枸杞多糖促进HL-60细胞的吞噬功能

目的探究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对人中性粒细胞株HL-60细胞吞噬功能的影响及其相关机制。方法采用不同浓度(0,1,10,100,200,500μg/mL)LBP刺激HL-60细胞24 h后,通过CCK-8和流式细胞术检测HL-60细胞的存活率和吞噬功能变化情况,通过免疫印迹法(Western blot)检测HL-60细胞磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)信号通路Akt磷酸化情况。阻断实验分为对照组、LBP组、LBP+PI3K抑制剂(Wortmannin)组。LBP组以200μg/mL LBP单独刺激HL-60细胞24 h;LBP+Wortmannin组先以1μmol/L Wortmannin预刺激HL-60细胞2 h,再加入200μg/mL LBP继续作用24 h后检测HL-60细胞吞噬功能情况。为了检测HL-60细胞表面受体的表达情况,实验分为对照组和LBP组(200μg/mL),采用流式细胞术检测CD36、CD204、CD209、胶原样结构巨噬细胞受体(macrophage receptor with collagenous structure,MARCO)和Dectin吞噬相关受体表达情况。结果不同剂量LBP处理后,HL-60细胞的存活率未发生明显变化(P>0.05);与0μg/mL LBP比较,1~200μg/mL LBP刺激HL-60细胞吞噬百分率明显增加(P<0.01);与对照组比较,200μg/mL LBP组磷酸化Akt表达增加(P<0.05)。PI3K阻断实验表明,与LBP组比较,LBP+Wortmannin组LBP促进HL-60吞噬E.coli的效应部分抑制(P<0.05)。与对照组比较,LBP组HL-60细胞MARCO受体表达水平明显增加(P<0.05),而CD36、CD204、CD209和Dectin无明显变化(P>0.05)。结论LBP通过PI3K-Akt信号通路促进HL-60细胞吞噬E.coli,这种吞噬功能的提高可能与MARCO受体表达上调有关。

珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖的抑制和诱导分化作用的研究

目的:观察珠子参对人早幼粒白血病HL-60细胞增殖的抑制和诱导分化作用。方法:采用HL-60细胞株体外培养,MTT法观察各药物及含药血清不同作用时间的直接细胞毒作用;细胞涂片观察细胞形态学改变;试剂盒检测酸性磷酸酶(ACP)含量。结果:珠子参血清和珠子参煎液均有明显的细胞毒作用,72小时时抑制率分别为31.27%、34.23%,与5-氟脲嘧啶(5-FU)联合应用后,达73.32%、76.28%;作用72小时后ACP活性高于对照组(P<0.01)。细胞形态学观察以中幼粒及晚幼粒为主,分别占36.8%、75.8%,向成熟细胞方向分化。结论:珠子参在体外对HL-60细胞株有细胞毒作用,且能提高5-FU的敏感性,有诱导HL-60细胞分化的功能。

华蟾素对HL-60细胞凋亡诱导作用及与三氧化二砷的协同作用

[目的]观察华蟾素对白血病细胞的凋亡诱导作用及其与三氧化二砷(As2O3)的协同作用。[方法]通过形态学方法、DNA电泳、AnnexinV标记法检测华蟾素或(和)As2O3 作用后HL_60细胞的凋亡发生情况。[结果]0.0625μg/ml～0.5μg/ml的华蟾素作用48h后 ,HL_60细胞发生凋亡 ,并具有一定的量效关系 ;华蟾素与As2O3 合用后对HL_60细胞的凋亡诱导作用明显增强。[结论]华蟾素对白血病细胞具有凋亡诱导作用 ,并且与As2O3 具有协同作用。

