展整体表现为不敏感;162例HIV1-P24与Anti-HIV检测结果:急性无症状感染期(A)HIV1-P24(36例阴性)/Anti-HIV(36例阳性);有症状感染期(B)HIV1-P24(58例阴性,2例阳性)/Anti-HIV(60例阳性);艾滋病期(C)HIV1-P24(38例阴性,28例阳性)/Anti-HIV(66例阳性);HIV1-P24与Anti-HIV检测结果同时阳性共有30例(其中16例HIV1-P24Cut-off1.7-3.86;14例HIV1-P24Cut-off10.54-44.25),有53.33%HIV1-P24表现为低反应性(弱阳性)。结论用罗氏电化学发光法检测HIV1-P24及Anti-HIV的含量,其结果快速准确具有高灵敏性,更适合临床HIV感染的初筛和病程监测的需要。