甘蓝磷酯酶D HKD2功能区基因片段的克隆与反义表达载体的构建

以甘蓝 (Brassiaca oleracea)为材料 ,取幼叶分离 m RNA,反转录合成 c DNA,以 c DNA第一链为模板 ,通过 PCR扩增 ,获得甘蓝磷酯酶 D (Phosphorate Lipid Dehydrolase,PLD) HKD2功能区的基因片段 .对其进行Blast分析 ,结果表明 ,分离的目的片段核苷酸序列与 Genbank中报道的甘蓝 PLD基因相比同源率为 99.7% ,只有 2个碱基发生改变 .将得到的 PLD基因片段插入植物表达载体 p AT940 ,构建了 PLD基因反义表达载体p ATC-r PLD,为下一步进行抗逆转基因作物选育打下基础 .