中药安迪对HL-60细胞分化的诱导作用

目的 探讨安迪粉针剂 (Andi)对 HL- 60细胞分化的诱导作用 .方法 采用人早幼粒白血病细胞株 (HL - 60 )为靶细胞 ,分为不加任何药物的对照组 (C组 )、安迪粉针剂 (Andi)组、阳性对照药维甲酸 (RA)组和苦参 (KS)组 ,进行体外培养和诱导分化 ,观测细胞生长曲线、细胞形态、硝基蓝四氮唑(NBT)还原和吞噬能力等指标 .结果 2 mg· L-1 Andi可显著地抑制 HL - 60细胞增殖 ,使原始细胞分化为中幼以下的成熟细胞 ,分化后的细胞具有 NBT还原能力和吞噬功能 ;Andi为 68.0 % ,RA为 61 .5% ,KS为 59.0 % ,C组还原能力仅6.0 % (P<0 .0 1 vs C) .其形态的改变和吞噬能力与阳性对照药维甲酸 (RA)和苦参 (KS)相似 ,分别为 52 .0 % ,45.5%和56.5% (P>0 .0 5) ;均明显高于空白对照组 .C组吞噬功能仅7.5% (P <0 .0 1 vs C)其 NBT还原能力与 KS相当 (P >0 .0 5) .结论 Andi对 HL -

白花蛇舌草提取物对白血病HL-60细胞的抑制作用

目的:探讨白花蛇舌草提取物对HL-60细胞的抑制作用及其机制。方法:采用四氮唑蓝(MTT)抑制试验检测白花蛇舌草提取物对HL-60细胞的抑制作用。结果:白花蛇舌草提取物对HL-60细胞有明显的抑制作用,并且呈剂量-时间依赖关系。结论:白花蛇舌草提取物可能是通过直接影响肿瘤细胞的能量代谢,从而抑制HL-60细胞生长。

聚酯型儿茶素对HL-60细胞的诱导分化作用及其机制研究

目的 研究聚酯型儿茶素对人急性早幼粒白血病HL 6 0细胞的分化作用并探讨其作用机制。方法 应用电镜、NBT还原试验、同位素掺入试验、细胞内cAMP/cGMP浓度测定、原位杂交和免疫细胞化学等方法研究细胞分化及机制。结果 聚酯型儿茶素作用于HL 6 0细胞后 ,扫描电镜和透射电镜观察显示分化细胞的特征 ;NBT还原能力明显增强 ;[3H] TdR ,[3H] Leu掺入试验证明聚酯型儿茶素可明显抑制细胞DNA和蛋白质合成 ;聚酯型儿茶素作用后 ,细胞内cAMP浓度及cAMP/cGMP比值明显增加 ,HL 6 0细胞的c myc基因mRNA和蛋白产物的表达均明显降低 ,而c fos基因mRNA和蛋白产物的表达均明显升高。结论 聚酯型儿茶素可诱导HL 6 0细胞向成熟细胞分化 ,其分化作用可能与其升高细胞内cAMP/cGMP比值和抑制c myc基因表达、增强c fos基因表达有关。

猫儿眼植物酸对人HL-60细胞抑制作用的机制

目的:分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人HL-60细胞抑制作用机制。方法:实验于2003-07/2004-07在甘肃省医学科学研究院药理毒理学实验室完成。采用流式细胞仪、克隆形成和噻唑蓝(简称MTT)法对猫儿眼植物酸抗肿瘤细胞增殖作用进行分析。结果:分别给予人HL-60细胞猫儿眼植物酸0.1,1.0和10.0ng/L,MTT法测定,对人HL-60细胞增殖的抑制率分别为24.6%,69.6%,83.1%;克隆形成抑制率分别为29.3%,55.8%和71.4%;凋亡率分别为6.4%,8.8%和21.8%。结论:猫儿眼植物酸对人HL-60细胞增殖具有明显的抑制作用。

淫羊藿甙对HL-60细胞诱导分化作用的研究

淫羊藿又名仙灵脾，为历代常用的补益中药。为小蘖科多年生草本植物。采用的淫羊藿甙是从朝鲜淫羊藿中提取的单体成份，为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂，研究了淫羊藿甙对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用。结果如下：

