逆转录酶基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流的作用

目的研究逆转录酶(TERT)基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流(INa)的作用。方法构建TERT基因过表达或沉默慢病毒载体,感染HL-1细胞,分为过表达慢病毒载体(TERT)组、对照载体(Vector)组、TERT RNA干扰慢病毒载体(shTERT)组、对照载体(shNC)组。应用定量荧光原位杂交(Q-Fish)方法测定端粒长度,应用CCK-8法绘制细胞生长曲线,应用全细胞膜片钳技术记录INa。结果TERT组HL-1细胞端粒长度明显延长,从3.33±1.01延长至4.03±0.94(n=5,P<0.01),且增殖能力明显增强;-35 mV去极化时,与Vector组比较,TERT组HL-1细胞INa电流密度从(-149.5±12.6)pA/pF增至(-213.3±17.2)pA/pF(n=10,P<0.01)。而与shNC组比较,shTERT组INa电流密度从(-141.3±13.5)pA/pF降至(-87.3±9.8)pA/pF(n=10,P<0.01)。TERT组钠通道稳态失活曲线右移,通道关闭态失活时间延长,失活后恢复加速,shTERT组的效应恰好相反。而TERT组、shTERT组钠通道稳态激活和中间态失活变化不大。结论TERT基因对HL-1细胞INa有明显的调控作用,这可能是其改变心房肌细胞电生理的机制之一。