苦荞胰蛋白酶抑制剂对HL-60细胞增殖的抑制作用

应用MTT法分析了苦荞胰蛋白酶抑制剂对急性髓细胞性白血病细胞株HL 60细胞生长的影响。结果显示 :苦荞胰蛋白酶抑制剂能够显著抑制HL 60白血病细胞的增殖 ,而对正常细胞毒性较小 ,其IC5 0值分别为 0 2 9g/L和 1 0 1g/L ,并且对HL 60细胞增殖的抑制作用呈明显的剂量 -效应和时间 -效应关系。这一结果表明 ,苦荞胰蛋白酶抑制剂可显著地抑制HL 60细胞的增殖 。

盐酸小檗碱对HL-60细胞的诱导分化及其作用机制

目的:研究盐酸小檗碱对人早幼粒白血病HL-60细胞诱导分化的作用及其分子机制。方法:HL-60细胞经盐酸小檗碱处理后,观察细胞形态学变化,以及细胞NBT还原能力的改变,用流式细胞仪测定细胞增殖周期、CD11b、C-myc、C-fos表达。结果:盐酸小檗碱作用于HL-60细胞后,形态学观察显示分化细胞的特征;NBT还原能力增强;CD11b表达升高;细胞被阻滞于G0/G1期,S期细胞数明显减少;C-myc基因表达减弱,C-fos基因表达增强。结论:盐酸小檗碱可诱导HL-60细胞分化成熟,其机制可能是通过调控与HL-60细胞增殖、分化相关基因表达,抑制DNA合成,从而抑制细胞增殖,诱导细胞分化。

冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的增殖抑制作用

背景：已有研究证明,冬凌草乙素可以通过诱导许多实体肿瘤的细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,目前,冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的作用尚未见资料报道。目的：观察冬凌草乙素对白血病HL-60细胞的体外增殖抑制作用及其机制。方法：以不同浓度的冬凌草乙素（10~50μmol/L）作用于体外培养的HL-60细胞24,48,72h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期,免疫印迹法检测Caspase-3及其裂解底物多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）表达水平的变化,并对细胞周期调节蛋白P21、P16的表达水平进行检测。结果与结论：冬凌草乙素可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系。流式细胞术检测结果表明细胞主要被阻滞在G0/G1期,50μmol/L的冬凌草乙素作用48h后可以出现典型的亚G1期峰（细胞凋亡峰）。免疫印迹法检测结果显示Mr32000的Caspse-3酶被活化出现Mr20000亚单位片段,同时Caspse-3的底物PARP被裂解出现Mr89000的亚单位片段,免疫印迹法检测结果还显示50μmol/L的冬凌草乙素作用不同时间后,细胞周期调节蛋白P21及P16的表达水平逐渐升高。结果提示冬凌草乙素在体外对HL-60细胞具有显著的细胞周期阻滞作用,并诱导细胞发生凋亡,通过上调细胞周期调节蛋白P21及P16的表达水平及激活Caspse-3可能是冬凌草乙素引起HL-60细胞G0/G1阻滞及诱导细胞发生凋亡的重要作用机制之一。

土贝母皂苷对HL-60细胞周期作用的研究

目的:应用土贝母皂苷(下称皂苷)作用于人早幼粒白血病细胞(HL -60),研究皂苷抗肿瘤作用的分子机制。方法:采用流式细胞术等方法分析细胞周期及凋亡;蛋白印迹免疫法检测细胞凋亡及周期相关基因 bcl- 2、cdc2 和 cy clinB1表达的变化。结果:15μmol/L皂苷作用 24 h 可将 HL -60 细胞阻滞于G2/M期,进而诱导凋亡,流式细胞仪检测肿瘤细胞出现典型的亚二倍体“凋亡小峰”。凋亡抑制基因bcl 2表达无明显变化,周期蛋白 cyclinB1 表达降低,而cdc2表达无明显改变。结论:皂苷导致HL- 60细胞 G2/M期阻滞,进而诱导凋亡;周期阻滞的分子机制与降低 cy clinB1蛋白水平有关,而凋亡的诱导与bcl- 2表达无关。

低分子RNA与高三尖杉酯碱联用对白血病细胞系HL-60细胞作用的实验观察

目的：研究低分子RNA与抗白血病药物高三尖杉酯碱联用对HL-60细胞药物敏感性的影响。方法：采用细胞形态学观察、四唑盐（MTT）比色法分析细胞增殖以及应用凯氏定氮法测定细胞蛋白质的含量。结果：①0．05～50μg／ml高三尖杉酯碱对HL-60细胞增殖有抑制作用，并与时间和剂量相关。②低分子RNA与高三尖杉酯碱联用能显著降低HL-60细胞的增殖率，并进一步降低细胞内蛋白质的合成。结论：低分子RNA能提高HL-60细胞对白血病药物高三尖杉酯碱的敏感性，两者联用能有效抑制白血病细胞系HL-60细胞的增殖。

维生素K_3对HL-60细胞凋亡的诱导作用

目的 :观察维生素K3 (VK3 )对HL - 6 0细胞凋亡的诱导作用。方法 :通过形态学、DNA电泳、AnnexinV标记法检测VK3 作用后HL - 6 0细胞的凋亡发生情况。结果 :2、5、10、2 0 μmol/L的VK3 作用于HL - 6 0细胞 4 8h后凋亡发生率分别为 8.76 %、9 7%、18 5 4 %、75 4 % ;10 μmol/L的VK3 作用于HL - 6 0细胞 2 4、4 8、72、96h后凋亡发生率分别为 11 35 %、18 5 4 %、2 1 2 2 %、37 5 4 %。结论 :VK3 能诱导HL - 6 0细胞发生凋亡 ,并具有一定的量效和时效关系。

苏木等15种中草药水提液体外对 HL-60、Yac-1、K_(562)、L_(929)的细胞毒作用

在以 HL-60细胞为靶细胞对临床常用的302种治癌中草药进行体外诱导分化的实验中,我们发现苏木等15种中药水提液对 HL-60细胞有较强的细胞毒效应。为进一步观察其体外抗癌作用,分别以Yac-1、K562、L929等细胞株为靶细胞。

柴胡皂甙d(SSd)对HL-60细胞增殖的抑制作用

目的研究柴胡皂甙d对HL-60细胞生长的影响.方法分别用不同浓度的SSd作用于HL-60细胞株,于不同时间段分别计数其平均细胞数并绘制相应生长曲线计算平均抑制率.药物作用后24,36,48 h计算分裂指数.结果用药后HL-60细胞的细胞数、分裂指数均下降,下降幅度与剂量呈正相关.结论SSd能抑制HL-60细胞增殖,这种抑制作用呈时间和剂量依赖关系(P＜0.05).

墓头回对HL-60细胞诱导分化作用的实验研究

1 材料和方法1.1 墓头回 购自河北省,品种未鉴定。1.2 墓头回水煎液的制备 取墓头回生品50g,粉碎,加蒸馏水500ml,浸泡30min后,100℃水浴蒸发,收集上清液,共提取2次,合并提取液,1000rpm,离心20min,再次100℃水浴蒸发至50ml,该药液浓度为100％,高压灭菌后备用。1.3 细胞与细胞培养 HL-60细胞引自中国医学科学院血液学研究所,培养液为RPMI-1640（GIBCO产品）,加入15％胎牛血清,在含5％CO2的37℃温箱内传代培养。

姜黄素对白血病耐药细胞HL-60/ADR的抑制及抗肿瘤作用的研究

目的研究姜黄素对白血病耐药细胞HL60/ADR的抑制作用。并且与抗癌药物阿霉素对HL-60/ADR细胞的体外杀伤作用进行了比较。方法应用MTT法检测姜黄素对细胞的毒作用及杀伤作用,用荧光分光光度法进行细胞内阿霉素蓄积测定。结果姜黄素明显抑制白血病耐药细胞HL-60/ADR细胞的生长,24、48和72h的IC50分别为8.94、5.21和3.82μg/mL。姜黄素与阿霉素合用,在HL60/ADR细胞中均有增敏作用。结论姜黄素可抑制白血病耐药细胞HL-60/ADR细胞的生长,与阿霉素之间无交叉耐药。